外泌體能攜帶多種生物活性分子循環(huán)于血液/體液中并介導(dǎo)長距離的細(xì)胞間通訊,中流來源外泌體富含的蛋白質(zhì)、核苷酸、脂質(zhì)等分子能夠反映其來源細(xì)胞的生理及病理狀態(tài),外泌體特殊的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)能保護(hù)其內(nèi)RNA等分子免于降解,因此,檢測中流外泌體成為液體活檢一個(gè)明顯優(yōu)勢。臨床試驗(yàn)研究表明,外泌體在多種疾病的早期診斷、療效和預(yù)后監(jiān)測等方面都具備較好的應(yīng)用價(jià)值,正逐漸成為臨床診療中新的、理想的生物標(biāo)志物和可能的靶向藥物載體。隨著技術(shù)的進(jìn)步,組學(xué)時(shí)代的到來,大規(guī)模蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)被聯(lián)合應(yīng)用于篩選和揭示多種ai癥細(xì)胞外囊泡的標(biāo)志物。外泌體是細(xì)胞在特定條件下分泌的小囊泡,是細(xì)胞間傳遞信號(hào),相互溝通和影響的重要工具。體液外泌體Dir
要使外泌體在臨床上得以更加廣fan的應(yīng)用,仍然需要更加深入的研究:(1)外泌體的提純方式主要是超速離心,這種提純方式效率較低,耗費(fèi)時(shí)間長并且相對昂貴,并不適宜在臨床上應(yīng)用。(2)外泌體雖然具有一定的靶向性,但這種靶向性較弱,不足以解決中流的靶向zhiliao問題。通過在外泌體表面表達(dá)特異性肽的方法可以為上述問題的解決提供較為有效的途徑。(3)在外泌體的載藥fang式方面,現(xiàn)在常用的電穿孔法雖更具優(yōu)勢,但往往會(huì)對外泌體或藥物的完整性產(chǎn)生影響,轉(zhuǎn)染外泌體法不能保證基因類藥物全部進(jìn)入外泌體內(nèi)而不是粘附在外泌體表面,存在著安全隱患。(4)外泌體作為細(xì)胞分泌物質(zhì),其本身可調(diào)性并不如脂質(zhì)體以及聚合物基藥物載體。干細(xì)胞外泌體示蹤干細(xì)胞外泌體對多種類型的免疫細(xì)胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用。
流式細(xì)胞技術(shù)針對外泌體的表面抗原標(biāo)記物進(jìn)行檢測,能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低,所以采用常規(guī)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測時(shí)往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強(qiáng)反射,操作耗時(shí)又費(fèi)力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細(xì)胞儀(HSFCM),將可檢測的外泌體粒徑降至40nm,能夠在不連接beads的情況下實(shí)現(xiàn)每分鐘10000個(gè)外泌體的檢測,并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進(jìn)行外泌體標(biāo)志蛋白質(zhì)的定量檢測,目前該儀器已商品化。
外泌體中包含的mRNAs和miRNAs在進(jìn)入受體細(xì)胞后仍具有翻譯蛋白質(zhì)、促進(jìn)病毒感ran等功能。據(jù)估計(jì),單個(gè)外泌體含有約≤100拷貝數(shù)的蛋白質(zhì)和≤10000拷貝數(shù)的核苷酸。不同細(xì)胞來源的外泌體中既包含與細(xì)胞形成、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)的共有成分,也包含與來源細(xì)胞的生物功能相關(guān)的特異分子。如B淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞來源的外泌體含有大量的主要組織相容性復(fù)合體蛋白質(zhì)MHCclassⅡ和MHCclassⅠ,血小板和T細(xì)胞來源的外泌體則包含諸如血管性血友病因子、穿孔素和顆粒酶等特殊蛋白質(zhì),而ai細(xì)胞來源的外泌體表面可能含有中流特異的蛋白質(zhì)分子。這類特異分子在外泌體介導(dǎo)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、參與生理病理過程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。外泌體的復(fù)雜性,為疾病檢測和監(jiān)測提供了一個(gè)多指標(biāo)的診斷窗口。
外泌體在各種疾病的診斷和治理中的應(yīng)用研究火熱。外泌體的復(fù)雜性,為疾病檢測和監(jiān)測提供了一個(gè)多指標(biāo)的診斷窗口。此外,能夠向病變細(xì)胞輸送功能性物質(zhì)的特性使外泌體有潛力作為基因和藥物遞送的載體。有研究總結(jié)了從外泌體中篩選的生物標(biāo)志物,可用于疾病的診斷、預(yù)后及治理。外泌體在生物液體中寬泛分布,包括血液、尿液、唾液、胸腹水、腦脊液、膽汁、乳汁以及淚液等,其復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物,具有檢測包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力,可以用于對心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測。人體內(nèi)多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,包括干細(xì)胞、免疫細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、及平滑肌細(xì)胞等。外泌體微球
外泌體的異質(zhì)性決定了外泌體藥物遞送系統(tǒng)要根據(jù)所傳遞治理物質(zhì)的類型、目標(biāo)組織的特點(diǎn)等進(jìn)行針對性的調(diào)整。體液外泌體Dir
外泌體富含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸分子,這些分子具有來源細(xì)胞的特異性,所以通過分析中流細(xì)胞所釋放的外泌體分子特征就可部分反映其來源細(xì)胞表型及其生物學(xué)作用?,F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多種中流外泌體來源的蛋白類分子標(biāo)志物。例如,乳腺ai、結(jié)腸ai和胰腺ai中均可檢測到磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(glypican1,GPC1)的表達(dá),且與乳腺ai和結(jié)腸ai相比,GPC1對胰腺ai的早期診斷尤具價(jià)值。前列腺ai患者血漿外泌體中凋亡抑制蛋白的表達(dá)增高則提示與中流進(jìn)展相關(guān)。隨著蛋白組學(xué)技術(shù)的發(fā)展,研究發(fā)現(xiàn)中流患者血液外泌體來源的蛋白標(biāo)志物其診斷特異性和敏感性分別可達(dá)到95%和90%。體液外泌體Dir