OglyZOR 來(lái)源于口腔鏈球菌，在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有 His 標(biāo)簽，分子量為 227 kDa。SialEXO來(lái)源于Akkermansia muciniphila，在大腸桿菌中表達(dá)。SialEXO酶含有His標(biāo)簽，組分的分子量分別為42 kDa和66 kDa。1.高效O-糖苷酶；2. 降低樣品異質(zhì)性，揭示潛在的關(guān)鍵蛋白質(zhì)修飾；3. 完全、穩(wěn)健地去除 O-糖he心 1 二糖。Genovis的凍干酶，用于水解糖蛋白上的he心1 O-聚糖。OglyZOR 凍干劑以凍干粉的形式提供，裝在 2000 個(gè)單位的小瓶中，用于在 2 mg 糖蛋白上水解he心 1 O-聚糖。它需要去除唾液酸助劑才能發(fā)揮作用，因此與2000單位的SialEXO凍干一起提供。在大腸桿菌中表達(dá)，帶有His標(biāo)簽，分子量為52 kDa。遼寧凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
Genovis的SialEXO產(chǎn)品是用于去除和分析唾液酸的唾液酸酶。這些酶對(duì)天然糖蛋白或游離的聚糖結(jié)構(gòu)上存在的 N- 和 O-連接聚糖均具有活性。SialEXO用于在用OpeRATOR或OglyZOR消化之前預(yù)處理O-糖基化蛋白。其他應(yīng)用包括降低樣品復(fù)雜性、電荷異構(gòu)體分析和外切糖苷酶陣列。N-連接、O-連接和游離聚糖的高效去唾液酸化快速去除唾液酸，增強(qiáng)對(duì)蛋白質(zhì)電荷變體的分析可固定在即用型離心柱中。然后可以用FabRICATOR消化所得的去糖基化蛋白，并通過(guò)中級(jí)質(zhì)譜分析。我們將該工作流程應(yīng)用于依那西普的分析，雖然未經(jīng)處理的TNFR結(jié)構(gòu)域過(guò)于復(fù)雜而無(wú)法分析，但O-聚糖組成可以在用PNGase F處理后進(jìn)行分離和比較。云南固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究唾液酸的去除有助于研究蛋白質(zhì)中的潛在變體。SialEXO酶可在電荷異構(gòu)體分析之前去除所有唾液酸。
我們測(cè)量了FucosEXO從一組dai表不同鍵的不同寡糖底物中釋放的巖藻糖。FucosEXO可有效釋放α1-2、α1-3和α1-4連接的巖藻糖，對(duì)α1-6連接的巖藻糖殘基沒(méi)有活Genovis的FucosEXO的底物特異性：巖藻糖以不同的鍵存在于N-和O-聚糖上。α1-2、α1-3 和 α1-4 連接的巖藻糖常見(jiàn)于 O-聚糖中，并作為 N-聚糖的天線巖藻糖基化，而 α1-6 連接的巖藻糖被發(fā)現(xiàn)是 N-聚糖he心的修飾。β1-3,4半乳糖的水解：Genovis的GalactEXO 是一種β-半乳糖苷酶混合物，可水解 N-和 O-糖基化蛋白中的 β1-3,4-連接末端半乳糖。
水解O-聚糖的酶不會(huì)從變性中獲益，這就是為什么OmniGLYZOR色譜柱只能在天然條件下使用的原因。 OmniGLYZOR 試劑盒 Microspin 以含有足夠材料的試劑盒形式提供，可使5 × 50-100 μg 或 10 × 50-100 μg 糖蛋白去糖酸化。N-和O-連接聚糖的快速高效；與LC-MS兼容；完全去除聚糖，改進(jìn)基礎(chǔ)蛋白的分析；固定形式可提高酶與底物的比率，從而實(shí)現(xiàn)快速去糖基化。 IgdE酶(FabALACTICA?)和PNGaseF酶分別購(gòu)自Genovis(馬薩諸塞州，美國(guó))。用于水解糖蛋白上N-聚糖的凍干酶。Genovis的PNGase F 凍干劑以凍干粉的形式提供，裝在 1000 或 5 x 1000 單位小瓶中，分別用于消化 1 mg 或 5 x 1 mg 糖蛋白。生物制劑的表征和質(zhì)量控制過(guò)程中確定電荷變體；
