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病理實(shí)驗(yàn)外包,染色常見染色介紹天狼星紅染色:主要由天狼星紅染色液、Mayer蘇木素染色液組成,主要用于各種組織病變時(shí)對膠原纖維異?;蚶w維增生的研究中,在普通光學(xué)顯微鏡下心臟血管等組織的膠原纖維被染成紅色,在偏振光鏡下對各種纖維化病變的分型和分級(jí)研究有一定的幫助作用。采用免疫組化技術(shù)也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維,但所用抗體昂貴,操作費(fèi)時(shí),而采用天狼星紅染色試劑便宜,操作簡單。天狼星紅染色液操作步驟1、組織固定于10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。2、切片厚6μm,常規(guī)脫蠟至水。3、天狼星紅染色液滴染1h。4、流水稍沖洗,去除切片表面染液。5、Mayer蘇木素染色液染細(xì)胞核8~10min。6、流水沖洗10min。7、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。天狼星紅染色可用作肝纖維化以及腎纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測需要注意哪些方面。湖北整體病理實(shí)驗(yàn)外包推薦

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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色多聚甲醛保存組織的注意事項(xiàng):多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會(huì)被氧化為酸,使溶液pH降低,從而影響染色。不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。多聚甲醛雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過24小時(shí)。多聚甲醛可長期存在于固定過的細(xì)胞或組織樣品中,固定完成后用適當(dāng)?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時(shí)仍會(huì)有殘留,因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如果受醛基影響,須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%多聚甲醛固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。青海整體病理實(shí)驗(yàn)外包專注于整體的科研項(xiàng)目、病理實(shí)驗(yàn)外包檢測解決方案。

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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色熒光原位雜交技術(shù)詳細(xì)介紹1、原理FISH(fluorescenceinsituhybridization)技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的,二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報(bào)告分子如生物素、地高辛,可利用該報(bào)告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的**化學(xué)反應(yīng),經(jīng)熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進(jìn)行定性、定量或相對定位分析。2、實(shí)驗(yàn)流程FISH樣本的制備→探針的制備→探針標(biāo)記→雜交→(染色體顯帶)→熒光顯微鏡檢測→結(jié)果分析。3、特點(diǎn)原位雜交的探針按標(biāo)記分子類型分為放射性標(biāo)記和非放射性標(biāo)記。用同位素標(biāo)記的放射性探針優(yōu)勢在于對制備樣品的要求不高,可以通過延長曝光時(shí)間加強(qiáng)信號(hào)強(qiáng)度,故較靈敏。缺點(diǎn)是探針不穩(wěn)定、自顯影時(shí)間長、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。

病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹免疫熒光染色:免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術(shù),是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展比較早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項(xiàng)技術(shù)。熒光抗體示蹤或檢查相應(yīng)抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光抗原標(biāo)記物示蹤或檢查相應(yīng)抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術(shù)。在實(shí)際工作中熒光抗原技術(shù)很少應(yīng)用,所以人們習(xí)慣將熒光抗體技術(shù)稱為免疫熒光技術(shù)。免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性,所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時(shí),只要知道其中的一個(gè)因素,就可以查出另一個(gè)因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在抗體(或抗原)上,與其相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合后,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測,實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)豐富,認(rèn)真負(fù)責(zé),方便高效。

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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹番紅-固綠(骨)染色:番紅O-固綠染色可直觀反映關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下的骨組織結(jié)構(gòu),軟骨呈紅色,成骨呈綠色,對比鮮明,區(qū)分清晰,在關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨的形態(tài)學(xué)研究中備受青睞。嗜堿性的軟骨組織與堿性染料番紅O結(jié)合呈現(xiàn)紅色,嗜酸性的骨組織和酸性染料固綠結(jié)合而呈綠色或藍(lán)色。本質(zhì)上,番紅O與蛋白聚糖中的多聚陰離子物質(zhì)(硫酸軟骨素和硫酸角質(zhì)素)成正向比例結(jié)合(離子濃度),不與膠原結(jié)合,可間接反應(yīng)基質(zhì)中蛋白聚糖的含量與分布。正常的軟骨基質(zhì)分布均勻一致,當(dāng)軟骨受到損傷時(shí),創(chuàng)傷刺激可使軟骨基質(zhì)中糖蛋白立即釋放活化,使基質(zhì)成分發(fā)生變化,導(dǎo)致番紅O淡染,甚至失染。固綠可與結(jié)構(gòu)疏松的膠原纖維牢固結(jié)合,不宜褪色。簡要流程:石蠟切片/細(xì)胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→固綠染色→番紅O染色→脫水、透明、封片(中性樹膠)→番紅O-固綠染**(成骨呈綠色,軟骨呈紅色)。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。南京英瀚斯,專業(yè)的病理實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)平臺(tái)。青海整體病理實(shí)驗(yàn)外包

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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹掃描電鏡檢測:掃描電子顯微鏡的制造是依據(jù)電子與物質(zhì)的相互作用。當(dāng)一束高能的人射電子轟擊物質(zhì)表面時(shí),被激發(fā)的區(qū)域?qū)a(chǎn)生二次電子、俄歇電子、特征x射線和連續(xù)譜X射線、背散射電子、透射電子,以及在可見、紫外、紅外光區(qū)域產(chǎn)生的電磁輻射。同時(shí),也可產(chǎn)生電子-空穴對、晶格振動(dòng) (聲子)、電子振蕩 (等離子體)。原則上講,利用電子和物質(zhì)的相互作用,可以獲取被測樣品本身的各種物理、化學(xué)性質(zhì)的信息,如形貌、組成、晶體結(jié)構(gòu)、電子結(jié)構(gòu)和內(nèi)部電場或磁場等等。掃描電子顯微鏡 (scanning electron microscope, SEM) 是一種用于高分辨率微區(qū)形貌分析的大型精密儀器。具有景深大、分辨率高, 成像直觀、立體感強(qiáng)、放大倍數(shù)范圍寬以及待測樣品可在三維空間內(nèi)進(jìn)行旋轉(zhuǎn)和傾斜等特點(diǎn)。另外具有可測樣品種類豐富, 幾乎不損傷和污染原始樣品以及可同時(shí)獲得形貌、結(jié)構(gòu)、成分和結(jié)晶學(xué)信息等優(yōu)點(diǎn)。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。湖北整體病理實(shí)驗(yàn)外包推薦

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