免疫組化實(shí)驗(yàn)流程介紹: 英瀚斯生物為您整理總結(jié)免疫組化詳細(xì)步驟: 1、SP三步法 1)石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水。 2)0.3%或3%H2O2去離子水(無(wú)色液體)孵育10-30分鐘,以滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性。 3)蒸餾水沖洗,PBS浸泡5分鐘 4)候選步驟:采用抗原修復(fù):微波(建議30分鐘內(nèi)4次中火)、高壓、酶修復(fù)方法。自然冷卻,再用3分鐘×3次. 5)血清封閉:室溫15-30分鐘,盡可能與二抗來(lái)源一致。傾去,勿洗。 6)滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2~3小時(shí)或4℃過(guò)夜(比較好復(fù)溫)。PBS沖洗,3分鐘×5次。 7)滴加生物素標(biāo)記的...
目前幾種常用免疫組化方法簡(jiǎn)單介紹 1)免疫熒光方法是**早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便,所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。 英瀚斯生物,專(zhuān)業(yè)免疫組化技術(shù)方案。 2)免疫酶標(biāo)方法免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)?;驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色...
免疫組化的局限性:在病理診斷中,隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來(lái)越多的新型抗體的出現(xiàn),免疫組化在病理診斷和醫(yī)療中已有了很重要的位置,對(duì)于cancer診斷、鑒別診斷、分類(lèi)及諸多方面產(chǎn)生了重大的影響。但是免疫組化技術(shù)還存在著缺陷和不足,作為病理醫(yī)生和病理技術(shù)人員不僅要充分認(rèn)識(shí)到缺陷和不足,而且要努力避免由于缺陷和不足給診斷帶來(lái)的誤區(qū),這就要求病理醫(yī)生和病理技術(shù)人員在工作中不斷學(xué)習(xí)與研究,在實(shí)際操作中總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn),分析失敗原因,努力實(shí)現(xiàn)操作規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化,才能充分發(fā)揮免疫組化在病理診斷及鑒別診斷、臨床醫(yī)療中的指導(dǎo)作用。免疫組化可以看什么?湖南靠譜免疫組化檢測(cè) 免疫組化的優(yōu)缺點(diǎn) 免疫組化的...
免疫組化分類(lèi)中,免疫熒光方法,英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹。一開(kāi)始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便,所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用比較廣。關(guān)于免疫組化的常見(jiàn)問(wèn)題匯總。青海動(dòng)物組織免疫組化實(shí)驗(yàn)關(guān)于免疫組化,抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái),以此作為抗原或半抗原...
病理醫(yī)師日常工作中經(jīng)常說(shuō)的一句話(huà)應(yīng)該就是“做個(gè)免疫組化吧”;不管是臨床醫(yī)師,還是患者,他們問(wèn)的多的問(wèn)題則是“為什么要做免疫組化?”病理醫(yī)師通過(guò)“特殊染色”來(lái)進(jìn)行細(xì)胞的識(shí)別。這一做法的依據(jù)是特定細(xì)胞和組織中的成分不同、則化學(xué)性質(zhì)不同,通過(guò)染色的方法則可以呈現(xiàn)不同顏色。不過(guò),由于組織固定或儲(chǔ)存等,會(huì)造成相應(yīng)物質(zhì)的活性降低甚至消失,因而限制了特殊染色方法的應(yīng)用。隨著免疫學(xué)研究的進(jìn)展,根據(jù)抗原與相應(yīng)抗體間特異性結(jié)合的性質(zhì),則有了現(xiàn)在免疫組化的方法:不同細(xì)胞、不同組織中抗原有一定差異,抗體與被測(cè)組織中的特定抗原結(jié)合,進(jìn)而通過(guò)一定顯色方法將結(jié)合的抗體顯示出來(lái)。如有相應(yīng)顯色,則證實(shí)可能有被測(cè)抗原;無(wú)顯色則可...
