重組型TEV蛋白酶(rTEV)是經(jīng)過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶,不僅保持天然TEV酶的功能活性,且在廣譜的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出更強(qiáng)的穩(wěn)定性和特異性。rTEV是一種用來切除融合蛋白上親和標(biāo)簽的常用工具酶,具有很強(qiáng)的位點(diǎn)特異性,嚴(yán)格識(shí)別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位點(diǎn)在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間。普遍應(yīng)用的七氨基酸序列為:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0,30℃時(shí)可達(dá)活性,但在pH6.0-8.5和溫度4-30℃范圍內(nèi)皆有活性(見表1),使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而靈活變動(dòng)。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His標(biāo)簽,通過Ni-NTA樹脂去除,以達(dá)到純化目的蛋白的目的。產(chǎn)品性質(zhì)來源(Source)大腸桿菌外觀(Appearance)無色透明液體比活力(SpecificActivity)5U/μL活性定義(UnitDefinition)在1×rTEVBuffer(50mMTris,pH8.0,0.1mMEDTA,1mMDTT)中,30℃反應(yīng)1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。純化(Purification)Ni柱親和純化純度(Purity)≥95%(bySDS-PAGE)產(chǎn)品組分運(yùn)輸與保存方法冰袋運(yùn)輸。透明質(zhì)酸(Hyaluronic Acid,簡稱HA)是一種存在于人體和動(dòng)物組織中的天然高分子多糖,稱為糖醛酸或玻尿酸。Recombinant Human SLAMF7/CRACC/CD319(hFc Tag)
PreScissionProtease是一種由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease)和GST組成的融合蛋白。該蛋白酶可在低溫下(4°C)特異識(shí)別短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸殘基之間進(jìn)行酶切。底物的識(shí)別和切割不僅依賴于融合蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)還依賴于融合蛋白的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。它可以特異性的將pGEX-6P系列等載體表達(dá)出的帶有酶底物識(shí)別多肽序列融合蛋白的GST標(biāo)簽進(jìn)行分離。本品由大腸桿菌中重組表達(dá),以無菌液體形式提供。產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(ChineseSynonym)重組Prescission蛋白酶英文別名(EnglishSynonym)3Cprotease,Picornain3C,PSP來源(Source)大腸桿菌表達(dá)分子量(MolecularWeight)約46kDa物理外觀(PhysicalAppearance)無菌無色液體儲(chǔ)存緩沖液(StorageBuffer)25mMTris-HCl(pH8.0),150mMNaCl,1mMEDTA,5mMDTT,50%(V/V)GlycerinRecombinant Rat CT-1研究泛素-蛋白酶體途徑:重組人泛素可用于研究泛素化修飾和蛋白降解過程。
胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶,可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組胰蛋白酶多用大腸桿菌或酵母系統(tǒng)重組表達(dá)并經(jīng)過多步層析純化獲得,無糜蛋白酶等雜酶污染。重組胰蛋白酶與天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性,其氨基酸序列與豬源胰蛋白酶序列同源。因其無動(dòng)物源污染性和純度高,在醫(yī)藥開發(fā)、生化研究、蛋白組學(xué)等領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。翌圣目前可提供2款重組胰蛋白酶,分別為藥典級(jí)(Cat#40512ES)、質(zhì)譜級(jí)(Cat#20416ES)藥典級(jí):大腸桿菌表達(dá)的重組胰蛋白酶,氨基酸序列與豬胰腺來源的胰蛋白酶完全一致,生產(chǎn)過程不使用任何動(dòng)物源原料,無外源性的病毒污染,可替代豬胰腺來源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過程中,如:細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞發(fā)酵、蛋白質(zhì)的酶解或各種組織的細(xì)胞分離等。本產(chǎn)品純度高、不含雜酶、宿主蛋白和DNA殘留量符合藥典標(biāo)準(zhǔn),避免了雜質(zhì)對(duì)細(xì)胞生長的影響,pH為7.0-9.0,穩(wěn)定pH為2±0.5。質(zhì)譜級(jí):畢赤酵母表達(dá)的重組豬胰蛋白酶,在GMP法規(guī)下生產(chǎn),不含任何動(dòng)物源成分,無動(dòng)物源性的病毒污染,天然缺乏糜蛋白酶活性,并已過濾除菌。
Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大腸桿菌表達(dá)重組腸激酶(不帶標(biāo)簽)注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品所講述的緩沖體系需要自行配置。2.不建議37℃條件下酶切,可能會(huì)有非特異性酶切出現(xiàn)。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切會(huì)受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,為獲得理想的酶切結(jié)果,請先將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中,然后再進(jìn)行酶切實(shí)驗(yàn);若不方便透析,可將樣品稀釋到咪唑含量在100mM以下,NaCl濃度在50mM以下,甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切,酶的用量與蛋白比例不變;若干擾因素很多,且不便去除,需要適當(dāng)增加酶量或延長酶切時(shí)間,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸鹽對(duì)Enterokinase有很強(qiáng)的抑制作用,痕量的磷酸鹽都會(huì)嚴(yán)重影響Enterokinase的活性,因此在酶切體系內(nèi)不能存在磷酸鹽。5.本品是具有高酶活力重組腸激酶,切割蛋白使用量少,可不考慮除去。后續(xù)如需去除重組腸激酶,可用陰離子交換樹脂(如DEAE-FF)對(duì)其進(jìn)行洗脫。推薦洗脫條件如下:平衡緩沖液:25mMTris-HClpH8.0洗脫緩沖液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可適當(dāng)增加酶量,或適當(dāng)延長酶切時(shí)間。泛素蛋白在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮著調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)降解的作用,通過泛素-蛋白酶體途徑標(biāo)記蛋白質(zhì),被蛋白酶體識(shí)別并降解。
3C蛋白酶(3C Protease),也稱為3Cpro或3C樣蛋白酶(3CLpro),是一類在RNA病毒復(fù)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用的酶。它們負(fù)責(zé)切割病毒的多聚蛋白前體,從而釋放出成熟的病毒蛋白,這些蛋白對(duì)于病毒的復(fù)制和組裝至關(guān)重要。3C蛋白酶在多種病毒中都有發(fā)現(xiàn),包括冠狀病毒、小RNA病毒等。結(jié)構(gòu)與功能3C蛋白酶通常具有特定的酶切位點(diǎn),能夠識(shí)別并切割特定的氨基酸序列。例如,小RNA病毒科的3C蛋白酶識(shí)別位點(diǎn)為Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro,切割位點(diǎn)位于谷氨酰胺(Gln)和甘氨酸(Gly)之間,稱為Q-G位點(diǎn)4。抗病毒藥物開發(fā)3C蛋白酶因其在病毒生命周期中的關(guān)鍵作用,成為抗病毒藥物開發(fā)的重要靶點(diǎn)。通過抑制3C蛋白酶的活性,可以有效阻斷病毒的復(fù)制過程。例如,SARS-CoV-2(病毒)的3CLpro是抗冠狀病毒藥物的重要靶點(diǎn),西湖大學(xué)胡奇團(tuán)隊(duì)等合作揭示了SARS-CoV-2 3CLpro潛在耐藥機(jī)制,為解決潛在的耐藥問題提供了重要信息3。耐藥性研究隨著3CLpro抑制劑的使用,其耐藥問題也日益受到關(guān)注。研究表明,3CLpro的某些突變可能導(dǎo)致病毒對(duì)抑制劑產(chǎn)生耐藥性。GPCR家族是一類存在于生物體中的跨膜蛋白,它們可以識(shí)別并與外界分子相互作用,引發(fā)各種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)。Recombinant Human Galectin-3 Protein
腸激酶作為研究工具,用于探索蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)-功能關(guān)系,以及在蛋白質(zhì)工程中進(jìn)行蛋白質(zhì)的定點(diǎn)突變。Recombinant Human SLAMF7/CRACC/CD319(hFc Tag)
糖苷內(nèi)切酶H是一種重組糖苷酶,能夠?qū)-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖結(jié)構(gòu)進(jìn)行切割,去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖。糖苷內(nèi)切酶H克隆自褶皺鏈霉菌(Streptomycesplicatus)。并在酵母中重組表達(dá)。本產(chǎn)品帶his標(biāo)簽,常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白完全去糖基化。另外,我司還提供其他類型的糖苷酶,包括糖苷內(nèi)切酶S(Cat#20413ES),酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F(比活性:100000U/mL)。儲(chǔ)存條件-15~-25℃保存,有效期1年。使用說明變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;3)加入2μL的Buffer2,8μL去離子水,總反應(yīng)體積20μL;4)加入1-2μL的EndoH,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。5)65℃下熱失活10分鐘。非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg)至終體積為20μL。2)加入2~5μL的EndoH,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加EndoH的量和延長孵育時(shí)間。Recombinant Human SLAMF7/CRACC/CD319(hFc Tag)
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,...