出租房里的交互高康张睿篇,亚洲中文字幕一区精品自拍,里番本子库绅士ACG全彩无码,偷天宝鉴在线观看国语版

ArcticZymes Technologies推出了SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶，為生物工藝領(lǐng)域提供了革新性、更高效的方案來解決大規(guī)模生產(chǎn)中核酸殘留問題。此前，受限于鹽濃度和核酸酶活性的負(fù)調(diào)控效應(yīng)，行業(yè)在核酸殘留去除效果和酶成本之間尋找平衡，更多的是讓工藝選擇適應(yīng)酶。此后，行業(yè)可以根據(jù)工藝具體需求而選擇更合適的酶產(chǎn)品，既能達(dá)到理想的去除效果，又能輕松控制酶用量及綜合成本，真正實(shí)現(xiàn)讓酶適應(yīng)工藝選擇。SAN HQ和M-SAN HQ為行業(yè)提供更高效率的解決方案。M-SAN HQ中鹽核酸酶用在生產(chǎn)工藝流程中，在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA。安徽培養(yǎng)基條件中鹽核酸酶...

除了獲得載體的滴度及產(chǎn)量，生產(chǎn)慢病毒更關(guān)心的指標(biāo)主要是各種污染物的去除?？侱NA污染的去除百分比在99.1-99.84%，總蛋白污染物的去除百分比在99.85-99.9%。針對(duì)宿主細(xì)胞的DNA（HCD）及蛋白（HCP），有報(bào)道其去除百分比分別為99.8%和99.4%。因?yàn)椴粌H殘存的DNA可能是個(gè)問題，而且DNA的大小以及由此引起的可能轉(zhuǎn)移整個(gè)有功能的開放閱讀框也是問題，因此監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)殘存DNA污染的分子量上限的要求越來越高。例如，F(xiàn)DA的指南‘生產(chǎn)用于傳染病適應(yīng)癥的病毒疫苗的細(xì)胞基質(zhì)和其他生物材料的特性和鑒定’中說明，殘留的細(xì)胞宿主的DNA片段不能超過一個(gè)功能基因的長度，估計(jì)在200bp左右。...

ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中鹽核酸酶，2021年推出對(duì)應(yīng)的M-SAN HQ ELISA kit。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中M-SAN HQ中鹽核酸酶的殘留含量，特異性的anti-M-SAN作為捕獲抗體偶聯(lián)在孔板上，辣根過氧化酶HRP標(biāo)記anti-M-SAN作為檢測抗體，TMB是檢測反應(yīng)底物。該試劑盒特異識(shí)別M-SAN HQ中鹽核酸酶，對(duì)其它核酸酶沒有特異性結(jié)合。它的定量范圍是0.12-7.5ng/ml；12*8strips的設(shè)計(jì)規(guī)格，使用靈活，更能降低使用成本。致力于從深海microbe中識(shí)別...

在干細(xì)胞醫(yī)治領(lǐng)域， 某些疾病靠單純的細(xì)胞替代并不能取得滿意效果。利用逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒將外源目的基因整合到干細(xì)胞基因組，對(duì)基因功能缺失的遺傳病具有良好療效，但也存在一定致瘤風(fēng)險(xiǎn)。相比之下，CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)能夠精確實(shí)現(xiàn)基因敲入、敲除及堿基修復(fù)。因此， 采用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)對(duì)干細(xì)胞進(jìn)行基因改造，不僅能夠增加干細(xì)胞醫(yī)治的疾病范圍，也能更大程度地保證療效的安全性。目前，CRISPR/Cas9在干細(xì)胞醫(yī)治領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用，同時(shí)更多由CRISPR/Cas9編輯的干細(xì)胞藥物正在開發(fā)中。M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽濃度下具有較高活性，較適合鹽濃度為125-250 m...

