膜片鉗技術基本原理與特點：高阻封接技術還很大降低了電流記錄的背景噪聲，從而戲劇性地提高了時間、空間及電流分辨率，如時間分辨率可達10 μs、空間分辨率可達1平方微米及電流分辨率可達10-12 A。影響電流記錄分辨率的背景噪聲除了來自于膜片鉗放大器本身外，比較主要還是信號源的熱噪聲。一般只有一個或幾個通道，經(jīng)這一個或幾個通道流出的離子數(shù)量相對于整個細胞來講很少，可以忽略，也就是說電極下的離子電流對整個細胞的靜息電位的影響可以忽略，那么，只要保持電極內電位不變，則電極下的一小片細胞膜兩側的電位差就不變，從而實現(xiàn)電位固定。膜片鉗技術的應用范圍：與藥物作用有關的心肌離子通道研究。杭州醫(yī)學離子通道應用

在進行細胞吸附式膜片鉗記錄時，一般來說，我們通過電壓鉗（voltageclamp,VC）模式將細胞膜電位維持在-60mV（大多數(shù)脊椎動物神經(jīng)元的靜息膜電位），從而保證通過電極尖銳端的電流即為跨膜離子流。一般來說，細胞吸附式膜片鉗可以作為對照來驗證其他單通道記錄構型下通道活動的改變情況，也可以用來檢測化學物質引起的通道的和活動/對通道活動的影響是否經(jīng)過胞內信使的介導。這里有一點需要注意，每個待研究細胞的Em都會有輕微的差異，因此我們在分析cell-attached的數(shù)據(jù)的時候，需要拿出事先記錄好的Em，一般有三種方法:用胞內記錄或全細胞記錄的方法，獲得一個平均Em；在實驗結束時，patch破裂，在電流為0的情況下記錄到的電勢就為Em;結合離子通道的其他數(shù)據(jù)來反向推算Em。南京神經(jīng)生物學膜片鉗電生理技術原理使用膜片鉗全細胞記錄技術觀察拮抗劑對煙堿受體激動劑量效曲線的影響，來確定其作用的動力學特征。

膜片鉗使用的注意事項：1.為了防止塵埃、靜電傷害機器，每天做實驗前請用清水拖地。2.拉制儀使用前需預熱15-30min。3.銀絲電極及地線發(fā)白時，請先用砂紙輕微打磨，再浸入新鮮的次氯酸鈉溶液鍍氯化銀，如果銀絲電極30min未變黑，則考慮更換次氯酸鈉。4.先開放大器，后開軟件；先關軟件，后關放大器。5.非必須用到汞燈時請不要打開汞燈電源，打開后至少需1個小時才可關閉。6.在放大器打開時不能用手、金屬物品或其它導電的物品接觸電極絲（包括地線），在取放細胞片時請關閉放大器。膜片鉗技術用特制的玻璃微吸管吸附于細胞表面，使之形成10~100MΩ的高阻封接，被孤立的小膜片面積為微米數(shù)量級，因此封接范圍內細胞膜光有少數(shù)離子通道。膜片鉗使用的注意事項：為了防止塵埃、靜電傷害機器，每天做實驗前請用清水拖地。

膜片鉗使用的基本方法是，把經(jīng)過加熱拋光的玻璃微電極在液壓推進器的操縱下，與清潔處理過的細胞膜形成高阻抗封接，導致電極內膜片與電極外的膜在電學上和化學上隔離起來，由于電性能隔離與微電極的相對低電阻（1～5MΩ），只要對微電極施以電壓就能對膜片進行鉗制，從微電極引出的微小離子電流通過高分辨、低噪聲、高保真的電流-電壓轉換放大器輸送至電子計算機進行分析處理。膜片鉗技術實現(xiàn)的關鍵是建立高阻抗封接，并能通過特定的記錄儀器反映這些變化，因而，膜片鉗實驗室除了一般電生理實驗所需的儀器外，還特需防震工作臺、屏蔽罩、膜片鉗放大器、三維液壓操縱器、倒置顯微鏡、數(shù)據(jù)采集卡、數(shù)據(jù)記錄和分析系統(tǒng)等。膜片鉗的應用：在通道電流記錄中，可分別于不同時間、不同部位施加各種濃度的藥物來研究。

全自動膜片鉗的優(yōu)勢：自動化：抓取細胞、形成封接、破膜等整個實驗操作全部自動化，極大的節(jié)約實驗人員的時間精力。簡約化：傳統(tǒng)膜片鉗所需要的顯微鏡、顯微操作系統(tǒng)、微電極拉制儀，防震臺、屏蔽網(wǎng)等全都不需要。效率高：是傳統(tǒng)膜片鉗實驗效率的5-10倍?？煽啃裕簩嶒灲Y果輕松復制。經(jīng)濟實惠：藥物消耗低，每次實驗記錄較低只需5μl內外液體。零技術門檻：無需膜片鉗操作經(jīng)驗，輕松上手。高芯片封接：封接電阻可達1GΩ。確保實驗可靠性。兼容性強：可與市場上大多數(shù)放大器兼容。應用范圍廣：除擁有傳統(tǒng)膜片鉗功能外，還可以對手動膜片鉗無法涉及的亞細胞結構進行記錄。擴展功能多：配套擴展設備豐富，如內灌流系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、脂質體制備器等。膜片鉗技術的應用范圍：對單細胞形態(tài)與功能關系的研究。杭州醫(yī)學離子通道應用

膜片鉗和電壓鉗的區(qū)別：電位固定的細胞膜面積不同，進而所研究的離子通道數(shù)目不同。杭州醫(yī)學離子通道應用

膜片鉗電生理技術：神經(jīng)元細胞膜上有離子通道，它們控制電荷流入和流出細胞，從而調節(jié)神經(jīng)元激發(fā)。一種用于研究這些通道的生物物理學特性的極為有用的技術被稱為膜片鉗記錄。在這種方法中，神經(jīng)科學家把拋光的玻璃微吸管置于細胞上通過吸力形成高電阻封接。這個過程分隔了一小"片"包含一種或多種離子通道的膜。通過微吸管中的電極，研究人員可以"鉗制"或控制膜的電屬性，這對分析通道活動很重要。該電極還能記錄跨膜電壓的變化，或離子通過膜的流動。杭州醫(yī)學離子通道應用

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