Genovis的FucosEXO 是 α-巖藻糖苷酶的混合物,用于有效水解天然 N-和 O-糖基化蛋白或游離寡糖上的 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接巖藻糖殘基。它是 N-和 O-糖蛋白的聚糖結(jié)構(gòu)分析以及寡糖的外切糖苷酶陣列的寶貴工具。1. 高效α-巖藻糖苷酶混合物 – 快速去除 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接的巖藻糖;2. 可靠的酶解增加了對(duì)外切糖苷酶陣列的信心;3. 可固定在即用型離心柱中。用于糖蛋白去氟糖基化的凍干酶。Genovis的FucosEXO凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在2000單位的小瓶中,用于2mg糖蛋白的去碳基化。ImpaRATOR 是一種 O-糖依賴性蛋白酶,可消化攜帶粘蛋白型O-聚糖的蛋白。四川固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶
該酶適用于在釋放的聚糖結(jié)構(gòu)上修剪半乳糖,用于外切糖苷酶陣列,或用于生成具有均相 G0/G0F 聚糖譜的抗體。1. 高效β-半乳糖苷酶混合物 – 快速去除末端 β1-3 和 β1-4-連接的半乳糖;2. 有助于在亞基水平上識(shí)別糖基化修飾;3. 可固定在即用型離心柱中。Genovis的GalactEXO是一種外切糖苷酶,含有β-半乳糖苷酶的混合物,可有效去除N-和O-糖基化蛋白或寡糖上的半乳糖殘基。該混合物由兩種半乳糖苷酶組成,可高效水解 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖酶。GalactEXO在天然條件下水解糖蛋白,并在5.5至7.5的寬pH值范圍內(nèi)顯示活性。遼寧凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究ImpaRATOR? 可用于多種 O-聚糖結(jié)構(gòu)表征。
α連接的Genovis的GalNAcs的水解:GalNAcEXO 是一種 α-N-乙酰半乳糖胺苷酶,可有效水解糖蛋白上的末端 GalNAc 殘基。與絲氨酸或蘇氨酸連接的 GalNAc(稱為 Tn 抗原)被 GalNAcEXO 快速有效地水解,并且該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAcs 上顯示出活性。Genovis的GalNAcEXO 是一種外α-N-乙酰半乳糖胺酶,用于有效水解與糖蛋白(Tn 抗原)中的絲氨酸或蘇氨酸殘基相連的 α-N-乙酰半乳糖胺 (GalNAc)。該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAc 上顯示活性。GalNAcEXO 在天然條件下水解糖蛋白上的 GalNAc,在 pH 值 6.0 至 7.6 范圍內(nèi)具有高度活性。
糖蛋白性能測(cè)試:O-聚糖的巖藻糖基化參與功能上重要的聚糖表位的合成,例如血型抗原和劉易斯結(jié)構(gòu)。分析用這種復(fù)雜的聚糖結(jié)構(gòu)修飾的糖蛋白可能具有挑戰(zhàn)性,需要高效和特異性的酶工具。我們?cè)谠S多糖基工程TNFR蛋白上測(cè)試了Genovis的FucosEXO,這些蛋白攜帶多達(dá)11個(gè)O-聚糖,這些O-聚糖以不同的鍵裝飾。我們將該活性與其他市售巖藻苷酶進(jìn)行了比較。FucosEXO 能夠在 1 小時(shí)內(nèi)對(duì)所有三種 TNFR 蛋白進(jìn)行去巖藻糖磺酸處理,而用其他巖藻糖酶處理導(dǎo)致部分去除巖藻糖或根本沒有去除。應(yīng)用:降低樣品復(fù)雜性、電荷異構(gòu)體分析和外切糖苷酶陣列。
使用Genovis的GalNAcEXO 對(duì) O-糖基化生物制藥進(jìn)行 Tn 抗原表征:未成熟的截短O-聚糖導(dǎo)致了復(fù)雜生物制藥的異質(zhì)性,使其分析更具挑戰(zhàn)性。 O-聚糖的he心由n-α-GalNAc殘基組成,通過糖苷鍵與絲氨酸或蘇氨酸連接,稱為Tn抗原。 現(xiàn)在,使用GalNAcEXO可以采用合適的酶策略來去除這些GalNAc并簡(jiǎn)化生物制藥的表征。在質(zhì)譜圖中可以觀察到重復(fù)峰的模式。其次,在與GalNAcEXO酶孵育后,剩余的GalNAc殘基被完全去除,留下一個(gè)峰。因此,該工作流程確認(rèn)了 O-糖基化生物制藥上存在 Tn 抗原,并允許定量he心 GalNAc 水平。這種工作流程的另一個(gè)好處是減少了剩余的異質(zhì)性,這有助于確認(rèn)蛋白質(zhì)的完整質(zhì)量,并揭示截短的片段。依那西普和曲妥珠單抗游離聚糖。福建高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶
SialEXO是用于去除和分析唾液酸的唾液酸酶;四川固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶
Genovis的SialEXO產(chǎn)品是用于去除和分析唾液酸的唾液酸酶。這些酶對(duì)天然糖蛋白或游離的聚糖結(jié)構(gòu)上存在的 N- 和 O-連接聚糖均具有活性。SialEXO用于在用OpeRATOR或OglyZOR消化之前預(yù)處理O-糖基化蛋白。其他應(yīng)用包括降低樣品復(fù)雜性、電荷異構(gòu)體分析和外切糖苷酶陣列。N-連接、O-連接和游離聚糖的高效去唾液酸化快速去除唾液酸,增強(qiáng)對(duì)蛋白質(zhì)電荷變體的分析可固定在即用型離心柱中。然后可以用FabRICATOR消化所得的去糖基化蛋白,并通過中級(jí)質(zhì)譜分析。我們將該工作流程應(yīng)用于依那西普的分析,雖然未經(jīng)處理的TNFR結(jié)構(gòu)域過于復(fù)雜而無法分析,但O-聚糖組成可以在用PNGase F處理后進(jìn)行分離和比較。四川固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶
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