一般來說，生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM（BenzonaseTM是Merck的注冊(cè)商標(biāo)）為主，能高效降解任何形式（雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀）的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen，通過E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的適宜反應(yīng)條件是低鹽濃度范圍（

ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中鹽核酸酶，2021年推出對(duì)應(yīng)的M-SAN HQ ELISA kit。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中M-SAN HQ中鹽核酸酶的殘留含量，特異性的anti-M-SAN作為捕獲抗體偶聯(lián)在孔板上，辣根過氧化酶HRP標(biāo)記anti-M-SAN作為檢測抗體，TMB是檢測反應(yīng)底物。該試劑盒特異識(shí)別M-SAN HQ中鹽核酸酶，對(duì)其它核酸酶沒有特異性結(jié)合。它的定量范圍是0.12-7.5ng/ml；12*8strips的設(shè)計(jì)規(guī)格，使用靈活，更能降低使用成本。生理鹽濃度下，M-SAN HQ中...

?通過三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系生產(chǎn)病毒載體，會(huì)引入宿主細(xì)胞DNA殘留（HCD）、蛋白殘留（HCP）、工藝雜質(zhì)（如antibiotics、核酸酶等外源物質(zhì)）等污染，存在潛在的致瘤性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)一般允許生物制品中存在10ng/dose以下的殘留DNA。此外，根據(jù)雜質(zhì)來源、工藝以及產(chǎn)品類型不同，也會(huì)對(duì)HCD限度做不同要求。為了達(dá)到這個(gè)要求，一般通過核酸酶處理和色譜聯(lián)用的方法。一般在細(xì)胞培養(yǎng)液裂解/收獲、澄清收獲及超濾濃縮等環(huán)節(jié)加入核酸酶處理，需要工藝摸索來確認(rèn)處理方式。生理鹽濃度下，M-SAN HQ中鹽核酸酶性能優(yōu)于常用核酸酶。江西中鹽核酸酶70950文章作者按照經(jīng)典的慢病毒載體生產(chǎn)流程操作...

ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期，致力于從海洋生物中識(shí)別新的冷適應(yīng)酶。ArcticZymes目標(biāo)明確，推進(jìn)分子研究、診斷和therapeutics領(lǐng)域的發(fā)展。30多年來，ArcticZymes只專注于酶學(xué)研究，匯集一批志同道合的科學(xué)家，在酶學(xué)領(lǐng)域追求zhuoyue、勇于創(chuàng)新。ArcticZymes開發(fā)創(chuàng)新解決方案，與客戶緊密協(xié)作，提升產(chǎn)品品質(zhì)，從高質(zhì)量到zhuoyue，達(dá)成他們的目標(biāo)，重新定義生物藥生產(chǎn)的邊界。在ArcticZymes，我們精心設(shè)計(jì)解決方案，以從未出現(xiàn)的方式推動(dòng)行業(yè)向前發(fā)展。瓊脂糖膠結(jié)果顯示，M-SAN HQ中鹽核酸酶能將HCD消化成小...

慢病毒大規(guī)模純化的捕獲步驟包括：膜過濾澄清，隨后切向流過濾/超濾或者體積排阻色譜濃縮。此外，需用核酸酶（benzonase或M-SAN HQ中鹽核酸酶）來去除細(xì)胞殘留的、質(zhì)粒來源的DNA污染。這兩個(gè)步驟順序可以調(diào)整，依據(jù)項(xiàng)目工藝而定。兩種工藝路線各有優(yōu)缺點(diǎn)：先用核酸酶消化的優(yōu)點(diǎn)是可去除大的DNA片段，且后續(xù)步驟可以去除殘留核酸酶；但所用的核酸酶的量也非常大。與此相反，將核酸酶步驟后置的優(yōu)點(diǎn)是大幅降低核酸酶的量(成本降低)；但后面的步驟必須有將核酸酶去除的能力。此外，后期用核酸酶的缺點(diǎn)是核酸污染可能會(huì)結(jié)合慢病毒顆粒形成沉淀，進(jìn)而導(dǎo)致慢病毒在純化中流失，從而影響得率。US FDA指南要求：重組bi...

