外泌體參與了機(jī)體不同的生理和病理過程,并對(duì)細(xì)胞活動(dòng)發(fā)揮重要的調(diào)控作用,如免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、**侵襲等。且外泌體具有細(xì)胞類型特異性,即不同細(xì)胞分泌的外泌體的組成成分和功能不同,這使得外泌體具有成為多種疾病早期診斷標(biāo)志物的潛力。此外,外泌體在作為基因和藥物運(yùn)載、**和**生物學(xué)等方面也已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。外泌體存在于人類或動(dòng)物的各種體液中,如細(xì)胞培養(yǎng)上清、血液、尿液等,我們可以選擇不同的樣本來源進(jìn)行相關(guān)的外泌體研究。不同的實(shí)驗(yàn)樣本采集時(shí)需要注意的地方不一樣,如細(xì)胞培養(yǎng)上清在收集樣本前需換成無外泌體血清或者無血清培養(yǎng)基培養(yǎng),以降低背景值的干擾。外泌體檢測(cè)服務(wù),選擇一家專業(yè)放心的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。河北專門做外泌體實(shí)驗(yàn)
干細(xì)胞外泌體在再生醫(yī)學(xué)中展現(xiàn)出***優(yōu)勢(shì),逐漸成為細(xì)胞***之外的一種替代策略。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)因其免疫原性低、生物活性強(qiáng)而廣泛應(yīng)用于組織修復(fù),而研究發(fā)現(xiàn)其外泌體也具備類似的修復(fù)功能。例如,MSC外泌體可促進(jìn)血管生成、抑制凋亡、調(diào)節(jié)炎癥,并已在心肌梗死、肝損傷、腎衰等動(dòng)物模型中展現(xiàn)良好療效。與干細(xì)胞相比,外泌體的儲(chǔ)存運(yùn)輸更為便捷,也不存在潛在的**形成風(fēng)險(xiǎn),是較為安全的“細(xì)胞外***”方案。目前已有多個(gè)針對(duì)干細(xì)胞外泌體的臨床試驗(yàn)在進(jìn)行,未來有望實(shí)現(xiàn)從細(xì)胞***向“細(xì)胞外***”技術(shù)的過渡。天津比較好的外泌體檢測(cè)如果選擇一家靠譜的外泌體檢測(cè)服務(wù)公司。
外泌分離后可以做蛋白,也可以做RNA(microRNA和LncRNA),36%的研究人員通過Westernblot或其他方法來鑒定蛋白,29%的人員利用qPCR對(duì)microRNA表達(dá)譜進(jìn)行分析,9%利用芯片進(jìn)行microRNA表達(dá)譜分析。同時(shí),新一代測(cè)序的用戶也不少,13%的人員利用NGS開展microRNA/小RNA研究,9% 開展mRNA研究。此外,目前的大部分工作還是停留在科研階段,后續(xù)的生物標(biāo)志物開發(fā)和驗(yàn)證不多,而診斷和療法的開發(fā)就更少。Razvi認(rèn)為,exosome的定性和定量研究是個(gè)快速發(fā)展的市場(chǎng)。同時(shí),循環(huán)生物標(biāo)志物的市場(chǎng)也存在著機(jī)遇和挑戰(zhàn)。不過,無創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)技術(shù)的成功讓人們相信,循環(huán)生物標(biāo)志物有望在**及其他疾病的診斷上發(fā)揮作用。
外泌體鑒定分為三個(gè)層面:透射電鏡(transmission electron microscope,TEM)、Nanosight粒徑、蛋白標(biāo)志物。透射電鏡分辨率為0.1~0.2nm,適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,可觀測(cè)樣本中是否存在外泌體樣結(jié)構(gòu)(通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形),同時(shí)可測(cè)量外泌體大小。外泌體表面存在特異性標(biāo)志物分子,如CD9、CD81、CD63等。以琳生物可以提供Western blot和流式細(xì)胞術(shù)的鑒定結(jié)果。外泌體(Exosome)參與細(xì)胞之間的交流,物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過程的維持、還與許多疾病息息相關(guān)。國(guó)自然研究熱點(diǎn)—外泌體研究-南京英瀚斯。
外泌體的分離與鑒定技術(shù)是研究和應(yīng)用的關(guān)鍵步驟,目前常用方法包括超速離心、密度梯度離心、免疫親和捕獲、聚合物沉淀等。其中超速離心法是**經(jīng)典也是使用**廣的方法,能夠較好地富集外泌體,但操作復(fù)雜、時(shí)間長(zhǎng),且容易混雜微囊泡或細(xì)胞碎片。近年來,基于商業(yè)試劑盒的聚合物沉淀法由于操作便捷、效率較高,也***用于臨床樣本的初篩研究。而為了提高純度和特異性,免疫磁珠捕獲法結(jié)合外泌體特異性表面蛋白(如CD63、CD81等)逐漸成為高通量檢測(cè)的重要手段。外泌體的鑒定通常需要借助透射電鏡(TEM)、納米顆粒跟蹤分析(NTA)和Westernblot等方法綜合判斷。外泌體(Exosomes)鑒定+外泌體示蹤方法 南京英瀚斯生物。甘肅哪家做外泌體檢測(cè)
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外泌體鑒定透射電鏡觀察能夠確認(rèn)外泌體的形態(tài)學(xué)特征,但無法體現(xiàn)樣本中所有外泌體顆粒的粒徑分布情況及整體濃度;流式細(xì)胞儀可測(cè)定的粒徑大小為150nm以上,并不適合檢測(cè)游離的外泌體顆粒。英瀚斯生物采用基于馬爾文Nanosight平臺(tái)的納米顆粒追蹤分析 (Nanoparticle Tracking Analysis, NTA) 技術(shù),快速、精細(xì)地分析外泌體粒徑分布濃度,為外泌體存在提供有力證據(jù)。目前外泌體的提取方法主要可歸納為以下六種:一是超速離心法;二是過濾離心;三是密度梯度離心法;四是免疫磁珠法;五是PS親和法;六是色譜法。河北專門做外泌體實(shí)驗(yàn)