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膜的吸附損失 對(duì)于濃度很低及珍貴的樣品，除了考慮截留效率和操作方便外，額外 要關(guān)注的是采用的超濾膜及設(shè)備對(duì)目標(biāo)蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質(zhì)對(duì)生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類(lèi)膜中對(duì)生物分子吸附**小，是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產(chǎn)品成為優(yōu)先的**技術(shù)關(guān)鍵之一。濾膜和裝置表面對(duì)溶質(zhì)的 吸附對(duì)樣品收率會(huì)產(chǎn)生直接影響，所以如果希望盡可能提高得率，就 應(yīng)該考慮采用較小的設(shè)備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應(yīng)該選 用膜面積小的裝置，同時(shí)保證一定的流速。默克密理博設(shè)計(jì)了一系列 離心式或攪拌式裝置，配合不同的膜面積、不...

加入漂洗緩沖液（體積是樹(shù)脂柱床體積的7.5倍）并離心。< 500μL樹(shù)脂時(shí)1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹(shù)脂時(shí)2,000×g離心4 min。 4. 使用一個(gè)新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液（體積是樹(shù)脂柱床體積的5倍）與樹(shù)脂混勻并離心。< 500μL樹(shù)脂時(shí)1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹(shù)脂時(shí)2,000×g離心4 min?；厥展苤屑醇兓玫牡鞍?。 6. 如果是純化抗體，在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí)，可以延長(zhǎng)結(jié)合反應(yīng)時(shí)間，并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購(gòu)不帶Amicon? Ultra ...

截留 截留有時(shí)也稱(chēng)為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致分子量相近 的分子表現(xiàn)非常不同的截留狀態(tài)。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強(qiáng) 度改變的情況下傾向于聚集或改變構(gòu)象，因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多，從而導(dǎo)致排阻增加。比如，有些蛋白質(zhì)在某些緩沖液條件下 會(huì)發(fā)生多聚化，而另一些則發(fā)生解聚（如血紅素蛋白）成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復(fù)雜。以默克密理博的經(jīng)驗(yàn)，我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優(yōu)先，再根據(jù)實(shí)際情況加以調(diào)整。上海Millipore超濾濃縮管授權(quán)代理商！南京Merck離心濃縮管咨詢(xún)問(wèn)價(jià)蛋白親和純化（無(wú)需換液和濃縮） * 本...

提供的超濾管是沒(méi)有經(jīng)過(guò)去內(nèi)***處理的，同時(shí)由于內(nèi)***通常以多聚體的形式存在，大小 在10-1000KD之間不等，在超濾的過(guò)程中是無(wú)法去除的?？稍趯?shí)驗(yàn)前通過(guò)先用0.5M NaOH預(yù)清洗，隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內(nèi)***。關(guān)于針對(duì)Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過(guò)的內(nèi)***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜，這種材質(zhì)是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對(duì)于一些疏水性蛋白或非極性蛋白，它們和膜的非特異吸附可能會(huì)增強(qiáng)，對(duì)于這種情況，可以嘗試在實(shí)驗(yàn)前對(duì)超濾管進(jìn)行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra ...

對(duì)于慢***推薦Amicon? Ultra 100kDa; 對(duì)于腺***推薦Amicon? Ultra 50kDa。具體的操作步驟可以參考***濃縮純化試劑盒FTLV00003和FTAV00003的產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)。另提供AAV（腺相關(guān)***）的制備方法供參考。 去污劑因其獨(dú)特的性質(zhì)，當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度（Critical Micelle Concentration, CMC）時(shí)，去污劑分子會(huì)聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象，這有可能會(huì)影響去污劑的去除效果。 Amicon? Ultra超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析，可用緩沖液或Milli-Q?水預(yù)清洗。如果干擾仍然存在，用0.1 N N...

Amicon? Ultra 4 mL 超濾管 -離心速度快而保持很高的回收率 4 種不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon? Ultra 4mL 超濾管中濃縮（3kDa 細(xì)胞色素 C， 10kDa 細(xì)胞色素 C，30kDa BSA，100kDa IgG）， 測(cè)定在離心一定時(shí)間后的回收率。數(shù)據(jù)顯 示所有樣品在離心 15 分鐘左右回收率均 >95%。 為了方便初次使用者選擇**合適的超 濾管產(chǎn)品，默克密理博生命科學(xué)部網(wǎng) 站上提供選擇指引，您需要按照提 示進(jìn)行選擇，**終會(huì)選出一款產(chǎn)品。 為每次實(shí)驗(yàn)選擇**合適的， 您也能快速成為超濾高手！你知道上海超濾濃縮管代理銷(xiāo)售哪家...

核苷酸截留分子量（NCO） 超濾膜的 NMWL 是用球形蛋白標(biāo)定的，適合各種蛋白研究，但在核酸 和多糖純化時(shí)則要考慮更多因素。這些分子的棒狀的三維結(jié)構(gòu)容易漏 過(guò)，相對(duì)于球形蛋白需要更致密的膜（截留分子量更小）。所以選擇 濾膜是更多考慮的是核苷酸長(zhǎng)度而非分子量。 濃差極化 濃差極化實(shí)質(zhì)是溶質(zhì)累積在膜表面造成的堵塞，產(chǎn)生除了膜本身截留分 子量以外的過(guò)濾限制。當(dāng)溶質(zhì)濃度較高時(shí)，會(huì)形成相當(dāng)于第二層濾膜作 用的膠體層，干擾分子通過(guò)濾膜，同時(shí)降低流速。pH 值、緩沖液的成分 也會(huì)影響目的分子的狀態(tài)而使?jié)獠顦O化現(xiàn)象加劇或減輕。超濾濃縮管代理銷(xiāo)售哪家比較靠譜。黃浦區(qū)Merck超濾濃縮管代理商...

脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心，總耗時(shí)~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做：加入1.5 mL用于置換的緩沖液，1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（有5種截留分子量規(guī)格可選）。 4. 加入1.5 mL樣品，4,000×g離心15 min進(jìn)行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液，4,000×g離心15 min，換液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收處...

特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)： 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì)，滯留體積很小，樣品損失少， 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達(dá)到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設(shè)計(jì)的死體積防止離干，保證樣品回收率和活性 有四種截留分子量供選擇 法醫(yī)gDNA鑒定、PCR產(chǎn)物純化與小分子分離 Microcon? 超濾管 Microcon?為橫膜式超濾管，沒(méi)有死體積，用于大分子樣品的濃縮、脫 鹽、換液都非常高效方便。實(shí)際應(yīng)用中還常用于大分子與其它分子的分 離，比如蛋白酶切后的處理及藥物結(jié)合率分析等等。超濾濃縮管的優(yōu)缺點(diǎn)您知道嗎？楊浦區(qū)超濾濃縮管一級(jí)代理多臺(tái)同時(shí)操作模式 ...

用超濾對(duì)分子進(jìn)行分級(jí) 通過(guò)選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切實(shí)際。事實(shí)上，膜的規(guī)格描述是基于截留而非通過(guò) 的性質(zhì)。一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中，采用 100k NMWL 濾膜，大于 100kDa 的分子截 留率 >90%，但這時(shí)比膜孔徑小的分子并不是完全自由地通過(guò)濾膜， 75kDa 的分子截留率為 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留?；旌系? 溶液中的各 種成分通過(guò)膜并不像單一成分的溶液那么簡(jiǎn)單和容易。實(shí) 踐中，如果要分離兩種大分子，它們之間的分子量差異應(yīng)該達(dá)到 10 倍 以上，或至少膜的 NMWL 規(guī)格在兩種蛋白之間，則可達(dá)到比較理想的 分離...

這種小管適合在1.5mL離心機(jī)中使用，其Ultracel?超濾膜對(duì)于蛋白及其它成分都表現(xiàn)出 極低的非特異性結(jié)合，連同醫(yī)藥級(jí)O型圈封閉設(shè)計(jì)，確保更少的樣品丟失，更穩(wěn)定的數(shù)據(jù)結(jié)果。諸多考慮周到的精細(xì)設(shè)計(jì)使Microcon?成為比較好用的樣品制備工具之一。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)： 低吸附膜和反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì)，即使是小體積、低濃度樣品得率也能達(dá)到95%以上 可以用產(chǎn)品自帶的1.5mL樣品收集管存儲(chǔ)濾過(guò)液和濃縮產(chǎn)物 濃縮倍數(shù)可達(dá)100X 操作簡(jiǎn)便快捷，易于標(biāo)準(zhǔn)化。 Microcon? DNA Fast Flow 超濾管 專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于從含有SDS的溶液中濃縮和回收基因組DNA。管子和膜均為低非特異性吸附...

外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當(dāng)于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋?zhuān)cprotein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上（以避免抗體洗脫下來(lái)對(duì)外泌體的干擾），請(qǐng)參考默克磁珠操作說(shuō)明書(shū)。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號(hào)信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備...

通量（超濾效率）及其影響因素 超濾過(guò)程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積，使用高 NMWL 濾膜可以增加通量，但同時(shí) 會(huì)降低回收率。選擇膜和裝置時(shí)需要同時(shí)考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多，包括： 壓力：較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進(jìn)行超濾時(shí)，流量隨著跨膜壓力 （TMP）的增大而增加。正壓條件下操作，如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯， 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***，通量會(huì)達(dá)到一個(gè)平臺(tái)，甚 至可能隨著壓力的增加而降低。上海超濾濃縮管代理銷(xiāo)售電話多少？黃浦區(qū)離心濃縮管聯(lián)系人超濾（UF）常用于分離溶液...

這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應(yīng)用兼容，常常需要用透析或滲濾方法對(duì)蛋白樣品進(jìn)行緩沖液置換。傳統(tǒng)透析方法需要時(shí)間很長(zhǎng)，多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活，而且***還需要一步濃縮。新產(chǎn)品 Amicon? Pro 帶來(lái)了突破性的革新，需一步溫和的滲濾操作即可達(dá)到同時(shí)對(duì)樣品進(jìn)行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標(biāo)準(zhǔn) 操作步驟的優(yōu)化與簡(jiǎn)化往往帶來(lái)更好的結(jié)果，數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性、可比性和高通量化隨之得以改 善，默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創(chuàng)造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為...

默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設(shè)計(jì) 一經(jīng)推出即成為生物樣品操作的行業(yè)頭牌產(chǎn)品。不論是蛋白、 核酸、***或顆粒物，抑或低濃度樣品或?qū)氋F的活性樣品， Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn) 化，并滿足下游各種應(yīng)用的要求，使研究者處理樣品時(shí)倍感輕 松。 Amicon? Ultra 超濾管的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)： 有效濃縮同時(shí)保證比較高的蛋白回收率 合理的死體積設(shè)計(jì) ?避免樣品離干而降低回收率 ?便于估計(jì)和控制樣品濃縮倍數(shù) ?重復(fù)性好，便于樣品數(shù)據(jù)相互比較一個(gè)好的超濾濃縮管代理銷(xiāo)售需要具備哪些特點(diǎn)您知道嗎？常州Merck超濾濃縮管首...

大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內(nèi)濃縮至350μL；死體積設(shè)計(jì)確保樣品不會(huì)被離干而損失。依起始材料不同、起始體積不同，樣品可被濃縮50-200倍。低吸附豎向再生纖維素超濾膜及雙超濾柱設(shè)計(jì)，加快處理速度；反轉(zhuǎn)離心操作進(jìn)一步使寶貴的濃縮樣品回收率得以提高。這個(gè)產(chǎn)品替代傳統(tǒng)的透析、凍干、沉淀或攪拌式濃縮等技術(shù)和方法，是非常方便的工具。 特別推薦的應(yīng)用： 色譜洗脫產(chǎn)物的濃縮和脫鹽 單克隆抗體濃縮 培養(yǎng)上清中蛋白和***的濃縮 組織勻漿液和細(xì)胞裂解液澄清超濾濃縮管代理銷(xiāo)售哪家比較靠譜。楊浦...

核苷酸截留分子量（NCO） 超濾膜的 NMWL 是用球形蛋白標(biāo)定的，適合各種蛋白研究，但在核酸 和多糖純化時(shí)則要考慮更多因素。這些分子的棒狀的三維結(jié)構(gòu)容易漏 過(guò)，相對(duì)于球形蛋白需要更致密的膜（截留分子量更小）。所以選擇 濾膜是更多考慮的是核苷酸長(zhǎng)度而非分子量。 濃差極化 濃差極化實(shí)質(zhì)是溶質(zhì)累積在膜表面造成的堵塞，產(chǎn)生除了膜本身截留分 子量以外的過(guò)濾限制。當(dāng)溶質(zhì)濃度較高時(shí)，會(huì)形成相當(dāng)于第二層濾膜作 用的膠體層，干擾分子通過(guò)濾膜，同時(shí)降低流速。pH 值、緩沖液的成分 也會(huì)影響目的分子的狀態(tài)而使?jié)獠顦O化現(xiàn)象加劇或減輕。您知道益啟生物公司的超濾濃縮管系列都有哪些嗎？默克離心濃縮管參數(shù)...

默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設(shè)計(jì) 一經(jīng)推出即成為生物樣品操作的行業(yè)頭牌產(chǎn)品。不論是蛋白、 核酸、***或顆粒物，抑或低濃度樣品或?qū)氋F的活性樣品， Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn) 化，并滿足下游各種應(yīng)用的要求，使研究者處理樣品時(shí)倍感輕 松。 Amicon? Ultra 超濾管的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)： 有效濃縮同時(shí)保證比較高的蛋白回收率 合理的死體積設(shè)計(jì) ?避免樣品離干而降低回收率 ?便于估計(jì)和控制樣品濃縮倍數(shù) ?重復(fù)性好，便于樣品數(shù)據(jù)相互比較超濾濃縮管的系列有很多種。默克離心濃縮管聯(lián)系人特別推薦應(yīng)用（提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告作為參...

蛋白親和純化（無(wú)需換液和濃縮） * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管～1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法，但溶液體積和離心時(shí)間等需要略加優(yōu)化。 3次低速離心，總耗時(shí)~75分鐘（含60分鐘孵育時(shí)間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹(shù)脂（沉降的柱床體積）和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹(shù)脂。（柱床）樹(shù)脂量≥ 500μL時(shí)采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹(shù)脂吸打混勻。孵育1 h*，其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。益啟生物公司就帶您了解一下超濾濃縮...

7次低速離心，總耗時(shí)~100分鐘（含60分鐘孵育時(shí)間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹(shù)脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹(shù)脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（可選用50k MWCO型號(hào)）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹(shù)脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入2...

無(wú)血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細(xì)胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據(jù)樣品的粘稠程度，以及需要制備的目標(biāo)外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來(lái)選擇和優(yōu)化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便達(dá)到更好的得率和操作體驗(yàn)。 樣品體積大于 30mL 時(shí)可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管，請(qǐng)注意攪拌式超濾杯在200mL 以?xún)?nèi)時(shí)吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進(jìn)一步提高特定外泌體的純度，可選用包被相應(yīng)抗體的磁珠進(jìn)行親...

Amicon? Ultra超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜，生產(chǎn)工藝嚴(yán)格，截留分子量明確而精細(xì)，蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白，那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少？ 按照經(jīng)驗(yàn)，建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)（10倍）。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的，但是對(duì)滅菌處理的具體方法沒(méi)有做相關(guān)的測(cè)試，所以無(wú)法提供更進(jìn)一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設(shè)計(jì)，不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶，建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時(shí)，以完全滅活RNA酶；殘留的DEPC可以用...

經(jīng)典離心濃縮裝置 Amicon? Ultra 離心超濾管 反轉(zhuǎn)離心回收 ?反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì)使蛋白樣品，特別是小體積樣品高效 回收，避免***頭吸取造成的樣品丟失或操作錯(cuò)誤 ?0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設(shè)計(jì)為反轉(zhuǎn)回收模式 樣品吸附損失小 ?Ultracel? 超濾膜為密理博超濾產(chǎn)品特有的設(shè) 計(jì)，非特異吸附比較低，減少樣品的吸附損失 ?膜和聚丙烯管都是低吸附材質(zhì)，保證> 90% 回收率 ?豎膜切向流設(shè)計(jì)，不像橫膜那樣容易堵，樣品 損失少 ?濃縮速度超快，**少需 10 分鐘超濾濃縮管的各種系列應(yīng)用領(lǐng)域還是不一樣的。無(wú)錫默克離心濃縮管代理商Amicon? ...

雖然影響因素較多，我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜，這樣可以比較大化樣品的回收，同時(shí)節(jié)省過(guò)濾時(shí)間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì)，表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù)NMWL分級(jí)，有時(shí)也用截留分子量（MWCO）。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見(jiàn)，實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí) 膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過(guò)的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí)，孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過(guò)率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)...

蛋白如果濃縮過(guò)快或者過(guò)度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過(guò) 20mg/ml。對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白，建議的改進(jìn)方法是： 1）離心力降為推薦離心力的30%-50% 2）改用截留分子量更大的超濾管（如原本選用10k，此時(shí)可以選擇30k） 3）在濃縮過(guò)程中取出超濾管，用***頭反復(fù)吹吸幾次后再繼續(xù)濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現(xiàn)這種情況，請(qǐng)先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應(yīng)立即使用，如暫時(shí)不用，請(qǐng)保持潤(rùn)濕狀態(tài)，避免重新干燥。益啟生物公司主要超濾濃縮管代理銷(xiāo)售。默...

離心方式的超濾方法進(jìn)行溶液置換也被稱(chēng)為“滲濾”，操作時(shí)樣品首先被濃縮，繼而加入新的溶液，再次濃縮時(shí)，原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學(xué)相容性與溶出 樣品的化學(xué)背景有時(shí)很多樣而復(fù)雜，過(guò)濾的過(guò)程中很重要的一點(diǎn)是操作過(guò)程不應(yīng)給樣品帶來(lái)新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學(xué)相容性請(qǐng)參考產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)或垂詢(xún)技術(shù)支持專(zhuān)線 ?；厥章始捌渲匾猿瑸V的**終目的常常是很大程度地回收目標(biāo)溶質(zhì)，但膜的很多特性會(huì)對(duì)這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括：? 標(biāo)稱(chēng)分子量限制（NMWL）/ 核酸截留分子量（NCO）? 截...

默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設(shè)計(jì)，一經(jīng)推出即成為生物樣品操作的行業(yè)頭牌產(chǎn)品。不論是蛋白、核酸、病-毒-或顆粒物，抑或低濃度樣品或?qū)氋F的活性樣品，Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn)化，并滿足下游各種應(yīng)用的要求，使研究者處理樣品時(shí)倍感輕松。 這款A(yù)micon Ultra 15 mL離心式過(guò)濾器借助10 kDa NMWL的濾膜可以進(jìn)行蛋白濃縮。Amicon Ultra離心式過(guò)濾器是蛋白純化、蛋白濃縮和脫鹽的理想工具。 Amicon? Ultra 超濾管的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)： 有效濃縮同時(shí)保證高的蛋白回收率 1.合理的死體積設(shè)計(jì) 2...

7次低速離心，總耗時(shí)~100分鐘（含60分鐘孵育時(shí)間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹(shù)脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹(shù)脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（可選用50k MWCO型號(hào)）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹(shù)脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入2...

外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當(dāng)于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋?zhuān)cprotein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上（以避免抗體洗脫下來(lái)對(duì)外泌體的干擾），請(qǐng)參考默克磁珠操作說(shuō)明書(shū)。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號(hào)信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備...

用超濾對(duì)分子進(jìn)行分級(jí) 通過(guò)選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切實(shí)際。事實(shí)上，膜的規(guī)格描述是基于截留而非通過(guò) 的性質(zhì)。一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中，采用 100k NMWL 濾膜，大于 100kDa 的分子截 留率 >90%，但這時(shí)比膜孔徑小的分子并不是完全自由地通過(guò)濾膜， 75kDa 的分子截留率為 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留?；旌系? 溶液中的各 種成分通過(guò)膜并不像單一成分的溶液那么簡(jiǎn)單和容易。實(shí) 踐中，如果要分離兩種大分子，它們之間的分子量差異應(yīng)該達(dá)到 10 倍 以上，或至少膜的 NMWL 規(guī)格在兩種蛋白之間，則可達(dá)到比較理想的 分離...