genvois的OpeRATOR 是一種內(nèi)切蛋白酶,可催化直接靠近 O-聚糖的天然粘蛋白型 O-糖基化蛋白的肽鍵的水解。內(nèi)切蛋白酶具有高特異性,可消化絲氨酸或蘇氨酸殘基的O-聚糖N端的蛋白質(zhì)。 OpeRATOR 活性需要粘蛋白型的 O-聚糖,并且該酶不會(huì)用 N-連接聚糖消化糖蛋白。該酶對(duì)具有亞洲化he心1 O-聚糖的位點(diǎn)z活躍。它還消化唾液酸化的he心 1 和he心 3,但程度要低得多。為了獲得z佳性能,需要去除唾液酸,因此,SialEXO凍干(唾液酸酶混合物)包含在購買中。 在大腸桿菌中表達(dá),帶有His標(biāo)簽,分子量為52 kDa。浙江高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究
Genvis測(cè)試去除唾液酸以揭示電荷變體:唾液酸是帶負(fù)電荷的糖殘基,存在于 N- 和 O-連接的聚糖上。唾液酸的固有電荷可能會(huì)使分析工作流程復(fù)雜化,從而掩蓋其他重要的修飾。Microspin 色譜柱可用于 2 x 0.5 mg、5 x 0.5 mg 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. 樣品中不含酶。因此,唾液酸的去除有助于研究蛋白質(zhì)中的潛在變體。該應(yīng)用展示了一種快速簡便的樣品制備方法,可在電荷異構(gòu)體分析之前去除所有唾液酸。河北瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis使用 GalNAcEXO 對(duì) O-糖基化生物制藥進(jìn)行 Tn 抗原表征。
OglyZOR 來源于口腔鏈球菌,在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有 His 標(biāo)簽,分子量為 227 kDa。SialEXO來源于Akkermansia muciniphila,在大腸桿菌中表達(dá)。SialEXO酶含有His標(biāo)簽,組分的分子量分別為42 kDa和66 kDa。1.高效O-糖苷酶;2. 降低樣品異質(zhì)性,揭示潛在的關(guān)鍵蛋白質(zhì)修飾;3. 完全、穩(wěn)健地去除 O-糖he心 1 二糖。Genovis的凍干酶,用于水解糖蛋白上的he心1 O-聚糖。OglyZOR 凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在 2000 個(gè)單位的小瓶中,用于在 2 mg 糖蛋白上水解he心 1 O-聚糖。它需要去除唾液酸助劑才能發(fā)揮作用,因此與2000單位的SialEXO凍干一起提供。
GalNAcEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的GalNAcEXO酶,用于水解糖蛋白上的GalNAc殘基,而不會(huì)用酶污染制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. 終樣品中不含酶。用于水解離心柱中糖蛋白上的Genovis的GalNAc殘基的固定化酶。GalNAcEXO 酶是一種n 外α-N-乙酰半乳糖氨酸酶,可快速有效地水解來自天然 O-糖蛋白的 z es GalNAc 殘基。 該酶來源于Akkermansia muciniphila,在大腸桿菌中表達(dá),帶有His標(biāo)簽,分子量為52 kDa。 該酶在 Tn 抗原和 α1-3 連接末端 GalNAcs 上均顯示活性。在這里,我們展示了如何使用GalNAcEXO來表征復(fù)雜的生物制藥。而用其他巖藻糖酶處理部分去除巖藻糖或根本沒有去除。
與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR用于攜帶N-和簡單O-糖的糖蛋白的去糖基化。 OmniGLYZOR 試劑盒包括:OmniGlyZOR 微離心柱;PNGase F 凍干;RapiGest?* SF表面活性劑。除非底物蛋白變性,否則某些 N-糖基化位點(diǎn)很難或無法被 PNGase F 接近。在OmniGLYZOR Microspin柱上孵育后剩余的N-糖可以在變性條件下使用試劑盒中包含的PNGase F凍干和RapiGest? SF表面活性劑通過額外的去糖基化步驟去除。使用Genovis的OpeRAT對(duì)EPO進(jìn)行O-糖位點(diǎn)特異性消化:對(duì)于jin攜帶一個(gè)或幾個(gè) O-糖基化位點(diǎn)的簡單底物蛋白,OpeRATOR 也可用于繪制中間水平的 O-糖基化位點(diǎn)。 ImpaRATOR 凍干劑以凍干粉末的形式提供,裝在 2000 單位小瓶中,用于消化 2 mg O-糖基化蛋白。河南瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究
現(xiàn)O-糖基化藥有Tn抗原,定量he心 GalNAc 水平,減少了異質(zhì)性。浙江高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究
Genovis的GlycOCATCH?是一種親和樹脂,可特異性結(jié)合O-糖基化(粘蛋白型)蛋白和肽,從而實(shí)現(xiàn)簡單的工作流程,以富集和純化攜帶O-聚糖的蛋白質(zhì)和肽。洗滌離心柱,并用8M尿素洗脫結(jié)合的蛋白質(zhì)。對(duì)洗脫材料的分析表明,由于洗脫O-糖基化蛋白,并且樹脂與非糖基化蛋白和N-糖基化蛋白的結(jié)合可以忽略不計(jì)。選擇性結(jié)合 O-糖蛋白:為了測(cè)試選擇性,將一系列 O-糖基化、N-糖基化和非糖基化蛋白與Genovis的GlycOCATCH 一起孵育。為了在肽水平上研究Genvois的GlycOCATCH的O-糖特異性,將O-glcyosyled肽(糖蛋白)與一系列未修飾的肽混合。浙江高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究
糖蛋白性能測(cè)試:O-聚糖的巖藻糖基化參與功能上重要的聚糖表位的合成,例如血型抗原和劉易斯結(jié)構(gòu)。分析用...
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