免疫組化分類中免疫酶標(biāo)方法,英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)?;驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過(guò)光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前定位準(zhǔn)確、對(duì)比度好、染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存,適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速,已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法,目前在病理診斷中廣為使用的當(dāng)屬***法(過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶)、ABC法(卵白素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物)、SP法(鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶)、即用型二步法(聚合物鏈接)等。如何做好免疫組化實(shí)驗(yàn)?安徽做得好的免疫組化哪家好
免疫組化的基本原理
免疫組化(Immunohistochemistry, IHC)是一種利用抗原-抗體特異性結(jié)合的原理,通過(guò)顯色反應(yīng)在組織切片上定位特定蛋白質(zhì)的技術(shù)。該技術(shù)結(jié)合了免疫學(xué)和組織學(xué)的優(yōu)點(diǎn),能夠在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上精確顯示目標(biāo)蛋白的分布和表達(dá)情況。免疫組化的基本原理是利用一抗與目標(biāo)蛋白結(jié)合,再通過(guò)二抗與一抗結(jié)合,通過(guò)顯色系統(tǒng)(如DAB)使目標(biāo)蛋白可視化。這種方法不僅能夠提供蛋白質(zhì)的定位信息,還能通過(guò)半定量分析評(píng)估蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。 福建什么是免疫組化注意事項(xiàng)免疫組化樣本如何處理?
什么是免疫組化?免疫組化的原理是什么?
1、定義:用標(biāo)記的特異性抗體對(duì)組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中某些化學(xué)成分的分布和含量進(jìn)行組織和細(xì)胞原位定性、定位或定量研究,這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)(immunocytochemistry)技術(shù)。
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2、原理:根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理,組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng),前者再用標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如鏈霉親和素等)結(jié)合,通過(guò)呈色反應(yīng)或熒光來(lái)顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分,在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。
免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床cancer良惡性的判斷,英瀚斯生物為您介紹。對(duì)于反應(yīng)性增生還是cancer性增生,可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測(cè)B淋巴細(xì)胞增生的單克隆或多克隆性來(lái)區(qū)別。在濾泡反應(yīng)性增生時(shí),濾泡反應(yīng)中心的細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞凋亡蛋白(bcl-2),bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中,由于90%以上cancer性濾泡細(xì)胞有bcl-2的高表達(dá),bcl-2陽(yáng)性。而增殖細(xì)胞核抗原(PCNA),周期素(Cycling),核抗原(Ki-67)通過(guò)對(duì)cancer細(xì)胞增生的程度作出評(píng)價(jià),從而提示增生細(xì)胞的良惡性。動(dòng)物、細(xì)胞的免疫組化、免疫熒光,就找英瀚斯生物!
病理醫(yī)師日常工作中經(jīng)常說(shuō)的一句話應(yīng)該就是“做個(gè)免疫組化吧”;不管是臨床醫(yī)師,還是患者,他們問(wèn)的多的問(wèn)題則是“為什么要做免疫組化?”病理醫(yī)師通過(guò)“特殊染色”來(lái)進(jìn)行細(xì)胞的識(shí)別。這一做法的依據(jù)是特定細(xì)胞和組織中的成分不同、則化學(xué)性質(zhì)不同,通過(guò)染色的方法則可以呈現(xiàn)不同顏色。不過(guò),由于組織固定或儲(chǔ)存等,會(huì)造成相應(yīng)物質(zhì)的活性降低甚至消失,因而限制了特殊染色方法的應(yīng)用。隨著免疫學(xué)研究的進(jìn)展,根據(jù)抗原與相應(yīng)抗體間特異性結(jié)合的性質(zhì),則有了現(xiàn)在免疫組化的方法:不同細(xì)胞、不同組織中抗原有一定差異,抗體與被測(cè)組織中的特定抗原結(jié)合,進(jìn)而通過(guò)一定顯色方法將結(jié)合的抗體顯示出來(lái)。如有相應(yīng)顯色,則證實(shí)可能有被測(cè)抗原;無(wú)顯色則可能無(wú)被測(cè)抗原。當(dāng)然,這一方法中需注意相應(yīng)的“例外”,如抗體的非特異性結(jié)合、非特異性顯色,則容易造成“假陽(yáng)性”;或者雖有相關(guān)抗原、但所用抗體與該抗原并未結(jié)合等,則容易造成“假陰性”。隨著免疫組化的應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)的增加,這些問(wèn)題在常規(guī)應(yīng)用中盡量得以避免,前者如各種顯色方法的優(yōu)化;后者如抗原修復(fù)方法的優(yōu)化、新型抗體開(kāi)發(fā)及選擇。免疫組化protocol,詳情請(qǐng)看英瀚斯生物官網(wǎng)。福建什么是免疫組化注意事項(xiàng)
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免疫組化分類中,免疫熒光方法,英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹。一開(kāi)始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便,所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用比較廣。安徽做得好的免疫組化哪家好