外泌體鑒定分為三個(gè)層面:透射電鏡(transmission electron microscope,TEM)、Nanosight粒徑、蛋白標(biāo)志物。透射電鏡分辨率為0.1~0.2nm,適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,可觀測(cè)樣本中是否存在外泌體樣結(jié)構(gòu)(通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形),同時(shí)可測(cè)量外泌體大小。外泌體表面存在特異性標(biāo)志物分子,如CD9、CD81、CD63等。以琳生物可以提供Western blot和流式細(xì)胞術(shù)的鑒定結(jié)果。外泌體(Exosome)參與細(xì)胞之間的交流,物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過程的維持、還與許多疾病息息相關(guān)。外泌體鑒定透射電鏡,英瀚斯生物。河南哪家做外泌體電鏡
外泌體可以通過細(xì)胞外刺激、微生物攻擊和其他應(yīng)激條件的誘導(dǎo)等而生成。目前普遍的觀點(diǎn)認(rèn)為,異于普通微泡直接由細(xì)胞出芽脫落生成,外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷形成早期內(nèi)體,隨后在內(nèi)體轉(zhuǎn)運(yùn)復(fù)合體及一些相關(guān)蛋白的調(diào)控下,早期內(nèi)體內(nèi)出芽形成多個(gè)腔內(nèi)小囊泡構(gòu)成的MVB,后者比較后在GTP酶家族中的RAB酶的調(diào)節(jié)下與細(xì)胞膜融合向外界分泌腔內(nèi)囊泡,即外泌體。外泌體(Exosome)是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,分布于外周血、尿液、唾液、腹水、羊水等體液中。西藏專業(yè)的外泌體電鏡外泌體檢測(cè)服務(wù)-南京英瀚斯-生物實(shí)驗(yàn)外包-大小鼠實(shí)驗(yàn)。
外泌體的研究是一個(gè)活躍的研究領(lǐng)域,正在進(jìn)行的技術(shù)和實(shí)驗(yàn)進(jìn)展可能會(huì)產(chǎn)生關(guān)于它們的異質(zhì)性和生物學(xué)功能的有價(jià)值的信息,并增強(qiáng)利用它們的***和診斷潛力的能力。是否外泌體的產(chǎn)生和內(nèi)容物隨年齡變化?這些信息可以為組織衰老、***退化和程序化或過早老化提供新的見解。EVs和/或外泌體是否先于地球上單細(xì)胞有機(jī)體初次出現(xiàn)?這是一個(gè)大膽而誘人的猜測(cè)。單外泌體的鑒定和分離以及低溫電子顯微鏡分析有可能明顯提高我們對(duì)外泌體基礎(chǔ)生物學(xué)的理解以及它們?cè)趹?yīng)用科學(xué)和技術(shù)中的應(yīng)用。
外泌體的主要功能被認(rèn)為是細(xì)胞之間的信息傳遞,了解它帶有的蛋白質(zhì)和多種RNA上的信息就變得尤其重要。2019年外泌體中標(biāo)項(xiàng)目中帶有熱門話題miRNA、lncRNA和環(huán)狀RNA的項(xiàng)目數(shù)量,我們可以看到,外泌體中的miRNA和lncRNA過去研究的是比較多了,例如發(fā)表在Hepatology(IF=14.971)上的一篇文章表明肝ai細(xì)胞釋放的外泌體miRNA調(diào)控巨噬細(xì)胞程序性死亡配體1的表達(dá)。另一篇文章發(fā)現(xiàn)膽管細(xì)胞來源的外泌體LncRNA H19促進(jìn)肝星狀細(xì)胞活化和膽汁淤積性肝纖維化。相對(duì)的,外泌體中的circRNA研究目前還較少,而circRNA分子自身獨(dú)特的穩(wěn)定性、組織特異性、時(shí)序和疾病特異性等,使它很有可能成為外泌體檢測(cè)的下一個(gè)熱門分子。外泌體存在于人類或動(dòng)物的各種體液中。
外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?,F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63, CD81 和CD9))、熱休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細(xì)胞來源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來源)以及乳凝集素(不成熟的樹突狀細(xì)胞)。外泌體實(shí)驗(yàn),就找南京英瀚斯。海南靠譜的外泌體電鏡
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外泌體Exosome是由活細(xì)胞分泌的,它是一種亞細(xì)胞成分,組要成分是磷脂雙分子和攜帶的膜性分子,其界定依據(jù)形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)及提取方式不同細(xì)胞源的exosome是不同的,這些不同的理化性質(zhì)有利于exosome的提取。從體外培養(yǎng)的細(xì)胞中分離和提取exosome的主要方法是高速離心法,這種方法能分離出大的碎片和已經(jīng)死亡細(xì)胞,然后再通過超速離心法分離 提取exosome 比較后利用糖梯度,使脂質(zhì)囊性質(zhì)的exosome漂浮于上面。具體來說,Exosome的研究方式是分離/捕獲小囊泡,并拷問它所攜帶的貨物。就目前而言,人們多采用超速離心、磁珠免疫捕獲、沉淀或過濾的方法,對(duì)exosome進(jìn)行前期的分離。河南哪家做外泌體電鏡