免疫組化分類(lèi)中,免疫熒光方法,英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹。一開(kāi)始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便,所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用比較廣。做免疫組化意味什么?江西做得好的免疫組化注意事項(xiàng) 免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色? (1)縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來(lái)控制。這是重要的一條。 (2)一抗用多克隆...
免疫組化結(jié)果背景染色較深的原因有哪些? (1)抗體濃度過(guò)高:一抗?jié)舛冗^(guò)高是常見(jiàn)的原因之一。解決辦法是,每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對(duì)其工作濃度進(jìn)行測(cè)試,使每一抗體個(gè)體化,找到適合自己實(shí)驗(yàn)室的理想工作濃度,既使是即用型的抗體也應(yīng)如此,不能只簡(jiǎn)單的按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色。 (2)抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或溫度較高:解決辦法是,嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程,比較好隨身佩帶報(bào)時(shí)表或報(bào)時(shí)鐘,及時(shí)提醒,避免因遺忘而造成時(shí)間延長(zhǎng)?,F(xiàn)在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的時(shí)間不是傳統(tǒng)的1小時(shí),而是30分鐘,因此,要根據(jù)染色結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。 (3)DAB變質(zhì)和顯色時(shí)間太長(zhǎng):DAB比較好現(xiàn)用現(xiàn)配,如有沉...
免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些? 1、抗體濃度和質(zhì)量問(wèn)題以及抗體來(lái)源選擇錯(cuò)誤。不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果,抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng),必須摸索比較好濃度。 2、抗原修復(fù)不全,對(duì)于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來(lái)打開(kāi)抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復(fù)用高火4次*6min試試。有人做過(guò)實(shí)驗(yàn),這是比較好的時(shí)間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復(fù)。 3、組織切片本身這種抗原含量低。 4、血清封閉時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。 5、DAB孵育時(shí)間過(guò)短。 6、細(xì)胞通透不全,抗體未能充分進(jìn)入胞內(nèi)參與反應(yīng)。 7、開(kāi)始做免疫組化,建議一定要首先做個(gè)陽(yáng)性對(duì)照片,排除抗體等問(wèn)...
英瀚斯生物為您整理免疫組化實(shí)驗(yàn)步驟 1、石蠟切片置于65℃烘箱中烘片2h,脫蠟至水,用PBS沖洗三次,每次5min。 2、切片置于EDTA緩沖液中微波修復(fù),中火至沸后斷電,間隔10min低火至沸。 3、自然冷卻后PBS洗3次,每次5min。4、切片放入3%過(guò)氧化氫溶液,室溫下孵育10min,以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。 5、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封閉20min(封閉電荷)。 6、去除BSA液,每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織,4℃過(guò)夜。 7、PBS洗3次,每次5min。 8、去除PBS液,每張切片加50μl-100μl相應(yīng)種...
免疫組化結(jié)果背景染色較深的原因有哪些? (1)抗體濃度過(guò)高:一抗?jié)舛冗^(guò)高是常見(jiàn)的原因之一。解決辦法是,每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對(duì)其工作濃度進(jìn)行測(cè)試,使每一抗體個(gè)體化,找到適合自己實(shí)驗(yàn)室的理想工作濃度,既使是即用型的抗體也應(yīng)如此,不能只簡(jiǎn)單的按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色。 (2)抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或溫度較高:解決辦法是,嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程,比較好隨身佩帶報(bào)時(shí)表或報(bào)時(shí)鐘,及時(shí)提醒,避免因遺忘而造成時(shí)間延長(zhǎng)。現(xiàn)在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的時(shí)間不是傳統(tǒng)的1小時(shí),而是30分鐘,因此,要根據(jù)染色結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。 (3)DAB變質(zhì)和顯色時(shí)間太長(zhǎng):DAB比較好現(xiàn)用現(xiàn)配,如有沉...
