Genvis測試去除唾液酸以揭示電荷變體:唾液酸是帶負(fù)電荷的糖殘基,存在于 N- 和 O-連接的聚糖上。唾液酸的固有電荷可能會(huì)使分析工作流程復(fù)雜化,從而掩蓋其他重要的修飾。Microspin 色譜柱可用于 2 x 0.5 mg、5 x 0.5 mg 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. 樣品中不含酶。因此,唾液酸的去除有助于研究蛋白質(zhì)中的潛在變體。該應(yīng)用展示了一種快速簡便的樣品制備方法,可在電荷異構(gòu)體分析之前去除所有唾液酸。OmniGLYZOR Microspin 小柱中包含以下組分:PNGase?F;O-糖苷酶。浙江凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶疾病機(jī)理研究
用于水解β1-3,4-連接半乳糖的固定化酶在離心柱中的糖蛋白上。Genovis的GalactEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的GalactEXO酶,用于糖蛋白上β1-3,4-連接半乳糖的水解,而不會(huì)用酶污染z終制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. z終樣品中不含酶。GalactEXO 酶來源于 Akkermansia muciniphila 并重組表達(dá),可有效水解 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖。GalactEXO微離心柱經(jīng)過格式化,可在30-60分鐘內(nèi)水解0.5mg糖蛋白中的半乳糖。重慶用于自動(dòng)化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶GalNAcEXO 酶來源于Akkermansia muciniphila,在大腸桿菌中表達(dá),帶有His標(biāo)簽,分子量為52 kDa。
ImpaRATOR 是一種 O-聚糖依賴性蛋白酶,可催化糖蛋白和糖肽中與糖基化絲氨酸或蘇氨酸殘基相鄰的肽鍵的水解。它切割用粘蛋白型O-聚糖修飾的絲氨酸或蘇氨酸殘基的N-末端,包括唾液酸化物種。粘蛋白型O-聚糖是ImpaRAT活性所必需的,該酶不會(huì)消化未修飾的絲氨酸或蘇氨酸殘基,也不會(huì)在糖蛋白的N-糖基化位點(diǎn)。該酶接受 O-聚糖結(jié)構(gòu),包括唾液酸化he心 1 和he心 2 結(jié)構(gòu)以及 Tn 抗原。Genovis的ImpaRATOR 來源于銅綠假單胞菌,在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有 His 標(biāo)簽,分子量為 97 kDa。
為了研究 OglyZOR 對天然糖蛋白的活性,將該酶與依那西普、TNFR 和阿巴西普在 37°C 下有或沒有 SialEXO 孵育 1 小時(shí)。當(dāng)唾液酸被去除時(shí),OglyZOR酶有效地水解了所有三種底物中的O-聚糖。Genovis的OglyZOR 酶可有效水解天然糖蛋白中的he心 1 二糖 (Gal-β1,3-GalNAc)。這使得這些酶適合在LC-MS分析之前制備樣品,以鑒定其他PTM或確認(rèn)氨基酸序列O-糖基化生物制藥的全去糖基化:O-糖基化生物制藥(如依那西普)很難表征。為了能夠通過質(zhì)譜法測定完整質(zhì)量數(shù),我們進(jìn)行了酶促總?cè)ヌ腔-聚糖被Genovis的PNGase F裂解,而O-聚糖可以與OglyZOR和SialEXO一起去除。。OmniGLYZOR特點(diǎn):與LC-MS兼容;完全去除聚糖,改進(jìn)蛋白的分析;
FucosEXO中的酶在大腸桿菌中表達(dá),帶有His標(biāo)簽,分子量為87 kDa和64 kDa。FucosEXO在天然條件下水解糖蛋白上的巖藻糖,在6至8的pH值范圍內(nèi)顯示出高活性,無需輔助因子或添加劑。1. 用于方法開發(fā)的靈活格式;2. 可以結(jié)合酶以提高效率;3. 適用于自動(dòng)化工作流程;4.即用型 - 只需加水即可。Genovis的FucosEXO 是 α-巖藻糖苷酶的混合物,用于在 N-和 O-糖基化蛋白或游離寡糖上有效水解 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接的巖藻糖。人血清中 O-糖蛋白的富集:GlycOCATCH還可用于從復(fù)雜的樣品混合物(如人血清)中選擇性富集O-糖基化蛋白。簡而言之,用Genovis的SialEXO處理血清并應(yīng)用于GlycOCATCH樹脂。洗滌樹脂,用8M尿素洗脫O-糖基化蛋白。用胰蛋白酶消化樣品并使用 RP-LC-MS/MS 進(jìn)行分析,并使用 Swiss Prot 數(shù)據(jù)庫鑒定蛋白質(zhì)列表。O-糖基化蛋白以黃色表示。OmniGLYZOR 含有固定化酶的混合物,可快速有效地去除抗體;重慶用于自動(dòng)化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶
FucosEXO從一組dai表不同鍵的不同寡糖底物中釋放的巖藻糖。FucosEXO對α1-6連接的巖藻糖殘基沒有活性。浙江凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶疾病機(jī)理研究
在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域,倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程,主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品、ADC的payload抗體(如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等)、動(dòng)物造模用陽性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測產(chǎn)品、抗體結(jié)構(gòu)域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等,品牌有瑞典Genovis、德國BASF、美國QED、中國君研生物、中國金傳生物、中國毫厘科技、中國再帆生物等。這些國產(chǎn)品牌都具有國內(nèi)自研、自產(chǎn)能力,批次生產(chǎn)穩(wěn)定可靠、品質(zhì)可控,為行業(yè)發(fā)展提供更多國產(chǎn)選擇。浙江凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶疾病機(jī)理研究
糖蛋白性能測試:O-聚糖的巖藻糖基化參與功能上重要的聚糖表位的合成,例如血型抗原和劉易斯結(jié)構(gòu)。分析用...
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【詳情】我們測量了FucosEXO從一組dai表不同鍵的不同寡糖底物中釋放的巖藻糖。FucosEXO可有效釋...
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