外泌體提取之后利用電鏡來分析其大小和形態(tài)，利用流式細胞儀來分析細胞表面標記，通過Western blot和ELISA等方法對蛋白進行分析，或通過qPCR和新一代測序（NGS）來分析RNA。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在分離exosome時，約有56%的人采用超速離心法，說明這種方法仍是目前的金標準方法。不過這種方法缺點也不少：耗時耗力，往往需要8-30個小時；每次比較多只能處理6個樣品；需要大量的起始材料；產(chǎn)量不高。商業(yè)化的exosome提取試劑盒已經(jīng)上市，更為簡單省事。外泌體實驗，就找南京英瀚斯。遼寧專門做外泌體檢測

外泌體是包含了復雜RNA展的總外泌體分離試劑從細胞培養(yǎng)基或任何體液中即刻分離完整的外泌體。這些試劑及其隨附的方案是多種試驗的理想選擇，包括處理少量樣本和處理多個樣本。從細胞培養(yǎng)物中富集的總外泌體（使用“總外泌體分離”試劑或超速離心）可以通過免疫磁珠捕獲進一步純化特定的亞群。使用基于Dynabeads的CD9、CD63、CD81或EpCam特異性試劑，或?qū)㈡溍褂H和素試劑與您選擇的生物素化抗體結合，以基于表面抗原，純化所有群體。北京專門做外泌體南京英瀚斯生物-外泌體檢測服務_疾病醫(yī)學模型_。

外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合，有文獻報道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?，F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63, CD81 和CD9)）、熱休克蛋白家族（(HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33（結腸上皮細胞來源）、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源)、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素（不成熟的樹突狀細胞）。

外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn)， 1987年Johnstone將其命名為“exosome”?，F(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中 。外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年， Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細胞分泌 的 exosome可以被人的肥大細胞捕獲，并且其攜帶的mRNA成分可以進入細胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì)，不僅只是mRNA，exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性，在進入靶細胞后可以靶向調(diào)節(jié)細胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對exosome的研究熱情激增，截止已經(jīng)通過286項研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。外泌體在分泌細胞和受體細胞間的穿梭介導了細胞間的生物分子傳遞。

外泌體表面有其特異性標記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗，難以***普及。外泌體是大多數(shù)細胞分泌的40 - 150nm的膜泡，存在于細胞培養(yǎng)基、血漿、血清、唾液、尿液、羊水和惡性腹水等生物液體中。外泌體檢測可找英瀚斯生物，測序、電鏡、粒徑分析都可做。南京外泌體檢測服務公司，科研課題解決方案。遼寧專門做外泌體檢測

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外泌體的臨床應用：1.在疾病診斷中的應用潛能：外泌體存在于所有的生物體液中，并由所有細胞分泌，這使得外泌體在液體活檢中具有吸引力，可用于縱向取樣跟蹤疾病進展。外泌體的生物發(fā)生可以捕獲復雜的細胞外和細胞內(nèi)分子，可用于***的、多參數(shù)的診斷檢測。外泌體的表面蛋白也有助于其免疫捕獲和富集。外泌體診斷應用的重點疾病包括心血管病、影響***系統(tǒng)的疾病和**。這項努力正在迅速擴展到肝臟、腎臟和肺部的其他疾病。2.在疾病***中的應用潛能：外泌體向病變細胞運送功能物質(zhì)的特性有利于它們作為***載體。與脂質(zhì)體相比，外泌體的免疫***率低。此外外泌體已被證實且具有良好的耐受性，無明顯副作用遼寧專門做外泌體檢測

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