默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設(shè)計(jì) 一經(jīng)推出即成為生物樣品操作的行業(yè)頭牌產(chǎn)品。不論是蛋白、 核酸、***或顆粒物,抑或低濃度樣品或?qū)氋F的活性樣品, Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn) 化,并滿足下游各種應(yīng)用的要求,使研究者處理樣品時(shí)倍感輕 松。 Amicon? Ultra 超濾管的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn): 有效濃縮同時(shí)保證比較高的蛋白回收率 合理的死體積設(shè)計(jì) ?避免樣品離干而降低回收率 ?便于估計(jì)和控制樣品濃縮倍數(shù) ?重復(fù)性好,便于樣品數(shù)據(jù)相互比較Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾、濃縮、除鹽!上海默克離心濃縮管咨詢問價(jià)
外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當(dāng)于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上(以避免抗體洗脫下來(lái)對(duì)外泌體的干擾),請(qǐng)參考默克磁珠操作說(shuō)明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號(hào)信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn),相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實(shí)驗(yàn)室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題,真是惠而不費(fèi),不亦樂乎?黃浦區(qū)超濾濃縮管哪家優(yōu)惠超濾濃縮管的系列有很多。
對(duì)于慢***推薦Amicon? Ultra 100kDa; 對(duì)于腺***推薦Amicon? Ultra 50kDa。具體的操作步驟可以參考***濃縮純化試劑盒FTLV00003和FTAV00003的產(chǎn)品使用說(shuō)明書。另提供AAV(腺相關(guān)***)的制備方法供參考。 去污劑因其獨(dú)特的性質(zhì),當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度(Critical Micelle Concentration, CMC)時(shí),去污劑分子會(huì)聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象,這有可能會(huì)影響去污劑的去除效果。 Amicon? Ultra超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析,可用緩沖液或Milli-Q?水預(yù)清洗。如果干擾仍然存在,用0.1 N NaOH清洗,然后用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。
這種小管適合在1.5mL離心機(jī)中使用,其Ultracel?超濾膜對(duì)于蛋白及其它成分都表現(xiàn)出 極低的非特異性結(jié)合,連同醫(yī)藥級(jí)O型圈封閉設(shè)計(jì),確保更少的樣品丟失,更穩(wěn)定的數(shù)據(jù)結(jié)果。諸多考慮周到的精細(xì)設(shè)計(jì)使Microcon?成為比較好用的樣品制備工具之一。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 低吸附膜和反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì),即使是小體積、低濃度樣品得率也能達(dá)到95%以上 可以用產(chǎn)品自帶的1.5mL樣品收集管存儲(chǔ)濾過液和濃縮產(chǎn)物 濃縮倍數(shù)可達(dá)100X 操作簡(jiǎn)便快捷,易于標(biāo)準(zhǔn)化。 Microcon? DNA Fast Flow 超濾管 專門設(shè)計(jì)用于從含有SDS的溶液中濃縮和回收基因組DNA。管子和膜均為低非特異性吸附的材質(zhì),醫(yī)用級(jí)O型圈密封,保證了在洗滌步驟中樣品丟失**少。反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì),即使樣品量很小也能獲得理想的得率,濃縮倍數(shù)可以達(dá)到20X。您知道益啟生物公司的超濾濃縮管系列都有哪些嗎?
截留 截留有時(shí)也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致分子量相近 的分子表現(xiàn)非常不同的截留狀態(tài)。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強(qiáng) 度改變的情況下傾向于聚集或改變構(gòu)象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,從而導(dǎo)致排阻增加。比如,有些蛋白質(zhì)在某些緩沖液條件下 會(huì)發(fā)生多聚化,而另一些則發(fā)生解聚(如血紅素蛋白)成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復(fù)雜。以默克密理博的經(jīng)驗(yàn),我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優(yōu)先,再根據(jù)實(shí)際情況加以調(diào)整。超濾濃縮管的優(yōu)點(diǎn)有很多。楊浦區(qū)濃縮管代理價(jià)
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通量(超濾效率)及其影響因素 超濾過程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積,使用高 NMWL 濾膜可以增加通量,但同時(shí) 會(huì)降低回收率。選擇膜和裝置時(shí)需要同時(shí)考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多,包括: 壓力:較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進(jìn)行超濾時(shí),流量隨著跨膜壓力 (TMP)的增大而增加。正壓條件下操作,如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯, 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***,通量會(huì)達(dá)到一個(gè)平臺(tái),甚 至可能隨著壓力的增加而降低。上海默克離心濃縮管咨詢問價(jià)