外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,即可將外泌體吸附并分離出來(lái)。磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實(shí)驗(yàn),難以***普及。外泌體是大多數(shù)細(xì)胞分泌的40 - 150nm的膜泡,存在于細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、血清、唾液、尿液、羊水和惡性腹水等生物液體中。外泌體檢測(cè)可找英瀚斯生物,測(cè)序、電鏡、粒徑分析都可做。南京英瀚斯,專(zhuān)業(yè)的外泌體提取、鑒定服務(wù)。廣西靠譜的外泌體
外泌體在免疫系統(tǒng)中的作用復(fù)雜且多樣,不同來(lái)源的外泌體可能具有截然不同的免疫調(diào)控效應(yīng)。例如,樹(shù)突狀細(xì)胞分泌的外泌體可以呈遞抗原并***T細(xì)胞,具有促進(jìn)免疫反應(yīng)的作用;而**來(lái)源的外泌體則可能通過(guò)表達(dá)PD-L1等分子抑制T細(xì)胞活性,從而實(shí)現(xiàn)免疫逃逸。此外,干細(xì)胞來(lái)源的外泌體(如間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體)也常被發(fā)現(xiàn)具有***、免疫抑制特性,廣泛應(yīng)用于自身免疫病、***移植等領(lǐng)域的研究。這些現(xiàn)象提示我們,在考慮外泌體應(yīng)用時(shí),必須關(guān)注其來(lái)源細(xì)胞類(lèi)型及所處的生理狀態(tài),才能準(zhǔn)確預(yù)測(cè)其免疫調(diào)節(jié)方向。西藏外泌體實(shí)驗(yàn)外泌體研究整體解決方案_英瀚斯生物。
外泌體是所有細(xì)胞產(chǎn)生的胞外小泡,攜帶核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和代謝物。它們是健康和疾病中細(xì)胞間近距離通訊的介質(zhì),影響細(xì)胞生物學(xué)的各個(gè)方面。外泌體的生物發(fā)生 細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)陷,將一些細(xì)胞外成分和細(xì)胞膜蛋白包裹在一起,形成早期內(nèi)涵體(ESEs),這些ESEs可以與其他細(xì)胞器發(fā)生物質(zhì)交換,或者不同ESEs之間融合形成晚期內(nèi)涵體(LSEs),進(jìn)一步形成細(xì)胞內(nèi)多膜體(MVBs),其中會(huì)包含許多腔內(nèi)囊泡(ILVs),這些ILVs將來(lái)就可能會(huì)被釋放成為外泌體。
外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。1983年,外泌體***于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究。外泌體被視為特異性分泌的膜泡,參與細(xì)胞間通訊,對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開(kāi)發(fā)。外泌體存在于人類(lèi)或動(dòng)物的各種體液中。
外泌體參與了機(jī)體不同的生理和病理過(guò)程,并對(duì)細(xì)胞活動(dòng)發(fā)揮重要的調(diào)控作用,如免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、**侵襲等。且外泌體具有細(xì)胞類(lèi)型特異性,即不同細(xì)胞分泌的外泌體的組成成分和功能不同,這使得外泌體具有成為多種疾病早期診斷標(biāo)志物的潛力。此外,外泌體在作為基因和藥物運(yùn)載、**和**生物學(xué)等方面也已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。外泌體存在于人類(lèi)或動(dòng)物的各種體液中,如細(xì)胞培養(yǎng)上清、血液、尿液等,我們可以選擇不同的樣本來(lái)源進(jìn)行相關(guān)的外泌體研究。不同的實(shí)驗(yàn)樣本采集時(shí)需要注意的地方不一樣,如細(xì)胞培養(yǎng)上清在收集樣本前需換成無(wú)外泌體血清或者無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng),以降低背景值的干擾。不容錯(cuò)過(guò)的外泌體(Exosome)研究方法,南京英瀚斯生物。上海哪家做外泌體電鏡
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外泌體的提取方法有多種:包括傳統(tǒng)的差速離心、密度梯度離心,以及后來(lái)發(fā)展的超濾法、聚合物沉淀法、免疫分離、隔離篩選法、體積排阻色譜法等。這些方法各有利弊。外泌體經(jīng)細(xì)胞分泌后存在于體液或者血液中,故檢測(cè)外泌體的樣本一般為血液(全血、血漿)、體液(尿液、唾液、腦脊液、羊水、唾液等)、細(xì)胞上清液。提取所需要樣本量血清:樣本量>5ml(全血10ml)。血漿:樣本量>5ml(全血10ml)。體液:樣本量>20ml。細(xì)胞培養(yǎng)上清液:樣本量>20ml。廣西靠譜的外泌體