免疫組化有哪幾種分類(lèi) ? 1)按標(biāo)記物質(zhì)的種類(lèi),如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過(guò)氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標(biāo)法和免疫金銀法等。 2)按染色步驟可分為直接法(又稱(chēng)一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。 英瀚斯生物病理染色效果好,效率高。 3)按結(jié)合方式可分為抗原-抗體結(jié)合,如過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶(***)法;親和連接,如卵白素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中SP法是比較常用的方法;聚合物鏈接,如即用...
免疫組化技術(shù)有哪些應(yīng)用? 定位和定性是免疫組化比較大的優(yōu)勢(shì)。相比于其他蛋白檢測(cè)方法,免疫組化具有定位較直接準(zhǔn)確、定性靈敏度高,是定位檢測(cè)分析優(yōu)先方法,尤其對(duì)于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面:惡性**的診斷與鑒別定性;確定轉(zhuǎn)移性惡性**的原發(fā)部位;對(duì)某類(lèi)**進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型;軟組織**診斷;為臨床提供治療方案的選擇;近年來(lái),隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn),使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可,其在低分化或未分化**的鑒別診斷時(shí),準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。 南京有靠譜的能...
免疫組化在什么情況下進(jìn)行組織抗原修復(fù),抗原修復(fù)的條件是什么? (1)由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過(guò)程中,發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用,從而失去抗原性。通過(guò)抗原修復(fù),使得細(xì)胞內(nèi)抗原決定族重新暴露,提高抗原檢測(cè)率。 (2)修復(fù)方法從強(qiáng)到弱一般分為三種,高壓修復(fù)、微波修復(fù)、胰酶修復(fù)。修復(fù)液也分為若干種(具體的可以查閱相關(guān)資料,大量的:中性的、高pH的等)。 (3)微波修復(fù),我們一般用6min*4次,效果不錯(cuò)。 關(guān)于免疫組化的更多問(wèn)題詳解,關(guān)注英瀚斯生物。 免疫組化結(jié)果怎么看?山東什么是免疫組化怎么選擇 免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片? (...
免疫組化在在病理診斷中,隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來(lái)越多的新型抗體的出現(xiàn),免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷、分類(lèi)、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性,因此,深入研究免疫組化原理和技術(shù),并努力實(shí)現(xiàn)規(guī)范化的操作,才能充分發(fā)揮免疫組化在病理的診斷及鑒別診斷、判斷預(yù)后、指導(dǎo)臨床醫(yī)療中的作用。 觀察組織切片中抗原的數(shù)量及其在組織中的分布情況,對(duì)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究,稱(chēng)為免疫組織化學(xué),由于抗原與抗體特異性結(jié)合,因此通過(guò)免疫組化使標(biāo)記抗體的顯色劑(酶、熒光素、同位素、金屬離子等等)顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì))。IHC所用標(biāo)本主要為兩大...
做免疫組化時(shí)如何選擇一抗? 1、單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就像導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面,即使是同一個(gè)抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來(lái)產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱(chēng)為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng)中,一般單克隆抗體特異性強(qiáng),但親和力相對(duì)小,檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強(qiáng),靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過(guò)封閉等避免)。 2、應(yīng)用范圍的選擇。有的一抗只能用于Westernblotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;甚至標(biāo)明...
免疫組化的應(yīng)用領(lǐng)域 免疫組化在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中有著廣泛的應(yīng)用。在**學(xué)中,免疫組化通常被用于**標(biāo)志物的檢測(cè),幫助確定**的類(lèi)型、分級(jí)和預(yù)后。例如,免疫組化通過(guò)檢測(cè)ER、PR和HER2的表達(dá),可以指導(dǎo)乳腺*的治療方案。在神經(jīng)科學(xué)中,免疫組化用于研究神經(jīng)元的分布和功能。在免疫學(xué)中,免疫組化可以用于檢測(cè)炎癥細(xì)胞和免疫細(xì)胞在組織中的分布和水平。此外,免疫組化實(shí)驗(yàn)技術(shù)還被廣泛應(yīng)用于發(fā)育生物學(xué)、病理學(xué)和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。 有沒(méi)有能做免疫組化的實(shí)驗(yàn)外包公司?效果好一點(diǎn)的。山東免疫組化哪家好免疫組化中免疫膠體金技術(shù),英瀚斯生物小編為您說(shuō)明介紹。免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作...
