注意事項:染色前:①切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。②撈片時,較好一張玻片撈一個組織,組織較好位于玻片的中間,美觀的同時也利于脫蠟(有時二甲苯的液面低于組織片的時候,達不到脫蠟的目的)。③石蠟切片脫蠟到水時,一定要注意組織切片脫蠟務必要徹底(脫蠟時間不能太少)以使脫蠟后的組織達到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,在染色時染色液未能充分與組織接觸,較終導致染色效果不佳,甚至染不上顏色。④在染色過程中較好不要在玻片上貼標簽紙,以避免脫蠟時把標簽紙也浸沒,致使標簽紙上的膠黏到玻片上,造成染色不佳。特殊染色是為了顯示與確定組織或細胞中的正常結構或病理過程中出現(xiàn)的異常物質。安徽糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO42H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個月,變黃則失效。安徽糖原染色試劑盒量大從優(yōu)生物膜與細胞器的研究。
PAS技術是很少可檢測不同種類的黏液物質(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應用PAS技術之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,不主張應用唾液。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置。
特染的應用價值:現(xiàn)代病理學中免疫組織化學技術、電子顯微鏡技術以及其它細胞及分子生物學技術應用日益普遍,但由于這些技術要求一定的實驗條件以及所需的試劑價格較為昂貴,對于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學技術則具有無需復雜的實驗條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優(yōu)勢,在臨床病理學診斷中具有重要的應用價值。比如,當細胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當組織中出現(xiàn)均一化學物質是否為淀粉樣變性等,用組織化學技術區(qū)別起來很簡單,所以組織化學技術,雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個很有實用價值的技術~對臨床樣本進行染色,以便樣本的進一步篩查和檢測。
臨床意義:1.急性白血病類型的鑒別紅白血病的幼紅細胞PAS染色多呈陽性反應,陽性率高,反應強;成熟紅細胞有時亦可為陽性;急性淋巴細胞白血病的原、幼淋巴細胞PAS染色多為紅色顆?;驂K狀陽性反應;急性粒細胞白血病的原粒細胞呈陰性或胞質呈彌漫淡色陽性反應;急性早幼粒細胞白血病異常早幼粒細胞的PAS染色為陽性反應;急性單核細胞白血病原、幼單核細胞PAS染色陽性反應呈彌漫分布的紅色細顆粒,巨核細胞白血病原巨核細胞PAS染色呈陽性或強陽性反應,表現(xiàn)為紅色顆?;驂K狀。2.各類貧血的鑒別MDS、缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(曾稱地中海貧血)的幼紅細胞PAS染色多為陰性反應,有時可出現(xiàn)陽性反應;巨幼紅細胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細胞PAS染色為陰性。過碘酸將血細胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。安徽糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
在染色過程中較好不要在玻片上貼標簽紙。安徽糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
注意事項:染色時:①染色時必須嚴格按照染色操作說明書進行染色。②在染色過程中,前一個染液浸染完成后,在進行下一個染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個染液沖洗干凈后再進行下一步驟。③每次滴加染液前,務必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時,務必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費試劑。在染色時,用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈,這樣在滴加染液時就不會使染液溢出。安徽糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細而短的纖維,大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細胞團索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗的重要指標,尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔...