如果能確保用同樣的超濾管對其它蛋白成功操作的話,那么有可能是這個目的蛋白的原因。有時蛋白會因其本身的一些特性(構(gòu)象差異)而影響濃縮效果,建議選用上一分子量級別的超濾管(如原本選用30k,此時可以選擇10k)。 2)如果目的樣本也不在濾過液中,那么: a)蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL? b)用來確定樣本濃度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具體解決方法請參考上面的關(guān)于蛋白沉淀問題的解釋。對于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。無錫默克0.5ml超濾濃縮管聯(lián)系方式
特點與優(yōu)點: 高產(chǎn):沒有樣品轉(zhuǎn)移,損失更少 溫和:特別的滲濾設(shè)計使換液過程更溫和 快速:從細胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優(yōu)化。應(yīng)該考慮為特定蛋白選擇相應(yīng)的工具進行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液楊浦區(qū)超濾濃縮管哪家優(yōu)惠益啟生物公司的超濾濃縮管系列有很多。
膜的吸附損失 對于濃度很低及珍貴的樣品,除了考慮截留效率和操作方便外,額外 要關(guān)注的是采用的超濾膜及設(shè)備對目標(biāo)蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質(zhì)對生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類膜中對生物分子吸附**小,是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產(chǎn)品成為優(yōu)先的**技術(shù)關(guān)鍵之一。濾膜和裝置表面對溶質(zhì)的 吸附對樣品收率會產(chǎn)生直接影響,所以如果希望盡可能提高得率,就 應(yīng)該考慮采用較小的設(shè)備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應(yīng)該選 用膜面積小的裝置,同時保證一定的流速。默克密理博設(shè)計了一系列 離心式或攪拌式裝置,配合不同的膜面積、不同的截留分子量的切向 流系統(tǒng),支持您獲得理想的處理效果。
微濾中膜的孔徑大小通常以微米計,表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù) NMWL分級,有時也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數(shù)大于這個值的分子將在超濾時截留。一個確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個大小的球形分子。但為了保險起見,實踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時,孔徑減小 會增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進行樣品濃縮或除鹽時,需要謹慎地選擇合適的NMWL膜和設(shè)備。超濾濃縮管咨詢服務(wù)電話多少呢。
蛋白親和純化(無需換液和濃縮) * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優(yōu)化。 3次低速離心,總耗時~75分鐘(含60分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹脂(沉降的柱床體積)和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹脂。(柱床)樹脂量≥ 500μL時采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h*,其間可溫和攪動促進結(jié)合。上海超濾濃縮管銷售公司。江蘇默克4ml超濾濃縮管銷售
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雖然影響因素較多,我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時節(jié)省過濾時間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計,表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù)NMWL分級,有時也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數(shù)大于這個值的分子將在超濾時截留。一個確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個大小的球形分子。但為了保險起見,實踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時 膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時,孔徑減小 會增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進行樣品濃縮或除鹽時,需要謹慎地選擇合適的 NMWL膜和設(shè)備。雖然影響因素較多,我們通常建議截 留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時節(jié)省過濾時間。無錫默克0.5ml超濾濃縮管聯(lián)系方式