免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的抗體 免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體,應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后,從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清,是多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。 免疫組化就找英瀚斯,高效率,高質(zhì)量。 免疫組化常用的染色方法 根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標(biāo)法,親和組織化學(xué)法,后者是以一種物質(zhì)對(duì)某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測(cè)方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法常用。 做好免疫組化,你需要了...
免疫組化有哪幾種分類(lèi) ? 1)按標(biāo)記物質(zhì)的種類(lèi),如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過(guò)氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標(biāo)法和免疫金銀法等。 2)按染色步驟可分為直接法(又稱(chēng)一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。 英瀚斯生物病理染色效果好,效率高。 3)按結(jié)合方式可分為抗原-抗體結(jié)合,如過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶(***)法;親和連接,如卵白素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中SP法是比較常用的方法;聚合物鏈接,如即用...
確定來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位,臨床上免疫組化也可以進(jìn)行操作。對(duì)于來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤,用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來(lái)源,進(jìn)一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽(yáng)性,而在肺cancer、乳腺cancer、腎cancer中陰性;Tg陽(yáng)性可考慮甲狀腺轉(zhuǎn)移;波形蛋白(Vimentin)陽(yáng)性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽(yáng)性可考慮前列腺轉(zhuǎn)移;甲狀腺球蛋白陽(yáng)性可考慮甲狀腺濾泡細(xì)胞cancer;肌動(dòng)蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin)、結(jié)蛋白(Desmin)、肌紅蛋白(Myoglobin)陽(yáng)性可考慮橫紋肌肉...
免疫組化的應(yīng)用領(lǐng)域 免疫組化在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中有著廣泛的應(yīng)用。在**學(xué)中,免疫組化通常被用于**標(biāo)志物的檢測(cè),幫助確定**的類(lèi)型、分級(jí)和預(yù)后。例如,免疫組化通過(guò)檢測(cè)ER、PR和HER2的表達(dá),可以指導(dǎo)乳腺*的治療方案。在神經(jīng)科學(xué)中,免疫組化用于研究神經(jīng)元的分布和功能。在免疫學(xué)中,免疫組化可以用于檢測(cè)炎癥細(xì)胞和免疫細(xì)胞在組織中的分布和水平。此外,免疫組化實(shí)驗(yàn)技術(shù)還被廣泛應(yīng)用于發(fā)育生物學(xué)、病理學(xué)和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。 免疫組化流程是什么樣的?寧夏病理免疫組化免疫組化在臨床應(yīng)用中,還能及時(shí)準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶。英瀚斯生物專(zhuān)業(yè)做實(shí)驗(yàn)外包服務(wù),一站式醫(yī)學(xué)科研平臺(tái)。采用常規(guī)病理方法難以檢出的...
免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色? (1)縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來(lái)控制。這是重要的一條。 (2)一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。 (3)內(nèi)源性過(guò)氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細(xì)胞多的組織),需要通過(guò)延長(zhǎng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來(lái)降低背景染色; 做病理染色,就找英瀚斯,專(zhuān)業(yè)團(tuán)隊(duì)支持。 (4)非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過(guò)延長(zhǎng)二抗來(lái)源的動(dòng)物免疫血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來(lái)加強(qiáng)封閉效果; (5)縮短DAB孵育時(shí)間或降低DAB濃度/過(guò)氧化氫濃度等; (6)適當(dāng)增加PBS沖洗次數(shù)...
