50× ROX Reference Dye:實(shí)時(shí)定量PCR中的關(guān)鍵校正試劑50× ROX Reference Dye 是一種用于實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)的熒光校正染料,廣泛應(yīng)用于ABI、Stratagene等品牌的實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。其主要作用是校正由于加樣誤差、孔間差異或儀器光學(xué)系統(tǒng)不一致導(dǎo)致的熒光信號(hào)偏差,從而提高qPCR實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。產(chǎn)品特點(diǎn)高濃度設(shè)計(jì):50× ROX Reference Dye 的濃度為25 μM,使用時(shí)需根據(jù)儀器型號(hào)和反應(yīng)體系進(jìn)行稀釋。適用機(jī)型廣:適用于多種ABI和Stratagene品牌的qPCR儀器,如ABI 5700、7900HT Fast、StepOne、StepOne Plus等。保存條件:常溫運(yùn)輸,-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期可達(dá)2年。應(yīng)用場(chǎng)景校正孔間誤差:在qPCR實(shí)驗(yàn)中,由于加樣量、孔位置、試管壁厚度或管蓋透光性差異,可能導(dǎo)致熒光信號(hào)的偏差。ROX染料通過(guò)提供穩(wěn)定的熒光背景,校正這些差異,提高數(shù)據(jù)的可靠性。標(biāo)準(zhǔn)化熒光信號(hào):ROX染料可對(duì)報(bào)告染料(如SYBR Green I或TaqMan探針)的熒光強(qiáng)度進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理,為多重定量PCR提供穩(wěn)定的基線??傊?0× ROX Reference Dye 是實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)中不可或缺的校正試劑,能夠提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性,是分子生物學(xué)研究和臨床檢測(cè)中的重要工具。
一、靈敏度與特異性該試劑采用 SYBR Green I 熒光染料,這種染料能夠特異性地結(jié)合到雙鏈 DNA 上,當(dāng) DNA 在 PCR 過(guò)程中被擴(kuò)增時(shí),熒光信號(hào)也隨之增強(qiáng)。其靈敏度極高,即使在樣本中目標(biāo)基因的初始拷貝數(shù)極低的情況下,也能準(zhǔn)確地檢測(cè)到其擴(kuò)增信號(hào)。同時(shí),通過(guò)優(yōu)化的反應(yīng)體系,有效減少了非特異性擴(kuò)增的產(chǎn)生,確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的特異性。例如,在對(duì)微量的病毒核酸進(jìn)行檢測(cè)時(shí),SYBR Green qPCR Mix (2×, High ROX, UDG Plus) 能夠識(shí)別并擴(kuò)增目標(biāo)病毒基因,避免了其他非病毒核酸的干擾,為病原體的早期診斷提供了有力支持。二、高濃度 ROX 參考染料,穩(wěn)定可靠qPCR 實(shí)驗(yàn)中,ROX 參考染料的作用不容小覷。SYBR Green qPCR Mix (2×, High ROX, UDG Plus) 中的高濃度 ROX 參考染料,能夠有效校正孔間熒光信號(hào)的差異,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性和穩(wěn)定性。在多孔板實(shí)驗(yàn)中,不同孔之間的熒光信號(hào)可能會(huì)因儀器的微小差異、加樣量的不均勻等因素而產(chǎn)生波動(dòng)。高濃度的 ROX 參考染料如同一把標(biāo)尺,對(duì)這些波動(dòng)進(jìn)行校正,使得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確可靠。無(wú)論是單次實(shí)驗(yàn)還是大規(guī)模的樣本檢測(cè),都能保證結(jié)果的一致性,為科研數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析提供了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。Recombinant Cynomolgus IL-33 Protein,His Tag由于其高活性,pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶允許從極少量的細(xì)胞中進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如單細(xì)胞水平的研究。
