免疫組化的發(fā)展路程?在臨床病理診斷中,免疫組織化學(xué)(IHC)是一種很重要的技術(shù)和手段,從20世紀(jì)70年代開(kāi)始,免疫組化技術(shù)就應(yīng)用于病理診斷,對(duì)于診斷cancer、cancer分類(lèi)、判斷預(yù)后產(chǎn)生了巨大的影響,同時(shí)也擴(kuò)展了人們對(duì)于各種疾病及cancer形成過(guò)程的認(rèn)識(shí),提高了病理診斷與研究水平。但是,隨著免疫組化的廣泛應(yīng)用,發(fā)現(xiàn)免疫組化技術(shù)存在一些局限性。深入研究免疫組化原理和技術(shù),必須熟悉各種抗體真陽(yáng)性反應(yīng)部位,實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室間免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化,使免疫組化在病理診斷中發(fā)揮比較大的輔助作用。如果您有免疫組化相關(guān)的實(shí)驗(yàn),可以與我們英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系。免疫組化的樣本保存要求是什么?浙江組織免疫組化推薦
免疫組化(IHC)利用抗體檢測(cè)組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的定位。
英瀚斯生物實(shí)驗(yàn)外包,自有專(zhuān)業(yè)病理實(shí)驗(yàn)室,可高效完成免疫組化檢測(cè)。
抗體-抗原的相互作用通過(guò)有色酶底物顯色檢測(cè)或熒光染料熒光檢測(cè)進(jìn)行觀(guān)察。雖然IHC在定量方面不如蛋白質(zhì)印跡或ELISA,但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達(dá)譜對(duì)病理學(xué)家以及作為診斷工具都具有重要意義。
IHC實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于穩(wěn)定、優(yōu)化且可重復(fù)的染色方案,而該方案應(yīng)使用高質(zhì)量的特異性試劑。 浙江組織免疫組化推薦英瀚斯生物,可做免疫組化定量分析。
確定cancer分期,免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床可以進(jìn)行處理哦,英瀚斯生物為您處理。cancer分期是判斷預(yù)后的一個(gè)指標(biāo),與是否浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴管或血管侵襲密切相關(guān),而通過(guò)免疫組化方法可以判斷cancer是否浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴管或血管侵襲。層黏連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可以清楚的顯示基膜的主要成分,用于區(qū)分原位*和浸潤(rùn)*,一旦上皮性*突破基膜為浸潤(rùn),未突破基膜為原位;顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物第八因子相關(guān)蛋白、D2-40等則可清楚顯示cancer對(duì)血管或淋巴管的浸潤(rùn)。因此對(duì)許多cancer的良惡性鑒別及有無(wú)血管或淋巴管浸潤(rùn),免疫組化結(jié)果作為主要的鑒別依據(jù)。
免疫組化的顯色系統(tǒng)
免疫組化的顯色系統(tǒng)是將抗原-抗體反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可見(jiàn)信號(hào)的關(guān)鍵步驟。常用的免疫組化顯色系統(tǒng)有DAB(3,3'-二氨基聯(lián)苯胺)和AEC(3-氨基-9-乙基咔唑)。DAB顯色產(chǎn)生棕色沉淀,適用于光學(xué)顯微鏡觀(guān)察。AEC顯色產(chǎn)生紅色沉淀,適用于光學(xué)顯微鏡觀(guān)察,但不適合長(zhǎng)期保存。此外,還有熒光顯色系統(tǒng),如FITC(異硫氰酸熒光素)和TRITC(四甲基羅丹明異硫氰酸酯),適用于熒光顯微鏡觀(guān)察。選擇合適的顯色系統(tǒng)需要考慮實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜋z測(cè)設(shè)備。 免疫組化IHC詳細(xì)介紹!
免疫組化有哪幾種分類(lèi) ?
1)按標(biāo)記物質(zhì)的種類(lèi),如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過(guò)氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標(biāo)法和免疫金銀法等。
2)按染色步驟可分為直接法(又稱(chēng)一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。
英瀚斯生物病理染色效果好,效率高。
3)按結(jié)合方式可分為抗原-抗體結(jié)合,如過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶(***)法;親和連接,如卵白素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中SP法是比較常用的方法;聚合物鏈接,如即用型二步法,此方法尤其適合于內(nèi)源性生物素含量高的組織抗原檢測(cè)。 免疫組化的那些小知識(shí),都在這里!安徽免疫組化注意事項(xiàng)
病理免疫組化多少錢(qián)?浙江組織免疫組化推薦
免疫組化實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)總結(jié):
?本實(shí)驗(yàn)室所用切片一般是石蠟切片。
?烘片:使蠟片水分蒸發(fā),石蠟軟化,組織切片牢固貼在玻片上;烘片至跟烘片前透明度有差異。
?抗原修復(fù)時(shí),使片子始終浸沒(méi)在修復(fù)液中,液體不能干。
?一抗孵育在37度培養(yǎng)箱,濕盒放置1h,省時(shí)間和結(jié)合效果好,不要超過(guò)1h,容易過(guò)染。
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?二抗使用:兩個(gè)二抗放大信號(hào)或一個(gè)二抗;若抗體信號(hào)強(qiáng),可不用放大信號(hào),盡量增大信噪比。
?10XDAB在常溫溶解,盡可能現(xiàn)用現(xiàn)配,放于4度儲(chǔ)存時(shí)間久了效果不佳。
?復(fù)水和脫水時(shí)所用的梯度酒精不可混用,要區(qū)分開(kāi)。
?加抗體和顯色液時(shí),都要將片子甩干,在半干半濕的狀態(tài)下再加,不然容易造成溶液的二次稀釋。
?整個(gè)操作過(guò)程中在顯色之前,一定不能干片。 浙江組織免疫組化推薦