免疫組化的局限性。靈敏度高、精確性和特異性是一種理想的cancer標(biāo)記物必須具有的,但至今所發(fā)現(xiàn)的cancer標(biāo)記物還沒(méi)有能完全滿(mǎn)足這些標(biāo)準(zhǔn)。某些正常細(xì)胞也分泌一些cancer標(biāo)記物,因此cancer細(xì)胞學(xué)并不是單獨(dú)產(chǎn)生一種標(biāo)記物,即選用一組抗體比單一抗體更有利。在cancer診斷中評(píng)估免疫組化的局限性主要在抗體特異性和解釋方面。在免疫組化操作中都必須有適當(dāng)?shù)年?yáng)性與陰性對(duì)照,作為技術(shù)完整性質(zhì)量控制,如對(duì)照組被忽略或不理想時(shí),免疫組化染色的結(jié)果要謹(jǐn)慎對(duì)待,免疫組化的正確結(jié)果不僅要依靠技術(shù)步驟上規(guī)范化操作,而且有賴(lài)于正確的解釋?zhuān)趫?bào)告免疫組化染色結(jié)果時(shí)不應(yīng)孤立地解釋?zhuān)瑧?yīng)考慮到診斷與鑒別診斷、所應(yīng)用...
免疫組化的結(jié)果分析: 免疫組化實(shí)驗(yàn)通常需要設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照(或替代對(duì)照)(陽(yáng)性對(duì)照是排除方法和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有無(wú)問(wèn)題;陰性對(duì)照與替代對(duì)照是排除有無(wú)非特異性染色)。一般情況下,陽(yáng)性對(duì)照顏色的特點(diǎn)為:Ag定位,包漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。且染色的強(qiáng)度不同(顏色深淺不一);陰性對(duì)照的特點(diǎn)為:染色細(xì)胞與組織無(wú)區(qū)別,顏色具有彌散性,分布均勻。 英瀚斯生物可承接各類(lèi)病理染色,包括免疫組化。 說(shuō)明:免疫組化實(shí)驗(yàn)可以對(duì)結(jié)果進(jìn)行定量分析,但要實(shí)驗(yàn)得到的必須是高質(zhì)量的染色切片,要求背景染色淺且特異性染色較深,這樣分析的結(jié)果才會(huì)比較準(zhǔn)確。 免疫組化protocol,詳情請(qǐng)看英瀚斯生物官網(wǎng)...
免疫組化結(jié)果背景染色較深的原因有哪些? (1)抗體濃度過(guò)高:一抗?jié)舛冗^(guò)高是常見(jiàn)的原因之一。解決辦法是,每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對(duì)其工作濃度進(jìn)行測(cè)試,使每一抗體個(gè)體化,找到適合自己實(shí)驗(yàn)室的理想工作濃度,既使是即用型的抗體也應(yīng)如此,不能只簡(jiǎn)單的按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色。 (2)抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或溫度較高:解決辦法是,嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程,比較好隨身佩帶報(bào)時(shí)表或報(bào)時(shí)鐘,及時(shí)提醒,避免因遺忘而造成時(shí)間延長(zhǎng)?,F(xiàn)在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的時(shí)間不是傳統(tǒng)的1小時(shí),而是30分鐘,因此,要根據(jù)染色結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。 (3)DAB變質(zhì)和顯色時(shí)間太長(zhǎng):DAB比較好現(xiàn)用現(xiàn)配,如有沉...
在臨床應(yīng)用中,免疫組化還可以進(jìn)一步分類(lèi)不同qi官與組織交界處cancer。由于重疊的特征,在一些組織qi官交界處的cancer,只憑組織學(xué)基礎(chǔ)對(duì)cancer進(jìn)行分類(lèi)很困難。如胃腸道梭形細(xì)胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是間質(zhì)起源的胃腸道間質(zhì)瘤(GIST),還是神經(jīng)起源的神經(jīng)鞘瘤;同樣發(fā)生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細(xì)胞cancer,兩者較難區(qū)別,且醫(yī)療與預(yù)后明顯的不同,但用免疫組化檢測(cè)角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細(xì)胞cancer,而角蛋白陽(yáng)性則為胚胎cancer。免疫組化怎么做?步驟方法?寧夏組織免疫組化可以做什么臨床應(yīng)用中,藥物靶點(diǎn)免疫組化,英瀚斯生物專(zhuān)業(yè)做...