dUTP(脫氧尿苷三磷酸)是一種特殊的核苷酸,其結(jié)構(gòu)與dTTP(脫氧胸苷三磷酸)相似,但在堿基部分含有尿嘧啶而非胸腺嘧啶。dUTP在分子生物學(xué)中具有獨(dú)特的應(yīng)用價(jià)值,尤其是在DNA合成、PCR反應(yīng)以及基于尿嘧啶的標(biāo)記和檢測(cè)中。產(chǎn)品特點(diǎn)dUTP Solution (100 mM) 是一種高純度的即用型溶液,濃度為100 mM,能夠滿足多種實(shí)驗(yàn)需求。與傳統(tǒng)的dNTP(如dATP、dTTP、dCTP和dGTP)不同,dUTP中的尿嘧啶可以被特定酶識(shí)別和作用,例如尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)。這一特性使其在某些實(shí)驗(yàn)中具有不可替代的作用。dUTP溶液經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保其純度和穩(wěn)定性。其高濃度設(shè)計(jì)便于實(shí)驗(yàn)人員根據(jù)具體需求進(jìn)行稀釋和使用,同時(shí)減少了試劑添加量,降低了污染風(fēng)險(xiǎn)。應(yīng)用場(chǎng)景dUTP在分子生物學(xué)中具有多種獨(dú)特的應(yīng)用:PCR反應(yīng)中的熱啟動(dòng):dUTP常用于熱啟動(dòng)PCR技術(shù)中,通過(guò)引入尿嘧啶標(biāo)記的引物,利用UDG酶在PCR反應(yīng)前降解引物,從而防止非特異性擴(kuò)增。DNA標(biāo)記與檢測(cè):dUTP可用于DNA標(biāo)記,通過(guò)將尿嘧啶引入DNA鏈,后續(xù)可通過(guò)UDG酶或熒光標(biāo)記的抗尿嘧啶抗體進(jìn)行檢測(cè),實(shí)現(xiàn)對(duì)特定DNA片段的標(biāo)記和追蹤。
產(chǎn)品特點(diǎn)50× ROX Reference Dye的主要成分是高純度的5-ROX甘氨酸,其濃度為25 μM,以50倍濃縮的形式提供。這種染料的熒光強(qiáng)度在PCR過(guò)程中保持穩(wěn)定,不會(huì)因擴(kuò)增反應(yīng)而發(fā)生變化,因此可以作為理想的內(nèi)部參考信號(hào)。其激發(fā)波長(zhǎng)為575 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為602 nm,與多數(shù)qPCR儀器的光學(xué)系統(tǒng)兼容。此外,ROX Reference Dye具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,能夠在-20℃避光保存長(zhǎng)達(dá)2年,短期使用時(shí)可在4℃保存。這種穩(wěn)定性使其在實(shí)驗(yàn)中能夠提供一致的熒光信號(hào),減少因試劑變質(zhì)導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差。性能優(yōu)勢(shì)校正孔間誤差:qPCR實(shí)驗(yàn)中,由于加樣量、孔位置、試管壁厚度等因素,不同孔之間的熒光信號(hào)可能存在差異。50× ROX Reference Dye能夠通過(guò)校正這些非PCR相關(guān)的變化,顯著提高定量的精確度。提高數(shù)據(jù)重現(xiàn)性:通過(guò)使用ROX染料對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化處理,實(shí)驗(yàn)人員可以在較少的重復(fù)實(shí)驗(yàn)中獲得更精確的結(jié)果,從而節(jié)省時(shí)間和資源。適用于多種儀器:50× ROX Reference Dye兼容多種主流qPCR儀器,如ABI 5700、7000、Tn5 轉(zhuǎn)座酶由兩個(gè)化學(xué)性質(zhì)相同的單體組成二聚體,每個(gè)單體主要有三個(gè)結(jié)構(gòu)域,包括 N 端的 α 螺旋結(jié)構(gòu)域。
