免疫組化結(jié)果背景染色較深的原因有哪些？

 （1）抗體濃度過高：一抗?jié)舛冗^高是常見的原因之一。解決辦法是，每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對其工作濃度進(jìn)行測試，使每一抗體個體化，找到適合自己實(shí)驗(yàn)室的理想工作濃度，既使是即用型的抗體也應(yīng)如此，不能只簡單的按說明書進(jìn)行染色。

（2）抗體孵育時間過長或溫度較高：解決辦法是，嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，比較好隨身佩帶報(bào)時表或報(bào)時鐘，及時提醒，避免因遺忘而造成時間延長。現(xiàn)在流行的二步法（Polymer）敏感性很高，要求一抗孵育的時間不是傳統(tǒng)的1小時，而是30分鐘，因此，要根據(jù)染色結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。 

（3）DAB變質(zhì)和顯色時間太長：DAB比較好現(xiàn)用現(xiàn)配，如有沉渣應(yīng)進(jìn)行過濾后再用。配制好的DAB不應(yīng)存放時間太長，因?yàn)樵跊]有酶的情況下，過氧化氫也會游離出氧原子與DAB產(chǎn)生反應(yīng)而降低DAB的效力，未用完的DAB存放在冰箱里幾天后再用這種似乎節(jié)約的辦法是不可取的。DAB的顯色比較好在顯微鏡下監(jiān)控，達(dá)到理想的染色程度時立即終止反應(yīng)。但是當(dāng)染**太多時或用染色機(jī)時，這樣做似乎不現(xiàn)實(shí)，但至少應(yīng)對一些新的或少用的抗體顯色時進(jìn)行監(jiān)控，避免顯色時間過長。

英瀚斯專業(yè)實(shí)驗(yàn)檢測，各類染色、免疫組化、免疫熒光等。 病理報(bào)告中的免疫組化到底有什么作用?組織免疫組化要多少錢

免疫組化（IHC）利用抗體檢測組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的定位。

英瀚斯生物實(shí)驗(yàn)外包，自有專業(yè)病理實(shí)驗(yàn)室，可高效完成免疫組化檢測。

抗體-抗原的相互作用通過有色酶底物顯色檢測或熒光染料熒光檢測進(jìn)行觀察。雖然IHC在定量方面不如蛋白質(zhì)印跡或ELISA，但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達(dá)譜對病理學(xué)家以及作為診斷工具都具有重要意義。

IHC實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于穩(wěn)定、優(yōu)化且可重復(fù)的染色方案，而該方案應(yīng)使用高質(zhì)量的特異性試劑。 江西靠譜免疫組化實(shí)驗(yàn)免疫組化技術(shù)的原理、分類和優(yōu)點(diǎn)！

臨床應(yīng)用中，藥物靶點(diǎn)免疫組化，英瀚斯生物專業(yè)做實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)，一站式醫(yī)學(xué)科研平臺。免疫組化及分子病理學(xué)方法在疾病診斷中只只起輔助醫(yī)療的作用，而藥物病理學(xué)是用病理學(xué)的方法確定藥物醫(yī)療的靶點(diǎn)、評價藥物醫(yī)療的療效、預(yù)測藥物醫(yī)療的反應(yīng)，因此藥物靶點(diǎn)免疫組化屬“單獨(dú)的診斷”。因此對于對照的設(shè)置、質(zhì)量的控制均需要更高的要求，如對試劑的要求，不同于一般的診斷試劑，應(yīng)按對藥物管理的要求操作。HER2蛋白著色3+者可作為臨床醫(yī)生建議患者接受曲妥珠單抗等藥物醫(yī)療的依據(jù)。

免疫組化的優(yōu)缺點(diǎn)

免疫組化的優(yōu)點(diǎn)在于其高特異性和敏感性，能夠在組織原位檢測目標(biāo)蛋白的表達(dá)和分布。此外，免疫組化可以與其他技術(shù)（如熒光顯微鏡、電子顯微鏡）結(jié)合，提供更豐富的信息。然而，免疫組化也存在一些缺點(diǎn)。首先，實(shí)驗(yàn)步驟復(fù)雜，需要優(yōu)化多個參數(shù)（如一抗?jié)舛?、孵育時間）。其次，免疫組化的結(jié)果可能受到組織固定、抗原修復(fù)等因素的影響，導(dǎo)致假陽性或假陰性結(jié)果。此外，免疫組化的定量分析相對困難，通常只能進(jìn)行半定量分析。 動物、細(xì)胞的免疫組化、免疫熒光，就找英瀚斯生物！

免疫組化結(jié)果中的假陰性是指所有抗體標(biāo)記的切片均呈陰性，無陽性信號，假陰性結(jié)果不是真實(shí)的反應(yīng)。導(dǎo)致假陰性結(jié)果的原因有:(1)抗原修復(fù)方法選擇不當(dāng)，根據(jù)不同的抗原特點(diǎn)采用不同的修復(fù)方法，大多數(shù)抗體要求熱修復(fù)，熱修復(fù)又包括高壓修復(fù)、微波修復(fù)及煮沸熱修復(fù);而對某些細(xì)胞內(nèi)抗原和細(xì)胞間質(zhì)抗原需要用酶消化，如表皮生長因子(EGFR)要求胃蛋白酶(Pepsin)消化，而Vimentin則不用修復(fù);(2)一抗本身的問題:一抗效價降低或失效。在免疫組化中染色結(jié)果的假陰性會導(dǎo)致錯診或漏診，進(jìn)而影響臨床診斷及延誤醫(yī)療。解決這一問題的可通過設(shè)立陽性對照，比較兩者染色結(jié)果。若陽性對照有表達(dá)，表明試劑和染色體系及實(shí)驗(yàn)步驟均無問題;若陽性對照無表達(dá)，則檢測過程中某一試劑或某個步驟存在問題，應(yīng)逐一查找原因。常見的免疫組化方法有哪些？寧夏病理免疫組化注意事項(xiàng)

免疫組化可以看什么？組織免疫組化要多少錢

免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的抗體

免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體，應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后，從動物血中所獲得的免疫血清，是多個B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。

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免疫組化常用的染色方法

根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法，免疫酶標(biāo)法，親和組織化學(xué)法，后者是以一種物質(zhì)對某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測方法。這種方法敏感性更高，有利于微量抗原(抗體)在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位，其中生物素—抗生物素染色法常用。 組織免疫組化要多少錢