外泌體的提取方法:1、色譜法。色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對(duì)關(guān)系而對(duì)溶質(zhì)進(jìn)行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進(jìn)入凝膠孔,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過(guò)色譜柱,首先被流動(dòng)相洗脫出來(lái);小分子可進(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強(qiáng)地滯留,更慢地被洗脫出。分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,應(yīng)用不普遍...
查看詳細(xì) >>無(wú)血清細(xì)胞凍存液:產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):1.化學(xué)成分明確,無(wú)任何外源蛋白和血清,適用于各類動(dòng)物細(xì)胞株凍存。2.無(wú)需程序降溫,細(xì)胞復(fù)蘇率90%以上。3.凍存細(xì)胞可直接存放于-80℃冰箱,穩(wěn)定保存數(shù)年。4.即用型產(chǎn)品,4℃可穩(wěn)定保存。細(xì)胞凍存:1.收集融合率>90%的對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞于離心管中。2.1000rmp離心5分鐘,去除離心管中的上清...
查看詳細(xì) >>鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理,收集上清液;在冰水浴中,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時(shí),去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調(diào)節(jié)...
查看詳細(xì) >>眾所周知,RNA提取是一項(xiàng)困難的工作。常見(jiàn)的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染。此外,不同的樣品類型有自己獨(dú)特的特性,需要特別注意。例如,微生物(如革蘭氏陽(yáng)性/陰性細(xì)菌、菌類、古生菌等)的細(xì)胞壁堅(jiān)硬,不易被化學(xué)和酶解。其他樣本類型,如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等),可與RNA共沉淀,并可壓制下游...
查看詳細(xì) >>無(wú)血清細(xì)胞凍存液與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液比較及優(yōu)勢(shì):1.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液只適用于含血清細(xì)胞的凍存,但并不適用于無(wú)血清培養(yǎng)的細(xì)胞,例如一些CIK細(xì)胞等,而無(wú)血清細(xì)胞凍存液即適用于含血清細(xì)胞的凍存,又適用于無(wú)血清細(xì)胞的凍存,是一種通用型細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株;2.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液含10%胎牛血清,因血清是動(dòng)物源性成份,因此病毒、霉菌和支原體等污...
查看詳細(xì) >>鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理,收集上清液;在冰水浴中,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時(shí),去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調(diào)節(jié)...
查看詳細(xì) >>人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白...
查看詳細(xì) >>鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對(duì)照組)中,并且均用0,10,...
查看詳細(xì) >>鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用,同時(shí)它也是一種天然的黏附劑,當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,制備細(xì)胞爬片時(shí),可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可掌握鼠尾膠原的制備方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾膠原將其固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料:大...
查看詳細(xì) >>鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I、無(wú)菌10×PBS、無(wú)菌蒸餾水、無(wú)菌1MNaOH。2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3)在冰上放置無(wú)菌管以收存膠原蛋白I。4)在無(wú)菌條件下執(zhí)行以下步驟。4.1加入10×PBS(終體積/10)mL4.2計(jì)算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)終體...
查看詳細(xì) >>鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用,同時(shí)它也是一種天然的黏附劑,當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,制備細(xì)胞爬片時(shí),可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可掌握鼠尾膠原的制備方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾膠原將其固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料:大...
查看詳細(xì) >>RNA提取試劑盒原理:該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速,簡(jiǎn)單,經(jīng)濟(jì)有效的方法,可從全血,哺乳動(dòng)物細(xì)胞,細(xì)菌細(xì)胞和菌類細(xì)胞中分離總RNA。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細(xì)胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團(tuán)結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上,同時(shí)使污染物通過(guò)柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫,不用酚提取...
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