對(duì)于含包膜的病毒載體，如慢病毒LV、逆轉(zhuǎn)錄病毒RV等，在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收獲。而M-SAN HQ中鹽核酸酶，作為市場上更適合生理鹽條件的核酸酶，所以，M-SAN HQ成了包膜病毒載體生產(chǎn)的更好選擇。優(yōu)勢在于：1. M-SAN HQ兼容多種細(xì)胞培養(yǎng)體系，在細(xì)胞培養(yǎng)鹽濃度條件下具有更優(yōu)活性；2. M-SAN HQ酶活更高、酶切速度更快，縮短孵育時(shí)間；3. M-SAN HQ能夠高效剪切染色質(zhì)到更小片段，簡化下游工藝流程；4. 相比Benzonase，M-SAN HQ用量減少1/2-2/3，降低了酶用量及生產(chǎn)成本。在已有工藝中，不需做任何調(diào)整，用中鹽核酸酶能夠完全替換全能核酸酶，且去除HCD效率更高；...

監(jiān)管部門對(duì)HCD的殘留量有明確的規(guī)定。美國FDA發(fā)布的指導(dǎo)原則中指出生物制品HCD殘余限度為 100pg/劑，對(duì)于大劑量生物制品如單克隆抗體，根據(jù)其殘留DNA來源及給藥途徑，殘留量可放寬至 10ng/劑。細(xì)胞基因藥物終產(chǎn)品的DNA殘留有兩種來源，分別是宿主細(xì)胞DNA（HCD）和轉(zhuǎn)染用的質(zhì)粒。質(zhì)粒和HCD的存在形式不同，去除效率也差別很大。其中，質(zhì)粒是裸露的DNA雙鏈，帶強(qiáng)負(fù)電荷，通過色譜純化主要是離子交換能夠很高效去除；HCD則是以核小體緊密折疊形成的染色質(zhì)形式存在，幾乎不以裸DNA形式存在，所以很難去除。ArcticZymes廠家管控整個(gè)供應(yīng)鏈及生產(chǎn)流程，協(xié)助客戶進(jìn)行文件審計(jì)及現(xiàn)場審計(jì)。吉林...

一般來說，生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM（BenzonaseTM是Merck的注冊(cè)商標(biāo)）為主，能高效降解任何形式（雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀）的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen，通過E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的適宜反應(yīng)條件是低鹽濃度范圍（

對(duì)于含包膜的病毒載體，如慢病毒LV、逆轉(zhuǎn)錄病毒RV等，在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收獲。而M-SAN HQ中鹽核酸酶，作為市場上更適合生理鹽條件的核酸酶，所以，M-SAN HQ成了包膜病毒載體生產(chǎn)的更好選擇。優(yōu)勢在于：1. M-SAN HQ兼容多種細(xì)胞培養(yǎng)體系，在細(xì)胞培養(yǎng)鹽濃度條件下具有更優(yōu)活性；2. M-SAN HQ酶活更高、酶切速度更快，縮短孵育時(shí)間；3. M-SAN HQ能夠高效剪切染色質(zhì)到更小片段，簡化下游工藝流程；4. 相比Benzonase，M-SAN HQ用量減少1/2-2/3，降低了酶用量及生產(chǎn)成本。生理鹽濃度下，M-SAN HQ中鹽核酸酶性能優(yōu)于常用核酸酶。青海ArcticZymes中...

經(jīng)典的慢病毒載體（LV）的生產(chǎn)工藝如下，——三質(zhì)粒系統(tǒng)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系，轉(zhuǎn)染24小時(shí)后LV由轉(zhuǎn)染陽性細(xì)胞生產(chǎn)并排出到培養(yǎng)上清液中；收獲上清培養(yǎng)液后，加入核酸酶去除HCD污染，通過澄清步驟去除大的細(xì)胞碎片等雜質(zhì)；下游純化步驟分離LV載體，純化方法包括切向流過濾TFF、色譜純化及超速離心；純化后的LV病毒顆粒經(jīng)過無菌過濾，更換到優(yōu)化后的配方中，灌裝并冷凍保存。每批Car-T生產(chǎn)時(shí)取對(duì)應(yīng)量的LV病毒，切忌反復(fù)凍融，否則LV病毒會(huì)失活。在biopharma生產(chǎn)，如細(xì)胞基因medicine及vaccine生產(chǎn)中，宿主細(xì)胞DNA殘留是關(guān)鍵質(zhì)量參數(shù)之一。云南培養(yǎng)基條件中鹽核酸酶監(jiān)管部門對(duì)HCD的殘...

ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中鹽核酸酶，2021年推出對(duì)應(yīng)的M-SAN HQ ELISA kit。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中M-SAN HQ中鹽核酸酶的殘留含量，特異性的anti-M-SAN作為捕獲抗體偶聯(lián)在孔板上，辣根過氧化酶HRP標(biāo)記anti-M-SAN作為檢測抗體，TMB是檢測反應(yīng)底物。該試劑盒特異識(shí)別M-SAN HQ中鹽核酸酶，對(duì)其它核酸酶沒有特異性結(jié)合。它的定量范圍是0.12-7.5ng/ml；12*8strips的設(shè)計(jì)規(guī)格，使用靈活，更能降低使用成本。M-SAN HQ中鹽核酸酶不含動(dòng)...

慢病毒大規(guī)模純化的捕獲步驟包括：膜過濾澄清，隨后切向流過濾/超濾或者體積排阻色譜濃縮。此外，需用核酸酶（benzonase或M-SAN HQ中鹽核酸酶）來去除細(xì)胞殘留的、質(zhì)粒來源的DNA污染。這兩個(gè)步驟順序可以調(diào)整，依據(jù)項(xiàng)目工藝而定。兩種工藝路線各有優(yōu)缺點(diǎn)：先用核酸酶消化的優(yōu)點(diǎn)是可去除大的DNA片段，且后續(xù)步驟可以去除殘留核酸酶；但所用的核酸酶的量也非常大。與此相反，將核酸酶步驟后置的優(yōu)點(diǎn)是大幅降低核酸酶的量(成本降低)；但后面的步驟必須有將核酸酶去除的能力。此外，后期用核酸酶的缺點(diǎn)是核酸污染可能會(huì)結(jié)合慢病毒顆粒形成沉淀，進(jìn)而導(dǎo)致慢病毒在純化中流失，從而影響得率。ArcticZymes Tec...

在生物工藝流程中，需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染，而核酸酶作為外源成份，也需要在生產(chǎn)流程中去除。核酸酶去除工藝包括熱滅活法、酶抑制劑、離子交換和親合層析法等。慢病毒LV的pI在6.0-6.5左右，包裝了完整基因組DNA后的AAV病毒顆粒PI大致為5.9，來自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右，M-SAN HQ中鹽核酸酶pI 8.7左右。因此，在同樣的條件下，從LV/AAV溶液中去除M-SAN HQ中鹽核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易、更徹底。M-SAN HQ ELISA kit檢測產(chǎn)品靈敏度高，定量范圍為0.12-7.5ng/ml。山東等滲條件中鹽核酸...

核酸酶活性受到很多因素影響，如鹽濃度、pH、底物、溫度等。因此，不同客戶、不同項(xiàng)目中核酸酶的使用條件都不一。目前，生物制藥行業(yè)對(duì)Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉，如生理鹽或低鹽濃度、脫鹽操作等。對(duì)于大部分使用Benzonase的項(xiàng)目，使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代，而且溫度、Mg2+濃度等條件不用做任何調(diào)整，同樣酶量的M-SAN HQ對(duì)宿主細(xì)胞DNA（HCD）的去除效果更好、病毒載體得率更高。經(jīng)過工藝優(yōu)化后，可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來的1/3-1/2，且HCD去除效果及產(chǎn)品得率更高。M-SAN HQ ELISA kit具有高精確度及高準(zhǔn)確度。浙江M-S...

