HE染色細(xì)胞漿染色原理：細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系，當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí)，胞漿對(duì)外不顯電性，此時(shí)酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí)，大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值，表現(xiàn)酸性電離，而帶負(fù)電荷的陰離子，可被帶正電荷的染料染色，現(xiàn)時(shí)胞核也被染色，核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽(yáng)離子），就可被帶負(fù)電荷（陰離子）的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷（陽(yáng)離子）結(jié)合而使細(xì)胞漿染色，細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織，嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比。HE染色注意事項(xiàng)以及常規(guī)的流程解析。海南值得信賴(lài)的HE染色分析

HE染色反藍(lán)的原理：蘇木素染液，細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條鏈上的磷酸基向外，帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。 分化：蘇木素染色之后，用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液，但是在細(xì)胞核中結(jié)合過(guò)多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去，才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明，把這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使色素與組織解離，分化不可過(guò)度。藍(lán)化：分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，而呈藍(lán)色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色，稱(chēng)藍(lán)化作用，一般多用自來(lái)水浸洗即可變藍(lán)，也可用溫水（50度溫水比較好）變藍(lán)。西藏比較好的HE染色報(bào)告HE染色需要哪些材料及實(shí)驗(yàn)步驟。

HE染色細(xì)胞核灰藍(lán)原因：（1）組織處理溫度過(guò)高、過(guò)熱，在石蠟停留的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；（2）固定時(shí)間太短，接下來(lái)就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對(duì)策：理論上來(lái)說(shuō)，加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用，組織不能在熱的蠟液中停留過(guò)長(zhǎng)時(shí)間。如果由于某些原因不能進(jìn)行下步包埋處理，完成浸蠟處理后的組織，可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中，冷卻凝固，以備包埋。待需要包埋時(shí)再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好，脫水比較好能從低濃度的乙醇開(kāi)始。

HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理，樣品處理：a.對(duì)于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘;無(wú)水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對(duì)于冰凍切片：蒸餾水2分鐘。c對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對(duì)于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。浸自來(lái)水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。此時(shí)，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。HE染色過(guò)程中常見(jiàn)的問(wèn)題以及應(yīng)對(duì)方法。

HE染色切片中出現(xiàn)類(lèi)似色素樣的點(diǎn)狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因：切片封片前放置在空氣中時(shí)間太長(zhǎng)，以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對(duì)策：移去組織切片上的蓋玻片和封固劑，重新處理。將切片水洗數(shù)分鐘，然后重新脫水、透明、封固。封片過(guò)程中要保持組織切片的輕度濕潤(rùn)，盡量不要讓其干燥。細(xì)胞核呈紅、棕色改變?cè)颍禾K木精染色液過(guò)度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍(lán)不足。對(duì)策：首先，每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力，發(fā)現(xiàn)氧化過(guò)度應(yīng)及時(shí)更換。其次，可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等，在蘇木精染色后，給切片以足夠的藍(lán)化時(shí)間。HE染色中固定液如何配置。福建質(zhì)量好的HE染色

常用HE染色試劑配制方法。海南值得信賴(lài)的HE染色分析

HE染色法，。蘇木精染液為堿 ，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ；伊紅為酸染料 ，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。而線(xiàn)粒體用HE染色不可見(jiàn)，活細(xì)胞通常要求活細(xì)胞近似無(wú)色線(xiàn)粒體需要用健那綠來(lái)染色，再在高倍鏡下觀察。從人或動(dòng)物新鮮尸體上取下塊（一般厚度不超過(guò)0.5厘米）投入預(yù)先配好的固定液中（10%福爾馬林，Bouin氏固定液等）使、細(xì)胞的蛋白質(zhì)變凝固，以防止細(xì)胞后的自溶或細(xì)菌的分解，從而保持細(xì)胞本來(lái)的形態(tài)結(jié)構(gòu)。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑，逐漸脫去塊中的水份。再將塊置于既溶于酒精，又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明，以二甲苯替換出塊的中酒精，才能浸蠟包埋。海南值得信賴(lài)的HE染色分析