Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大腸桿菌表達(dá)重組腸激酶(不帶標(biāo)簽)注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品所講述的緩沖體系需要自行配置。2.不建議37℃條件下酶切,可能會(huì)有非特異性酶切出現(xiàn)。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切會(huì)受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,為獲得理想的酶切結(jié)果,請先將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中,然后再進(jìn)行酶切實(shí)驗(yàn);若不方便透析,可將樣品稀釋到咪唑含量在100mM以下,NaCl濃度在50mM以下,甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切,酶的用量與蛋白比例不變;若干擾因素很多,且不便去除,需要適當(dāng)增加酶量或延長酶切時(shí)間,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸鹽對Enterokinase有很強(qiáng)的抑制作用,痕量的磷酸鹽都會(huì)嚴(yán)重影響Enterokinase的活性,因此在酶切體系內(nèi)不能存在磷酸鹽。5.本品是具有高酶活力重組腸激酶,切割蛋白使用量少,可不考慮除去。后續(xù)如需去除重組腸激酶,可用陰離子交換樹脂(如DEAE-FF)對其進(jìn)行洗脫。推薦洗脫條件如下:平衡緩沖液:25mMTris-HClpH8.0洗脫緩沖液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可適當(dāng)增加酶量,或適當(dāng)延長酶切時(shí)間??缒さ鞍椎目缒^(qū)域的相互作用是連接膜外環(huán)境與細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的重要渠道。Recombinant Canine PKA/PRKACA Protein,His Tag
PreScissionProtease是一種由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease)和GST組成的融合蛋白。該蛋白酶可在低溫下(4°C)特異識(shí)別短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸殘基之間進(jìn)行酶切。底物的識(shí)別和切割不僅依賴于融合蛋白的一級結(jié)構(gòu)還依賴于融合蛋白的二級和三級結(jié)構(gòu)。它可以特異性的將pGEX-6P系列等載體表達(dá)出的帶有酶底物識(shí)別多肽序列融合蛋白的GST標(biāo)簽進(jìn)行分離。本品由大腸桿菌中重組表達(dá),以無菌液體形式提供。產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(ChineseSynonym)重組Prescission蛋白酶英文別名(EnglishSynonym)3Cprotease,Picornain3C,PSP來源(Source)大腸桿菌表達(dá)分子量(MolecularWeight)約46kDa物理外觀(PhysicalAppearance)無菌無色液體儲(chǔ)存緩沖液(StorageBuffer)25mMTris-HCl(pH8.0),150mMNaCl,1mMEDTA,5mMDTT,50%(V/V)GlycerinInsB 9-23全長A2aR蛋白具有天然完整構(gòu)象,VLP(病毒樣顆粒)固有特征可以帶來更高的免疫原性。
表達(dá)與純化:重組抑肽酶在大腸桿菌中得到了高效表達(dá),并通過純化過程獲得了純度達(dá)到95%以上的產(chǎn)品。活性驗(yàn)證:重組抑肽酶展現(xiàn)出與天然抑肽酶相似的酶學(xué)性質(zhì),能夠有效抑制胰蛋白酶的活性。穩(wěn)定性測試:重組抑肽酶在推薦的儲(chǔ)存條件下(-20oC至2-8oC)具有長達(dá)24個(gè)月的穩(wěn)定性。討論生產(chǎn)優(yōu)勢:大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)具有成本低、表達(dá)速度快、易于擴(kuò)大生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。此外,重組抑肽酶無動(dòng)物源性,減少了病毒污染的風(fēng)險(xiǎn),提高了產(chǎn)品的安全性。科研應(yīng)用:重組抑肽酶可廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域,如蛋白純化、細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)等,提供了一種穩(wěn)定且可靠的實(shí)驗(yàn)工具。工業(yè)生產(chǎn):在工業(yè)生產(chǎn)中,重組抑肽酶可用于重組蛋白藥物的生產(chǎn)過程中,防止蛋白酶降解,提高產(chǎn)品純度和產(chǎn)量。結(jié)論大腸桿菌表達(dá)的重組抑肽酶具有高純度、高活性和良好的穩(wěn)定性,是一種理想的科研和工業(yè)用蛋白酶抑制劑。其無動(dòng)物源性和高生產(chǎn)效率的特點(diǎn),為生物技術(shù)領(lǐng)域提供了一種安全、經(jīng)濟(jì)的替代品。