染色質(zhì)由組蛋白和DNA組成，——147個(gè)堿基對(duì)的DNA纏繞在8個(gè)組蛋白（由H2A、H2B、H3和H4形成的八聚體）周圍，形成基本的染色質(zhì)單位，即核小體。核小體像珠串一樣串連在一起，并被包裝成更高階的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。DNA帶負(fù)電荷，富含堿性氨基酸的組蛋白帶正電荷，且組蛋白多聚物有很多疏水區(qū)段。所有這些特點(diǎn)導(dǎo)致宿主DNA殘留（HCD）能吸附很多物質(zhì)，包括宿主蛋白殘留（HCD）、色譜填料、目的病毒顆粒等，因此，HCD的存在增加了工藝流程的復(fù)雜度，同時(shí)也降低了病毒顆粒的穩(wěn)定性。染色質(zhì)的雙螺旋結(jié)構(gòu)影響DNA的檢測與酶切處理，而中鹽核酸酶降解染色質(zhì)效率更高。吉林上海倍篤生物中鹽核酸酶70950細(xì)胞基因藥物的基...

大多數(shù)研究級(jí)別的慢病毒是通過批次濃縮而不是粗制劑之后應(yīng)用的，濃縮基本上是通過兩步離心法產(chǎn)生的。在70000g通過超速離心濃縮后的慢病毒再通過蔗糖緩沖(50000g)純化，然后溶解在配方緩沖液中。一種改進(jìn)，特別是純度方面的改進(jìn)，基于離心/色譜聯(lián)用的純化方法。例如，Kutner等評(píng)估了組合純化/濃縮方法。蔗糖緩沖的超速離心結(jié)合陰離子交換層析獲得了88.2%的收率，而相反的組合則獲得了77.6%的收率。在兩種方法中，濃縮都超過了100倍，病毒滴度都超過了1010TU/ml(VSV-g包被的慢病毒)。鑒于biologics制品更嚴(yán)格的質(zhì)量要求，廠家對(duì)M-SAN HQ中鹽核酸酶的生產(chǎn)及質(zhì)控符合更高標(biāo)準(zhǔn)。...

慢病毒大規(guī)模純化的捕獲步驟包括：膜過濾澄清，隨后切向流過濾/超濾或者體積排阻色譜濃縮。此外，需用核酸酶（benzonase或M-SAN HQ中鹽核酸酶）來去除細(xì)胞殘留的、質(zhì)粒來源的DNA污染。這兩個(gè)步驟順序可以調(diào)整，依據(jù)項(xiàng)目工藝而定。兩種工藝路線各有優(yōu)缺點(diǎn)：先用核酸酶消化的優(yōu)點(diǎn)是可去除大的DNA片段，且后續(xù)步驟可以去除殘留核酸酶；但所用的核酸酶的量也非常大。與此相反，將核酸酶步驟后置的優(yōu)點(diǎn)是大幅降低核酸酶的量(成本降低)；但后面的步驟必須有將核酸酶去除的能力。此外，后期用核酸酶的缺點(diǎn)是核酸污染可能會(huì)結(jié)合慢病毒顆粒形成沉淀，進(jìn)而導(dǎo)致慢病毒在純化中流失，從而影響得率。中鹽核酸酶的生產(chǎn)在符合ISO1...

文章作者按照經(jīng)典的慢病毒載體生產(chǎn)流程操作，在融化、核酸酶消化、澄清、超濾等步驟留樣，分別檢測dsDNA濃度及功能性LV病毒滴度。經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn)，——1.dsDNA去除主要發(fā)生在澄清環(huán)節(jié)，能去除dsDNA的80%-90%；2. M-SAN HQ中鹽核酸酶比Benzonase能更高效去除dsDNA，即M-SAN HQ組的TFF回流液中dsDNA殘留量是Benzonase組回流液的20%左右；3. LV病毒滴度在澄清環(huán)節(jié)損失30%-40%；4. M-SAN HQ組的TFF回流液中LV病毒滴度略高于Benzonase組的回流液數(shù)據(jù)。M-SAN HQ ELISA kit檢測產(chǎn)品靈敏度高，定量范圍為0.12...

