成為形態(tài)學、分子細胞生物學、神經(jīng)科學、*理學、遺傳學等領(lǐng)域中新一代強有力的研究工具[3]，極大地豐富了人們對細胞生命現(xiàn)象的認識。激光掃描共聚焦顯微鏡激光共聚焦顯微鏡結(jié)構(gòu)編輯激光共聚焦掃描顯微鏡（Confocallaserscanningmicroscope，CLSM）用激光作掃描光源，逐點、逐行、逐面快速掃描成像，掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡，物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點，也是瞬時成像的物點。系統(tǒng)經(jīng)一次調(diào)焦，掃描限制在樣品的一個平面內(nèi)。調(diào)焦深度不一樣時，就可以獲得樣品不同深度層次的圖像，這些圖像信息都儲于計算機內(nèi)，通過計算機分析和模擬，就能顯示細胞樣品的立體結(jié)構(gòu)。在結(jié)構(gòu)[4]配置上，激光掃描共聚焦顯微鏡除了包括普通光學顯微鏡的基本構(gòu)造外，還包括激光光源、掃描裝置、檢測器、計算機系統(tǒng)(包括數(shù)據(jù)采集、處理、轉(zhuǎn)換、應用軟件)、圖像輸出設(shè)備、光學裝置和共聚焦系統(tǒng)等部分[2]。由于該儀器具有高分辨率、高靈敏度、“光學切片”（Opticalsectioning）、三維重建、動態(tài)分析等***，因而為基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床醫(yī)學的研究提供了有效手段。此外，CLSM對熒光樣品的觀察具有明顯的優(yōu)勢。只要能用熒光探針進行標記的樣品就可用其觀察。超景深數(shù)字顯微鏡的外觀設(shè)計精致而專業(yè)，體現(xiàn)了其高科技含量。本地超景深顯微鏡哪家好

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    K**ser等借助激光在CaF2Eu2+晶體中***觀察到了雙光子激發(fā)現(xiàn)象。1990年，WinfriedDenk利用雙光子激發(fā)改造激光超景深顯微鏡，發(fā)明了雙光子顯微鏡。???什么是雙光子激發(fā)？這要從產(chǎn)生熒光的機理講起。在普通狀態(tài)下，基態(tài)熒光分子吸收一個激發(fā)光的光子后，其電子被激發(fā)到一個能量較高但不穩(wěn)定的激發(fā)態(tài)。激發(fā)態(tài)電子隨即回到基態(tài)，同時將多余的能量以發(fā)射光子的方式放出，這就是單光子激發(fā)。由于整個過程中存在非輻射的能量損失，發(fā)射出的光子能量總是要小于激發(fā)光子，也就是發(fā)射光的波長大于激發(fā)光。而在雙光子激發(fā)的情況下，熒光分子可以連續(xù)吸收兩個波長為原來兩倍的激發(fā)光子來產(chǎn)生與單光子激發(fā)同樣的效果。例如在單光子激發(fā)中，NADH酶分子吸收一個350nm光子，發(fā)射出一個450nm光子；而在發(fā)生雙光子激發(fā)時，吸收兩個700nm光子，也可以發(fā)射出一個450nm光子。同理，也可有三光子激發(fā)乃至多光子激發(fā)，但更難發(fā)生。???雙光子激發(fā)的條件非?？量?。熒光分子在吸收了***個激發(fā)光子后，等待吸收第二個光子的中間態(tài)只能維持10-17s（），這要求激發(fā)光束中相鄰兩個光子的間隔必須小到10-18s（1as）才能確保發(fā)生雙光子激發(fā)，換算成激發(fā)光的功率密度高達5×1012W/cm2。超景深顯微鏡的外觀設(shè)計注重人體工程學，使得長時間使用也不會感到疲勞。

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