病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色熒光原位雜交技術(shù)詳細(xì)介紹1、原理FISH(fluorescenceinsituhybridization)技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)。它的基本原理是:如果被檢測(cè)的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的,二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報(bào)告分子如生物素、地高辛,可利用該報(bào)告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的**化學(xué)反應(yīng),經(jīng)熒光檢測(cè)體系在鏡下對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行定性、定量或相對(duì)定位分析。2、實(shí)驗(yàn)流程FISH樣本的制備→探針的制備→探針標(biāo)記→雜交→(染色體顯帶)→熒光顯微鏡檢測(cè)→結(jié)果分析。3、特點(diǎn)原位雜交的探針按標(biāo)記分子類型分為放射性標(biāo)記和非放射性標(biāo)記。用同位素標(biāo)記的放射性探針優(yōu)勢(shì)在于對(duì)制備樣品的要求不高,可以通過延長(zhǎng)曝光時(shí)間加強(qiáng)信號(hào)強(qiáng)度,故較靈敏。缺點(diǎn)是探針不穩(wěn)定、自顯影時(shí)間長(zhǎng)、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè),公司自有實(shí)驗(yàn)室,歡迎考察。重慶哪家做病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè)
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色肌肉組織染色1.橫紋肌組織染色Mallory磷鎢酸蘇木精染色法(PTAH)藍(lán)色:胞核、纖維、肌肉、神經(jīng)膠質(zhì)纖維、纖維蛋白、橫紋肌黃色或枚紅色:膠原纖維、網(wǎng)狀纖維軟骨基質(zhì)、骨微紫色:粗彈性纖維(有時(shí))紫藍(lán)色或棕黃色:缺血缺氧早期病變的心肌2.早期心肌病變組織染色(1)Nagar-Olsen染色法(1974年)紅色:缺氧心肌、紅細(xì)胞黃色或黃棕色:正常心肌藍(lán)色:細(xì)胞核(2)Poley顯示缺氧心肌染色法(1964年)紅色:缺氧心肌紫色:胞核綠色:其他組織南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。重慶哪家做病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè)病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè),一站式生物病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè)平臺(tái)。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色免疫組化染色的分類:1)按標(biāo)記物質(zhì)的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標(biāo)法和免疫金銀法等。2)按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。3)按結(jié)合方式可分為抗原-抗體結(jié)合,如過氧化物酶-抗過氧化物酶(***)法;親和連接,如卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中SP法是比較常用的方法;聚合物鏈接,如即用型二步法,此方法尤其適合于內(nèi)源性生物素含量高的組織抗原檢測(cè)。
病理實(shí)驗(yàn)外包組織切片包含以下服務(wù):1.石蠟包埋及切片:石蠟切片(paraffinsection)的基本原理是用固定劑石蠟固定組織、細(xì)胞以及各種亞細(xì)胞器,保持組織微細(xì)結(jié)構(gòu),制成薄片,并用不同的染色方法增加各部分色差,在顯微鏡下觀察組織、細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),或利用化學(xué)或物理方法顯示組織、細(xì)胞內(nèi)的某些化學(xué)成分,并可進(jìn)行形態(tài)和化學(xué)成分的定量分析。2.冰凍包埋及切片:冰凍切片(frozensection)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進(jìn)行切片的方法,能夠較完好地保存細(xì)胞膜表面和細(xì)胞內(nèi)多種酶活性以及抗原免疫活性。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡(jiǎn)便,而多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè),醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn),動(dòng)物模型構(gòu)建。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹TUNEL染色:基因組DNA斷裂時(shí),暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上熒光素(FITC)標(biāo)記的dUTP(fluorescein-dUTP),從而可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè),這就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理。實(shí)驗(yàn)步驟使細(xì)胞或組織貼在載玻片上?固定?洗滌?通透?洗滌?預(yù)平衡?用熒光素12-dUTP標(biāo)記斷裂的DNA鏈?終止反應(yīng)?洗滌?封片?分析樣品南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè),免疫熒光染色,醫(yī)學(xué)科研實(shí)驗(yàn)服務(wù)。重慶哪家做病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè)
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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色切片常見問題及解決方法:1.切片粘在切片刀不易取下●原因:切片時(shí)有靜電作用,產(chǎn)生靜電吸引,在冬季或氣候干燥時(shí)常出現(xiàn)這種情況?!窠鉀Q方法:可用加濕器。以增加空氣中的水分,而減少靜電作用。2.切片厚薄不均●原因:①切片微動(dòng)部分失靈,齒輪跳格。②蠟塊太大,過硬,轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)刀刃受震動(dòng)?!窠鉀Q方法:①修理切片機(jī)失靈的部分,調(diào)整螺旋。加機(jī)油潤(rùn)滑零件,必要時(shí)需請(qǐng)專業(yè)技術(shù)人員調(diào)整切片機(jī)。②如蠟塊過大,以后取材時(shí)注意取材的大小。蠟塊組織過硬,可返回水中浸泡,再重新脫水和包埋。重慶哪家做病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè)
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