genovis分析依那西普和曲妥珠單抗游離聚糖：為了確認(rèn)依那西普和曲妥珠單抗中半乳糖損失的LC-MS數(shù)據(jù)，進(jìn)行了釋放的N-聚糖分析。標(biāo)記的N-聚糖的分離清楚地表明了依那西普和曲妥珠單抗上半乳糖的丟失，如半乳糖基化聚糖物種的信號(hào)丟失所示。該酶是一種有價(jià)值的工具，可降低樣品異質(zhì)性，用于分析攜帶α連接的 GalNAc 殘基作為未成熟截短he心 1 的復(fù)雜 O-糖蛋白。1. 高效 α-N-乙酰半乳糖胺酶 – 快速、完全去除 Tn-抗原和 α1-3-連接的 GalNAc；2. 實(shí)現(xiàn)完全糖基去除，以改善蛋白質(zhì)表征；3. 可固定在即用型離心柱中。GalactEXO微離心柱經(jīng)過(guò)格式化，可在30-60分鐘內(nèi)水解0.5mg糖蛋白中的半乳糖。山東凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶疾病機(jī)理研究
GalNAcEXO 在 pH 值 6.0 至 7.6 范圍內(nèi)具有高度活性，來(lái)源于Akkermansia muciniphila。遼寧凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
C1抑制劑的去糖基化：在O-糖基化生物制藥的生產(chǎn)過(guò)程中，由于he心GalNAc殘基的加工不完全，可能會(huì)出現(xiàn)Tn抗原。這表現(xiàn)為具有 203 Da HexNAc 單位差異的重復(fù)質(zhì)量位移。為了確認(rèn) Tn 抗原的存在，可以應(yīng)用以下工作流程，此處在重度（26 個(gè)位點(diǎn)）O-糖基化 C1 抑制劑上演示。首先，使用PNGaseF修剪糖蛋白的N-糖，使用Genovis的OglyZOR和SialEXO修剪he心1 O-糖。依那西普的磷性能測(cè)試?：依那西普是另一種具有挑戰(zhàn)性的生物制藥模型分子，攜帶 13 個(gè) O-聚糖位點(diǎn)，其中平均 9 至 10 個(gè)位點(diǎn)被占用。遼寧凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
糖蛋白性能測(cè)試：O-聚糖的巖藻糖基化參與功能上重要的聚糖表位的合成，例如血型抗原和劉易斯結(jié)構(gòu)。分析用...
【詳情】從依那西普水解β1-3和β1-4半乳糖：Genovis的GalactEXO Immobilized ...
【詳情】genvois的OpeRATOR 是一種內(nèi)切蛋白酶，可催化直接靠近 O-聚糖的天然粘蛋白型 O-糖基...
【詳情】上海倍篤生物科技有限公司（簡(jiǎn)稱“倍篤生物”），由中國(guó)科學(xué)院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士，于2018年1月共同...
【詳情】用于水解離心柱中糖蛋白上的N-聚糖的固定化酶。 Genovis的PNGase F 固定化微離心柱含有...
【詳情】GalactEXO中的酶來(lái)源于Akkermansia muciniphila，并在大腸桿菌中表達(dá)。G...
【詳情】由于蛋白質(zhì)的O-糖模式的異質(zhì)性和O-糖結(jié)構(gòu)的OpeRATOR特異性，形成了重疊的肽，從而可以獲得O...
【詳情】使用Genovis的OpeRATOR圖譜O-聚糖位點(diǎn)對(duì)依那西普進(jìn)行LC-MS分析：依那西普是一種 F...
【詳情】當(dāng)在完整狀態(tài)下進(jìn)行分析時(shí)，EPO的聚糖異質(zhì)性導(dǎo)致了非常復(fù)雜的質(zhì)譜圖。通過(guò)在 37°C 下在 Omni...
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