免疫組化的定量分析怎么做? 免疫組化的定量分析是通過(guò)圖像分析軟件對(duì)顯色結(jié)果進(jìn)行定量評(píng)估。免疫組化常用的方法有光密度分析和陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)。光密度分析是通過(guò)測(cè)量顯**域的光密度值,評(píng)估目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平。免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)是通過(guò)計(jì)數(shù)顯色陽(yáng)性的細(xì)胞數(shù)量,評(píng)估目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平。定量分析需要考慮多個(gè)因素,如顯色強(qiáng)度、背景信號(hào)和切片厚度。此外,免疫組化定量分析的結(jié)果通常只能進(jìn)行半定量分析,不能提供***的定量數(shù)據(jù)。 免疫組化相關(guān)知識(shí)匯總。湖南免疫組化是什么 免疫組化的抗體選擇 抗體是免疫組化實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素之一。選擇合適的一抗需要考慮其特異性、靈敏度和適用性。特異性是指抗體只與目標(biāo)蛋...
免疫組化分類(lèi)中免疫酶標(biāo)方法,英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)?;驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過(guò)光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前定位準(zhǔn)確、對(duì)比度好、染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存,適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速,已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法,目前在病理診斷中廣為使用的當(dāng)屬***法(過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶)、ABC法(卵白素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物)、SP法(鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶)、即用型二步法(聚合物鏈接)等。如何做好...
細(xì)胞爬片免疫組化檢測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟 1、選擇貼壁良好的細(xì)胞爬片,用4%多聚甲醛固定后15min后自然晾干。 2、PBS洗3次,每次5min。3、切片放入3%過(guò)氧化氫溶液,室溫下孵育10min,以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。 4、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封閉20min(封閉電荷)。 5、去除BSA液,每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織,4℃過(guò)夜。 6、PBS洗3次,每次5min。 英瀚斯生物,細(xì)胞、動(dòng)物、臨床樣本免疫組化檢測(cè)都可完成! 7、去除PBS液,每張切片加50μl-100μl相應(yīng)種屬的二抗,4℃孵育50min。 ...
確定來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位,臨床上免疫組化也可以進(jìn)行操作。對(duì)于來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤,用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來(lái)源,進(jìn)一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽(yáng)性,而在肺cancer、乳腺cancer、腎cancer中陰性;Tg陽(yáng)性可考慮甲狀腺轉(zhuǎn)移;波形蛋白(Vimentin)陽(yáng)性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽(yáng)性可考慮前列腺轉(zhuǎn)移;甲狀腺球蛋白陽(yáng)性可考慮甲狀腺濾泡細(xì)胞cancer;肌動(dòng)蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin)、結(jié)蛋白(Desmin)、肌紅蛋白(Myoglobin)陽(yáng)性可考慮橫紋肌肉...
免疫組化的定量分析怎么做? 免疫組化的定量分析是通過(guò)圖像分析軟件對(duì)顯色結(jié)果進(jìn)行定量評(píng)估。免疫組化常用的方法有光密度分析和陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)。光密度分析是通過(guò)測(cè)量顯**域的光密度值,評(píng)估目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平。免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)是通過(guò)計(jì)數(shù)顯色陽(yáng)性的細(xì)胞數(shù)量,評(píng)估目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平。定量分析需要考慮多個(gè)因素,如顯色強(qiáng)度、背景信號(hào)和切片厚度。此外,免疫組化定量分析的結(jié)果通常只能進(jìn)行半定量分析,不能提供***的定量數(shù)據(jù)。 如何做好免疫組化實(shí)驗(yàn)?四川細(xì)胞免疫組化怎么樣 做免疫組化時(shí)如何選擇一抗? 1、單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單...