在生物工藝流程中，需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染，而核酸酶作為外源成份，也需要在生產(chǎn)流程中去除。核酸酶去除工藝包括熱滅活法、酶抑制劑、離子交換和親合層析法等。慢病毒LV的pI在6.0-6.5左右，包裝了完整基因組DNA后的AAV病毒顆粒PI大致為5.9，來自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右，M-SAN HQ中鹽核酸酶pI 8.7左右。因此，在同樣的條件下，從LV/AAV溶液中去除M-SAN HQ中鹽核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易、更徹底。M-SAN HQ ELISA kit檢測產(chǎn)品能定量檢測該核酸酶，與中鹽核酸酶搭配用在medicine生產(chǎn)。河北培...

此外，文章作者對(duì)每個(gè)步驟的樣品進(jìn)行納米顆粒分析（NTA），結(jié)果發(fā)現(xiàn)：澄清環(huán)節(jié)后，M-SAN HQ中鹽核酸酶和Benzonase處理組才出現(xiàn)比較明確的LV病毒顆粒峰；TFF處理后，回流液樣品的LV病毒顆粒峰更加尖銳，表明病毒顆粒分散度更好、穩(wěn)定性更高?；亓饕旱腘TA結(jié)果進(jìn)一步表明，M-SAN HQ中鹽核酸酶處理組只有一個(gè)病毒顆粒峰，而Benzonase處理組的回流液中有三個(gè)峰。作者推測Benzonase處理組的病毒顆粒還有嚴(yán)重的病毒團(tuán)聚現(xiàn)象，而呈現(xiàn)多峰現(xiàn)象。ArcticZymes廠家管控整個(gè)供應(yīng)鏈及生產(chǎn)流程，協(xié)助客戶進(jìn)行文件審計(jì)及現(xiàn)場審計(jì)。云南生理鹽條件中鹽核酸酶70950-202ArcticZ...

ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期，致力于從海洋生物中識(shí)別新的冷適應(yīng)酶。ArcticZymes目標(biāo)明確，推進(jìn)分子研究、診斷和therapeutics領(lǐng)域的發(fā)展。30多年來，ArcticZymes只專注于酶學(xué)研究，匯集一批志同道合的科學(xué)家，在酶學(xué)領(lǐng)域追求zhuoyue、勇于創(chuàng)新。ArcticZymes開發(fā)創(chuàng)新解決方案，與客戶緊密協(xié)作，提升產(chǎn)品品質(zhì)，從高質(zhì)量到zhuoyue，達(dá)成他們的目標(biāo)，重新定義生物藥生產(chǎn)的邊界。在ArcticZymes，我們精心設(shè)計(jì)解決方案，以從未出現(xiàn)的方式推動(dòng)行業(yè)向前發(fā)展。M-SAN HQ ELISA Kit能夠定量檢測M-SAN H...

細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域的進(jìn)展使得對(duì)高質(zhì)量基因轉(zhuǎn)移技術(shù)的需求急劇增加，包括高質(zhì)量慢病毒載體(LV)的大規(guī)模生產(chǎn)。宿主細(xì)胞DNA殘留（HCD）是一類主要的工藝相關(guān)雜質(zhì)，對(duì)下游純化帶來很大挑戰(zhàn)。根據(jù)相關(guān)法規(guī)要求，需要去除HCD才能達(dá)到臨床級(jí)LV。HCD去除是通過核酸酶處理聯(lián)合下游工藝（DSP）共同實(shí)現(xiàn)的。文章作者研究了兩款核酸酶M-SAN HQ中鹽核酸酶(ArcticZymes Technologies)和Benzonase(Merck)對(duì)HCD去除效率的差別，其下游工藝包含過濾澄清及TFF超濾。宿主細(xì)胞DNA主要以染色質(zhì)形態(tài)存在，其中組蛋白通過離子作用及疏水作用與DNA緊密結(jié)合；四川等滲條件中鹽核酸酶A...

