免疫組化分類中免疫酶標(biāo)方法，英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后，于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)?；驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，通過(guò)光鏡或電鏡，對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前定位準(zhǔn)確、對(duì)比度好、染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存，適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速，已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法，目前在病理診斷中廣為使用的當(dāng)屬***法（過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶）、ABC法（卵白素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物）、SP法（鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶）、即用型二步法（聚合物鏈接）等。英瀚斯生物，專業(yè)病理老師負(fù)責(zé)免疫組化外包！河北小鼠免疫組化要多少錢

細(xì)胞屬性的判定，免疫組化也可以進(jìn)行這方面的臨床應(yīng)用。通過(guò)特定抗體標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分，來(lái)判定細(xì)胞的屬性，確定cancer的來(lái)源。如細(xì)胞角蛋白(CK)是上皮性標(biāo)記，CK陽(yáng)性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標(biāo)記;甲狀腺球蛋白(Tg)陽(yáng)性提示是甲狀腺濾泡性cancer;前列腺特異性抗原(PSA)只見于前列腺上皮;膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陽(yáng)性則提示膠質(zhì)cancer;CD20和CD79a陽(yáng)性則提示B細(xì)胞淋巴瘤;平滑肌肌動(dòng)蛋白(Actin)陽(yáng)性提示cancer為平滑肌源性;胃腸道間質(zhì)瘤中原cancer基因蛋白產(chǎn)物CD117陽(yáng)性;血管源性cancer中內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD34陽(yáng)性等等。如果您需要做實(shí)驗(yàn)外包，可以與我們英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系。河南靠譜免疫組化價(jià)格免疫組化protocol，詳情請(qǐng)看英瀚斯生物官網(wǎng)。

實(shí)驗(yàn)失敗常見問(wèn)題分析有哪些：

為什么在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陰性？

答：這種現(xiàn)象主要是由操作不當(dāng)導(dǎo)致，可能的原因有：1.染色操作不當(dāng)，致使染色失?。?.漏加一種抗體或者制備出的抗體沒(méi)有活性；3.緩沖液中有疊氮化鈉，抑制了酶的活性；4.復(fù)染或脫水劑使用不當(dāng)?shù)?。建議逐一排查，找到原因后重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陽(yáng)性，這是為什么？答：與上一個(gè)問(wèn)題類似，出現(xiàn)的原因也是試驗(yàn)操作存在問(wèn)題，可能的原因有：1.切片在染色過(guò)程中抗體過(guò)濃，或者干片了；使用的呈色底物溶液已變色或呈色反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；3.抗體溫育的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)切片的背景很深，這是為什么？答：以下幾方面會(huì)導(dǎo)致切片的背景過(guò)深：1.蛋白質(zhì)封閉不夠或所用血清溶血，造成抗體的非特異性反應(yīng)；2.內(nèi)源性過(guò)氧化酶沒(méi)有完全阻斷，顯色過(guò)程中過(guò)氧化酶與酶底物反應(yīng)，造成背景；3.底物呈色反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或呈色反應(yīng)后漂洗不徹底。

免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是***我向一老師請(qǐng)教得出的結(jié)論。因?yàn)樽魇炃衅瑫r(shí)要高溫烤片，可能會(huì)破壞組織的抗原性，如果組織的抗原性較穩(wěn)定，則可作石蠟切片；但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片。

（2）冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性，做免疫組化時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，可能會(huì)使抗原彌散；切片厚度較石蠟的厚，做的片子沒(méi)石蠟的漂亮。當(dāng)你買一抗時(shí)，目錄上都寫著做什么樣的切片，如果它寫著只能做冰凍，就不能做石蠟，如寫著兩者都可，那就都能做。

（3）石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，且容易存放在室溫，而冰凍切片比較麻煩，一定要存在-80度的低溫冰箱中，尤其是用來(lái)做原位雜交的的切片，為了防止RNA降解，保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去，容易成功，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。

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免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床cancer良惡性的判斷，英瀚斯生物為您介紹。對(duì)于反應(yīng)性增生還是cancer性增生，可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測(cè)B淋巴細(xì)胞增生的單克隆或多克隆性來(lái)區(qū)別。在濾泡反應(yīng)性增生時(shí)，濾泡反應(yīng)中心的細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞凋亡蛋白(bcl-2)，bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中，由于90%以上cancer性濾泡細(xì)胞有bcl-2的高表達(dá)，bcl-2陽(yáng)性。而增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)，周期素(Cycling)，核抗原(Ki-67)通過(guò)對(duì)cancer細(xì)胞增生的程度作出評(píng)價(jià)，從而提示增生細(xì)胞的良惡性。免疫組化樣本如何處理？什么是免疫組化是什么

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免疫組化（IHC）利用抗體檢測(cè)組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的定位。

英瀚斯生物實(shí)驗(yàn)外包，自有專業(yè)病理實(shí)驗(yàn)室，可高效完成免疫組化檢測(cè)。

抗體-抗原的相互作用通過(guò)有色酶底物顯色檢測(cè)或熒光染料熒光檢測(cè)進(jìn)行觀察。雖然IHC在定量方面不如蛋白質(zhì)印跡或ELISA，但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達(dá)譜對(duì)病理學(xué)家以及作為診斷工具都具有重要意義。

IHC實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于穩(wěn)定、優(yōu)化且可重復(fù)的染色方案，而該方案應(yīng)使用高質(zhì)量的特異性試劑。 河北小鼠免疫組化要多少錢