Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag，His?Tag等重組表達(dá)蛋白及抗體，適合～0.5 mL裂解液操作 6次低速離心，總耗時~100分鐘（含65分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動物實驗前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動物實驗之前還需進(jìn)行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應(yīng)該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進(jìn)行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]上海超濾濃縮管哪家比較專業(yè)。寶山區(qū)濃縮管訂購

脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心，總耗時~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做：加入1.5 mL用于置換的緩沖液，1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（有5種截留分子量規(guī)格可選）。 4. 加入1.5 mL樣品，4,000×g離心15 min進(jìn)行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液，4,000×g離心15 min，換液的同時進(jìn)行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進(jìn)行較大體積操作時，可以適當(dāng)延長離心時間，也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細(xì)信息。南京默克15ml超濾濃縮管銷售一個好的超濾濃縮管代理銷售需要具備哪些特點您了解嗎？

特點與優(yōu)點： 高產(chǎn)：沒有樣品轉(zhuǎn)移，損失更少 溫和：特別的滲濾設(shè)計使換液過程更溫和 快速：從細(xì)胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活：一種離心方法，***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的，常常需要摸索和優(yōu)化。應(yīng)該考慮為特定蛋白選擇相應(yīng)的工具進(jìn)行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法！ Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液

特點與優(yōu)點 溫和的磁力攪拌避免發(fā)生聚集和剪切變性 所有型號都可以高壓滅菌 提供 3 種規(guī)格共選擇，用于濃縮 3mL - 400mL 及更大體積樣品 濃度達(dá) 10% 的溶液依然可以獲得高流速 應(yīng)用： 大分子（如蛋白、酶、抗體和***）溶液的濃縮和緩沖液置換 滲濾（Diafiltration）模式 非連續(xù)滲濾是換液的一種操作方法，即先濃縮到一定濃度再稀釋到起始的體積，并多次重復(fù)這個操作，直到溶液中的鹽或溶劑被 去除或降到需要的濃度。而連續(xù)滲濾（保持恒定體積）是將超濾杯經(jīng)轉(zhuǎn)換裝置（目錄號6003）與補(bǔ)液杯（目錄號6028）連接， 使供氣壓和液體流轉(zhuǎn)。連接有轉(zhuǎn)換裝置時，不必停下系統(tǒng)的運轉(zhuǎn)就可以即時進(jìn)行濃縮和滲濾之間的切換，將兩種操作模式的優(yōu)點 集中在一起，有利于敏感的（蛋白）樣品在**恒定、溫和的條件下高效換液。上海超濾濃縮管批發(fā)商。

加入漂洗緩沖液（體積是樹脂柱床體積的7.5倍）并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液（體積是樹脂柱床體積的5倍）與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min?；厥展苤屑醇兓玫牡鞍住? 6. 如果是純化抗體，在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時，可以延長結(jié)合反應(yīng)時間，并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。買超濾濃縮管找益啟生物公司。南京默克15ml超濾濃縮管銷售

超濾濃縮管的系列有很多。寶山區(qū)濃縮管訂購

蛋白親和純化（無需換液和濃縮） * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管～1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法，但溶液體積和離心時間等需要略加優(yōu)化。 3次低速離心，總耗時~75分鐘（含60分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹脂（沉降的柱床體積）和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹脂。（柱床）樹脂量≥ 500μL時采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h*，其間可溫和攪動促進(jìn)結(jié)合。寶山區(qū)濃縮管訂購