上海倍篤生物科技有限公司（簡稱“倍篤生物”），由中國科學(xué)院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士，于2018年1月共同創(chuàng)立。公司代理多個(gè)品牌的儀器、試劑及耗材，遵守相關(guān)法規(guī)要求，如cGMP規(guī)范、ISO13485質(zhì)量管理體系認(rèn)證等，致力于為診斷領(lǐng)域如分子診斷及病原微生物檢測研發(fā)等，藥物研發(fā)領(lǐng)域如細(xì)胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細(xì)胞及外泌體研究等客戶提供合規(guī)、高質(zhì)量物料及專業(yè)服務(wù)，以期與客戶共同協(xié)作，加快研發(fā)及生產(chǎn)進(jìn)度，為客戶提供更多價(jià)值。ArcticZymes精于規(guī)?；a(chǎn)獨(dú)特特性的酶產(chǎn)品，于2005年在證券交易所上市。福建M-SAN中鹽核酸酶70950-202ArcticZymes Technologies...

基因藥物常用的AAV載體有三種生產(chǎn)方法，分別是三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系、桿狀病毒表達(dá)載體體系和包裝細(xì)胞體系。其中，20多年前開發(fā)的三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)表達(dá)技術(shù)仍然占據(jù)腺相關(guān)病毒AAV生產(chǎn)的主流地位，其三質(zhì)粒分別是Helper質(zhì)粒（含E2a/b、E4和VARNA基因）、目標(biāo)基因表達(dá)質(zhì)粒及輔助質(zhì)粒（含Cap和Rep基因）。雖然AAV病毒載體的血清型不同，但AAV的生產(chǎn)流程基本一致，主要有質(zhì)粒共轉(zhuǎn)宿主細(xì)胞HEK293、293細(xì)胞生產(chǎn)病毒顆粒、從細(xì)胞培養(yǎng)上清或/及細(xì)胞裂解液中收獲病毒載體、純化/制劑/無菌過濾/灌裝等流程。ArcticZymes廠家管控整個(gè)供應(yīng)鏈及生產(chǎn)流程，協(xié)助客戶進(jìn)行文件審計(jì)及現(xiàn)場審計(jì)。重慶中鹽核酸酶7...

細(xì)胞基因藥物的基因遞送有病毒及非病毒兩種方式，其中病毒遞送更為常用。在病毒遞送路徑中，腺相關(guān)病毒（AAV）和慢病毒（Lentivirus）是常用的兩種載體；差別是病毒基因組的存在形式，AAV的基因組一般不整合到染色體中，以游離形式存在于染色體之外，且一般會(huì)表達(dá)數(shù)年之久；而慢病毒的基因組則會(huì)整合到染色體達(dá)到長期持續(xù)表達(dá)的目的。此外，其它用于基因藥物的病毒載體有單純皰疹病毒（HSV）、痘苗病毒（Vaccina Virus）、痘病毒（Poxviruses）。在150mM NaCl條件下，M-SAN HQ中鹽核酸酶的酶切活性達(dá)到常規(guī)核酸酶的5倍左右。北京上海倍篤生物中鹽核酸酶70950在生物工藝流程中...

慢病毒大規(guī)模純化的捕獲步驟包括：膜過濾澄清，隨后切向流過濾/超濾或者體積排阻色譜濃縮。此外，需用核酸酶（benzonase或M-SAN HQ中鹽核酸酶）來去除細(xì)胞殘留的、質(zhì)粒來源的DNA污染。這兩個(gè)步驟順序可以調(diào)整，依據(jù)項(xiàng)目工藝而定。兩種工藝路線各有優(yōu)缺點(diǎn)：先用核酸酶消化的優(yōu)點(diǎn)是可去除大的DNA片段，且后續(xù)步驟可以去除殘留核酸酶；但所用的核酸酶的量也非常大。與此相反，將核酸酶步驟后置的優(yōu)點(diǎn)是大幅降低核酸酶的量(成本降低)；但后面的步驟必須有將核酸酶去除的能力。此外，后期用核酸酶的缺點(diǎn)是核酸污染可能會(huì)結(jié)合慢病毒顆粒形成沉淀，進(jìn)而導(dǎo)致慢病毒在純化中流失，從而影響得率。M-SAN HQ中鹽核酸酶的生...