一、產(chǎn)品特點(diǎn)(一)高靈敏度該qPCR Mix采用了先進(jìn)的熱啟動(dòng)Taq酶技術(shù),通過(guò)化學(xué)修飾將酶活性鎖定在低溫條件下,在PCR反應(yīng)的高溫變性階段釋放活性。這一特性有效避免了非特異性擴(kuò)增,顯著提高了反應(yīng)的靈敏度,即使對(duì)于低豐度的靶基因,也能實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。例如,在檢測(cè)稀有突變基因時(shí),其高靈敏度能夠確保即使在野生型基因背景中含量極低的突變基因也能被準(zhǔn)確識(shí)別,為病痛早期篩查等研究提供了有力支持。(二)高特異性其獨(dú)特的緩沖體系經(jīng)過(guò)優(yōu)化,能夠精確調(diào)控引物與模板的結(jié)合過(guò)程。在反應(yīng)過(guò)程中,該體系可有效減少引物二聚體的形成,同時(shí)增強(qiáng)引物與目標(biāo)模板的特異性結(jié)合能力。這使得在復(fù)雜的基因組背景下,目標(biāo)基因得以高效擴(kuò)增,從而顯著提高了qPCR反應(yīng)的特異性。在多基因家族成員的區(qū)分檢測(cè)中,這種高特異性優(yōu)勢(shì)尤為明顯,能夠避免因引物錯(cuò)配導(dǎo)致的非目標(biāo)基因擴(kuò)增,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。盡管Ultra-Long Master Mix設(shè)計(jì)用于長(zhǎng)片段擴(kuò)增,但在某些情況下,可能出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增,需要通過(guò)優(yōu)化引物。Recombinant Mouse VLDLR Protein,His Tag
該預(yù)混液的無(wú)染料配方使其適用于多種后續(xù)應(yīng)用,如凝膠電泳分析、測(cè)序或克隆,而不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾。Recombinant Mouse PSCA Protein,His Tag
Ultra-Long DNA Polymerase 是一種專為超長(zhǎng)片段擴(kuò)增設(shè)計(jì)的耐熱DNA聚合酶,具有鏈延伸能力和高保真性,能夠高效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)數(shù)十千堿基(kb)的DNA片段。這種聚合酶在基因組學(xué)研究中具有重要意義,尤其是在復(fù)雜基因組的完整組裝和超長(zhǎng)測(cè)序領(lǐng)域。特點(diǎn)Ultra-Long DNA Polymerase 的重要優(yōu)勢(shì)在于其超長(zhǎng)擴(kuò)增能力。它能夠在單次反應(yīng)中合成超過(guò)100 kb的DNA片段,甚至在某些優(yōu)化條件下,比較大讀長(zhǎng)可達(dá)數(shù)百萬(wàn)堿基。這種能力使其在填補(bǔ)基因組組裝中的缺口(gap)和實(shí)現(xiàn)端粒到端粒(T2T)基因組組裝方面表現(xiàn)出色。此外,Ultra-Long DNA Polymerase 具有高保真性,能夠降低擴(kuò)增過(guò)程中的錯(cuò)誤率,這對(duì)于需要高精度的基因組學(xué)研究至關(guān)重要。它還具備3'-5'外切酶活性,能夠進(jìn)一步提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性和可靠性。應(yīng)用Ultra-Long DNA Polymerase 在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大潛力。例如,在植物基因組學(xué)中,它被用于優(yōu)化超長(zhǎng)DNA片段的提取和擴(kuò)增,成功實(shí)現(xiàn)了多個(gè)植物物種的高質(zhì)量T2T基因組組裝。通過(guò)結(jié)合牛津納米孔(Oxford Nanopore)測(cè)序技術(shù),Ultra-Long DNA Polymerase 能夠生成超長(zhǎng)讀長(zhǎng)的測(cè)序數(shù)據(jù),明顯提高了基因組組裝的完整性和準(zhǔn)確性。
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過(guò)添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測(cè)手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過(guò)程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,...