HE染色注意事項:1.組織切片的脫蠟步驟應徹底,否則無論進行那種染色都會發(fā)生困難。脫蠟時間要充分,若溶蠟劑使用過久應及時更換以免效率降低,若室溫過低,可將溶蠟劑置于溫箱中進行脫蠟。 2.蘇木素染液使用一段時間后表面易出現亮晶狀飄浮物,這可能是液體表面的過氧化物,必須過濾除去,以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后,著色力會減弱,著色不鮮艷,呈灰藍色時應及時更換新液。 3.染色的時間長短需依據:染劑對組織的染色作用,室溫條件,切片厚薄,固定液的類別,染液的新舊而進行調節(jié)。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。 4.分化十分重要。分化步驟的準確也是染色成敗的關鍵,若分化失當則必然引起染色不勻或過淡,過深等現象,因此分化后一定要鏡檢,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,不然一旦復染后,組織會呈紫藍色即“藍蓋紅”現象。 5.還原液不宜過濃,若堿性太強易使組織脫落故以淡為宜。 6.伊紅宜淡染,復染過深胞核會不清晰,影響鏡檢。 冰凍組織切片的HE染色。新疆HE染色哪家好
HE染色構成組織內蛋白質的氨基酸的種類很多,它們有不同的等電點。在普通染色法中,染色液的酸堿度為pH6左右,細胞內的酸性物質如細胞核的染色質、腺細胞和神經細胞內的粗面內質網及透明軟骨基質等均被堿性染料染色,這些物質稱為嗜堿性。而細胞質中的其它蛋白質如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質稱為嗜酸型。如果改變染色液的酸堿度,pH值升高時,則原來被酸性染料染色的物質可變?yōu)槭葔A性;pH值降低時,原來被堿性染料染色的物質則可變?yōu)槭人嵝?。所以說染色液的pH值可以影響染色的反應。湖北專業(yè)的HE染色多少錢HE染色,優(yōu)先南京英瀚斯生物。
HE染色就是用蘇木精和伊紅對細胞內的核糖體和細胞質染色的方法。H:Hematoxylin,蘇木精E:Eosin,伊紅蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,可將細胞核和細胞內核糖體染成藍紫色,被堿染料染色的結構具有嗜堿。伊紅(,E)是一種酸染料,能將細胞質染成紅色或淡紅色,被酸染料染色的結構具有嗜酸。染色前,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,再經由高濃度到低濃度酒精,***入蒸餾水,就可染色。 很多細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當其衰老時或發(fā)生退行變則呈現嗜伊紅濃染。 膠原纖維在老化和出現透明變時,伊紅著色由淺變深。
HE染色常見問題:Q3:細胞核染色過淺,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,或蘇木素過度氧化失效,或分化時間太長。對策:重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液,每個3-5min即可,接著重新染色??梢赃m當地組織的嗜堿性以增強核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來水沖洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,自來水沖洗10min染色。Q4:細胞核染色過深,胞漿著藍色答:切片在蘇木素染液中停留過長;或切片太厚;或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細胞核),要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。HE染色規(guī)范化流程及注意事項?
HE染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,經過固定后,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進行常規(guī)切片。如果脫鈣不全,則切片容易撕開或碎裂,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程,稱為脫鈣。骨組織固定24小時后,鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,進行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間,但長時間浸于強酸會影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水、浸蠟、切片進行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。HE染色試驗技術及注意事項。湖北專業(yè)的HE染色多少錢
HE染色,一站式實驗外包服務平臺。新疆HE染色哪家好
HE染色細胞核灰藍原因:(1)組織處理溫度過高、過熱,在石蠟停留的時間過長;(2)固定時間太短,接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對策:理論上來說,加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用,組織不能在熱的蠟液中停留過長時間。如果由于某些原因不能進行下步包埋處理,完成浸蠟處理后的組織,可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中,冷卻凝固,以備包埋。待需要包埋時再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好,脫水比較好能從低濃度的乙醇開始。新疆HE染色哪家好