關于免疫組化的封閉：用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min，然后甩去封閉用血清，勿洗；注意：封閉時間根據具體實驗調整；封閉液一般選用5%BSA或與二抗來源一致的血清，切記是BSA，不是PBS.很多論壇寫的是PBS,太坑了。①使用血清好還是BSA好？答：***是待檢樣本會非特異性的和蛋白結合，從而導致背景過高，因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結合，從這點看，BSA和血清沒有明顯區(qū)別。第二是待檢樣本中可能會有Fc受體，可以和抗體恒定區(qū)結合，與抗體特異性無關，封閉血清中有抗體，因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結合。BSA則無法封閉Fc受體。免疫組化怎么做？步驟方法？甘肅靠譜免疫組化實驗

免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色？ 

（1）縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條。

（2）一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。

（3）內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色； 

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（4）非特異性組分與抗體結合，這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果； 

（5）縮短DAB孵育時間或降低DAB濃度/過氧化氫濃度等； 

（6）適當增加PBS沖洗次數(shù)和浸洗時間，在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要； 

（7）防止標本染色過程中出現(xiàn)干片，這容易增強非特異性著色。 甘肅靠譜免疫組化實驗免疫組化失敗的原因？

醫(yī)療和預后有關的免疫組化。與醫(yī)療及預后有關的標記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等，卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散、分化、術后殘存cancer灶呈正相關;乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高，PTEN基因表達減弱，提示cancer預后不良。(2)細胞增殖性標記物:cancer細胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預后，如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對cancer細胞的增生做出評價，表達指數(shù)越高，表明其增殖指數(shù)越活躍，惡性度增高，預后不良，其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67、EGFR陽性者，淋巴結轉移率高，并與ji素受體的表達呈負相關。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等，應用更為范圍廣的的是子宮內膜cancer及乳腺cancer，如對乳腺cancer中ER、PR的檢測，有助于決定臨床醫(yī)療中是否需要加入內分泌ji素阻斷醫(yī)療，并能判斷預后，ER及PR陽性表達、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達病例對三苯氧胺等ji素醫(yī)療反應良好，而ERPR、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大。

細胞屬性的判定，免疫組化也可以進行這方面的臨床應用。通過特定抗體標記出細胞內相應的抗原成分，來判定細胞的屬性，確定cancer的來源。如細胞角蛋白(CK)是上皮性標記，CK陽性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標記;甲狀腺球蛋白(Tg)陽性提示是甲狀腺濾泡性cancer;前列腺特異性抗原(PSA)只見于前列腺上皮;膠質纖維酸性蛋白(GFAP)陽性則提示膠質cancer;CD20和CD79a陽性則提示B細胞淋巴瘤;平滑肌肌動蛋白(Actin)陽性提示cancer為平滑肌源性;胃腸道間質瘤中原cancer基因蛋白產物CD117陽性;血管源性cancer中內皮細胞標記物CD34陽性等等。如果您需要做實驗外包，可以與我們英瀚斯生物進行聯(lián)系。免疫組化protocol，詳情請看英瀚斯生物官網。

免疫組化的質量控制免疫組化的質量控制是確保實驗結果可靠性和重復性的關鍵步驟。質量控制包括實驗前的抗體驗證、實驗中的陽性對照和陰性對照，以及實驗后的結果評估?？贵w驗證是通過Western blot或免疫熒光等方法驗證抗體的特異性和靈敏度。陽性對照是使用已知表達目標蛋白的組織或細胞，確保實驗系統(tǒng)的有效性。陰性對照是使用不表達目標蛋白的組織或細胞，排除非特異性結合。結果評估是通過圖像分析軟件對顯色結果進行定量評估，確保實驗結果的可靠性。免疫組化公司哪家好？河南大鼠免疫組化

免疫組化檢測經驗總結！甘肅靠譜免疫組化實驗

免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。英瀚斯生物為您說明。除了生物學來源，IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化，要么通過固定過程，要么是單獨的透化步驟，這樣抗體才能與細胞內的靶點相結合。而IHC可能不要單獨的透化步驟，這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進一步處理，才能進行抗體染色。一旦處理好樣品，IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了。當然，就染色而言，根據所使用的抗體來優(yōu)化還是少不了的。甘肅靠譜免疫組化實驗