外泌體Exosome是由活細(xì)胞分泌的,它是一種亞細(xì)胞成分,組要成分是磷脂雙分子和攜帶的膜性分子,其界定依據(jù)形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)及提取方式不同細(xì)胞源的exosome是不同的,這些不同的理化性質(zhì)有利于exosome的提取。從體外培養(yǎng)的細(xì)胞中分離和提取exosome的主要方法是高速離心法,這種方法能分離出大的碎片和已經(jīng)死亡細(xì)胞,然后再通過超速離心法分離 提取exosome 比較后利用糖梯度,使脂質(zhì)囊性質(zhì)的exosome漂浮于上面。具體來說,Exosome的研究方式是分離/捕獲小囊泡,并拷問它所攜帶的貨物。就目前而言,人們多采用超速離心、磁珠免疫捕獲、沉淀或過濾的方法,對(duì)exosome進(jìn)行前期的分離。外泌體檢測服務(wù) 承接各類大醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)!專業(yè)!可靠。河南推薦的外泌體粒徑分析
外泌體鑒定透射電鏡觀察能夠確認(rèn)外泌體的形態(tài)學(xué)特征,但無法體現(xiàn)樣本中所有外泌體顆粒的粒徑分布情況及整體濃度;流式細(xì)胞儀可測定的粒徑大小為150nm以上,并不適合檢測游離的外泌體顆粒。英瀚斯生物采用基于馬爾文Nanosight平臺(tái)的納米顆粒追蹤分析 (Nanoparticle Tracking Analysis, NTA) 技術(shù),快速、精細(xì)地分析外泌體粒徑分布濃度,為外泌體存在提供有力證據(jù)。目前外泌體的提取方法主要可歸納為以下六種:一是超速離心法;二是過濾離心;三是密度梯度離心法;四是免疫磁珠法;五是PS親和法;六是色譜法。陜西值得信賴的外泌體電鏡外泌體檢測服務(wù),公司自有實(shí)驗(yàn)室,歡迎考察。
外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn), 1987年Johnstone將其命名為“exosome”?,F(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中 。外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年, Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌 的 exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不僅只是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對(duì)exosome的研究熱情激增,截止已經(jīng)通過286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。
外泌體與疾病的研究表明:1.外泌體可能在代謝性疾病的出現(xiàn)以及心血管健康中發(fā)揮作用。2.外泌體生物發(fā)生和神經(jīng)元細(xì)胞中分泌小泡的調(diào)節(jié)之間的交集為外泌體和神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)制之間假定的聯(lián)系提供了新的見解。3.與研究外泌體在其他疾病中的作用相比,外泌體在**中的研究進(jìn)展迅速,而且外泌體與**的幾個(gè)主要特征有關(guān)。外泌體影響**、**生長和轉(zhuǎn)移、副**綜合征和***耐藥性。外泌體在**進(jìn)展中的作用可能是動(dòng)態(tài)的,并且與**的類型、遺傳學(xué)和分期有關(guān)。外泌體在分泌細(xì)胞和受體細(xì)胞間的穿梭介導(dǎo)了細(xì)胞間的生物分子傳遞。
外泌體的提取方法有多種:包括傳統(tǒng)的差速離心、密度梯度離心,以及后來發(fā)展的超濾法、聚合物沉淀法、免疫分離、隔離篩選法、體積排阻色譜法等。這些方法各有利弊。外泌體經(jīng)細(xì)胞分泌后存在于體液或者血液中,故檢測外泌體的樣本一般為血液(全血、血漿)、體液(尿液、唾液、腦脊液、羊水、唾液等)、細(xì)胞上清液。提取所需要樣本量血清:樣本量>5ml(全血10ml)。血漿:樣本量>5ml(全血10ml)。體液:樣本量>20ml。細(xì)胞培養(yǎng)上清液:樣本量>20ml。外泌體檢測服務(wù),動(dòng)物模型 - 南京英瀚斯生物提供小鼠模型.**模型.外泌體檢測服務(wù)。西藏靠譜的外泌體價(jià)格
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外泌體參與了機(jī)體不同的生理和病理過程,并對(duì)細(xì)胞活動(dòng)發(fā)揮重要的調(diào)控作用,如免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、**侵襲等。且外泌體具有細(xì)胞類型特異性,即不同細(xì)胞分泌的外泌體的組成成分和功能不同,這使得外泌體具有成為多種疾病早期診斷標(biāo)志物的潛力。此外,外泌體在作為基因和藥物運(yùn)載、**和**生物學(xué)等方面也已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。外泌體存在于人類或動(dòng)物的各種體液中,如細(xì)胞培養(yǎng)上清、血液、尿液等,我們可以選擇不同的樣本來源進(jìn)行相關(guān)的外泌體研究。不同的實(shí)驗(yàn)樣本采集時(shí)需要注意的地方不一樣,如細(xì)胞培養(yǎng)上清在收集樣本前需換成無外泌體血清或者無血清培養(yǎng)基培養(yǎng),以降低背景值的干擾。河南推薦的外泌體粒徑分析
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