CD30活性艾利莎數(shù)據(jù):固定化抗CD30抗體,板上的氫氟碳化合物標(biāo)記為0.5歐氏/毫升(100歐氏/井)。生物化人CD30的劑量反應(yīng)曲線,以49ng/ml的EC50作為標(biāo)記。艾麗莎數(shù)據(jù):固定了人的CD30配體,他的標(biāo)簽在板上5g/ml(100ml/井)。用酶聯(lián)免疫吸附法測定人CD30的劑量反應(yīng)曲線,標(biāo)記為27.1ng/ml的EC50。產(chǎn)品用Lal法測定每一種蛋白質(zhì)。制劑在PBS(PPS)中用0.22離子過濾溶液凍干(PH7.4)。通常在凍干前添加5%海藻糖作為保護(hù)劑。復(fù)溶離心管打開前。建議重組到超過100克/毫升的濃度(凍干通常使用1毫克/毫升溶液)。在蒸餾水中溶解凍干蛋白。運(yùn)輸與保存方法冰袋運(yùn)輸。-20℃至-80℃保存,一年有效期。復(fù)溶后,-20至-80°C,在未開封狀態(tài)下保存3-6個(gè)月。復(fù)溶后,2-8°C保存2-7天。建議使用時(shí)分裝凍存,避免反復(fù)凍融。注意事項(xiàng)1.避免反復(fù)凍融。2.為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。3.本產(chǎn)品作科研用途!產(chǎn)品數(shù)據(jù)通過使用PNGase F去除糖蛋白上的糖鏈,可以確定蛋白質(zhì)是否發(fā)生糖基化,以及糖基化位點(diǎn)。
N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定義(UnitDefinition)1個(gè)酶活力單位指在10μL的反應(yīng)體系中,37℃條件下1小時(shí)從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。儲(chǔ)存條件-15~-25℃保存,有效期1年。使用說明變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;3)加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去離子水,總反應(yīng)體積20μL;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg)至體積為20μL。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加PNGaseF的量和延長孵育時(shí)間。在蛋白質(zhì)表達(dá)體系中,腸激酶常用于切割融合標(biāo)簽,從而釋放出目的蛋白,特別是在pET表達(dá)系統(tǒng)中。Recombinant Mouse DR6/TNFRSF21 Protein,His Tag
GPCR家族是一類存在于生物體中的跨膜蛋白,它們可以識(shí)別并與外界分子相互作用,引發(fā)各種細(xì)胞內(nèi)信號。Recombinant Canine PKA/PRKACA Protein,His Tag
牛纖維蛋白原(Bovine Fibrinogen, BFg)作為一種多功能的凝血蛋白,在血液凝固和傷口愈合過程中扮演著關(guān)鍵角色。本綜述旨在探討牛纖維蛋白原的分子結(jié)構(gòu)、生物學(xué)功能以及其在生物醫(yī)學(xué)研究中的潛在應(yīng)用。引言纖維蛋白原是血液中的一種重要糖蛋白,它參與血液凝固的階段,通過轉(zhuǎn)化為纖維蛋白來形成穩(wěn)定的血栓。牛纖維蛋白原因其與人類纖維蛋白原的高同源性,常被用作研究模型,以深入理解纖維蛋白原的功能及其在疾病中的作用。材料與方法蛋白提取與純化:從牛血中提取纖維蛋白原,并通過多次沉淀和層析技術(shù)進(jìn)行純化。分子結(jié)構(gòu)分析:利用質(zhì)譜、X射線晶體學(xué)等技術(shù)解析牛纖維蛋白原的分子結(jié)構(gòu)。功能研究:通過體外實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物模型研究牛纖維蛋白原在血液凝固和細(xì)胞黏附中的作用。Recombinant Canine PKA/PRKACA Protein,His Tag
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,...