genovis的FucosEXO在生理緩沖液和中性pH值中具有活性,使其與大多數(shù)樣品相容。此外,F(xiàn)ucosEXO活性不依賴于任何可能影響LC-MS分析的輔因子,如BSA。根據(jù)底物的性質(zhì),F(xiàn)ucosEXO 可在 1 至 2 小時內(nèi)水解糖蛋白上的末端 α1-2,3,4 連接的巖藻糖殘基,而對于非常復雜的樣品可能需要更長的孵育時間。FucoseEXO也可固定在離心柱中,可快速方便地處理高達0.5mg的糖蛋白。使用離心柱形式,將糖蛋白樣品與固定化的FucosEXO樹脂一起孵育,然后在離心步驟中輕松收集消化的糖蛋白。在變性反應條件下,PNGase F 在 30 分鐘內(nèi)成功將更復雜的 F 融合蛋白阿巴西普和阿柏西普去糖基化。福建高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
經(jīng)過多年的經(jīng)驗積累及市場積淀,倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線,分別滿足體外診斷、organoid及干細胞、細胞基因藥物等領(lǐng)域的需求。其中,細胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級MSC/PSC培養(yǎng)基、GMP級膠原酶、AAV滴度檢測產(chǎn)品、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測產(chǎn)品、聚糖分析用酶、ADC偶聯(lián)技術(shù)、QED抗體對、AAV中和抗體、蛋白酶等;相關(guān)品牌有挪威ArcticZymes Technologies、德國BASF、德國Sartorius、德國Nordmark、瑞典Genovis、美國QED、中國君研生物等。北京N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)依那西普的磷性能測試?:PNGaseF去除N-聚糖。
Genovis的SialEXO Immobilized是一種微離心柱,用于在室溫下孵育30分鐘后完全去除0.5mg天然糖蛋白上的唾液酸。為了研究依那西普的潛在電荷變體,開發(fā)了一種使用SialEXO固定化柱對糖蛋白進行去唾液酸化的一般工作流程。毛細管電泳通常用于在生物制劑的表征和質(zhì)量控制過程中確定電荷變體。使用SialEXO Imfixedized對糖蛋白進行去唾液酸化,并使用ProteinSimple的Maurice在成像等電聚焦中進行分析。綜合起來,該分析工作流程改進了糖蛋白的分離并實現(xiàn)了電荷異構(gòu)體分析。依那西普,如果不首先去除唾液酸,將很難分析,但使用SialEXO固定化分離峰可以獲得。
從依那西普水解β1-3和β1-4半乳糖:Genovis的GalactEXO Immobilized 對 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖均具有酶活性,這些半乳糖存在于裝飾有 N- 和 O-連接糖基化的生物制藥中,例如 Fc-融合蛋白依那西普。將依那西普與GalactEXO固定化孵育60分鐘,并在FabRICATOR消化后使用LC-MS在亞基水平上研究酶活性。TNFR和Fc/2片段分別分析。與GalactEXO Immobilized孵育導致N-連接和O-連接聚糖上的半乳糖殘基水解,這在半乳糖基化物種中被視為信號丟失。對游離的N-聚糖分析證實了LC-MS數(shù)據(jù)。兩種酶都含有 His 標簽,酶的分子量為 43 kDa 和 66 kDa。
用于糖蛋白去唾液酸化的凍干酶混合物。Genovis的SialEXO 凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在 2000 個單位的小瓶中,用于 2 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 用于方法開發(fā)的靈活格式;2. 可以結(jié)合酶以提高效率;3. 適用于自動化工作流程;4. 即用型 - 只需加水即可。用于水解ɑ2-3-連接唾液酸的凍干酶。 Genovis的SialEXO 2-3凍干劑以凍干粉末的形式提供,裝在500個單位的小瓶中,用于0.5mg糖蛋白的去唾液酸化。 與唾液酸酶混合物 SialEXO 相比,SialEXO 2-3 是一種 α2-3 特異性唾液酸酶,允許對 α2-3 連接的唾液酸進行靶向分析。O-和N-糖基化蛋白的高效α2-3去唾液酸化可以在1小時內(nèi)實現(xiàn)。FucosEXO 可在 1 至 2 小時內(nèi)水解糖蛋白上的末端 α1-2,3,4 。云南凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶糖生物學研究
GalNAcEXO凍干劑以凍干粉末的形式提供,裝在2000單位的小瓶中,用于水解2mg糖蛋白上的GalNAc殘基。福建高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
當在完整狀態(tài)下進行分析時,EPO的聚糖異質(zhì)性導致了非常復雜的質(zhì)譜圖。通過在 37°C 下在 OmniGLYZOR Microspin 柱上孵育 1 小時,可以有效地去除 N 糖(含有PNGase F酶)和 O-糖,如對應于未修飾蛋白質(zhì)的單個峰所示。EPO上殘留了少量用乙酰化唾液酸修飾的O-聚糖,因為OmniGLYZOR對這種結(jié)構(gòu)的水解效率低下。根據(jù)制造商Genvois的建議(在37°C下進行O/N孵育),兩種底物蛋白也用另一種市售的去糖基化產(chǎn)物處理,并顯示數(shù)據(jù)以供比較。另一方面,N-聚糖在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中翻譯地連接到未折疊的蛋白質(zhì)上。這導致某些 N-糖基化位點難以被 Genovis的PNGase F 接近,或者一旦底物蛋白折疊成其天然狀態(tài),就根本無法接近。因此,這種N-聚糖的水解需要底物蛋白以與酶活性相容的方式變性。福建高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
糖蛋白性能測試:O-聚糖的巖藻糖基化參與功能上重要的聚糖表位的合成,例如血型抗原和劉易斯結(jié)構(gòu)。分析用...
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【詳情】我們測量了FucosEXO從一組dai表不同鍵的不同寡糖底物中釋放的巖藻糖。FucosEXO可有效釋...
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