外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm)，現(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?，F(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有：肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。雖然外泌體有諸多開發(fā)潛力，但基于外泌體的臨床應(yīng)用依然發(fā)展緩慢。其中，有兩個(gè)主要的技術(shù)障礙限制了外泌體的基礎(chǔ)和應(yīng)用研究。英瀚斯生物外泌體。揭開外泌體神秘面紗，南京英瀚斯生物。江蘇值得信賴的外泌體電鏡
外泌體（exosome）是活細(xì)胞分泌的30-200nm的囊泡，在電鏡下具有非常明顯單層膜結(jié)構(gòu)，通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體，它們普遍存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁等體液中，被視為特異性分泌的膜泡，參與細(xì)胞間通訊。有關(guān)外泌體分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制近些年剛剛開始受到關(guān)注，與外泌體相關(guān)的被pubmed收錄的文章數(shù)量和國自然基金項(xiàng)目中標(biāo)數(shù)量逐年增長，表明國內(nèi)外對(duì)外泌體的研究興趣日益增長。青?？孔V的外泌體粒徑分析外泌體提取，實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)豐富。
外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合，有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?，F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63, CD81 和CD9)）、熱休克蛋白家族（(HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33（結(jié)腸上皮細(xì)胞來源）、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來源)以及乳凝集素（不成熟的樹突狀細(xì)胞）。
外泌體的生物學(xué)功能取決于起源細(xì)胞和起源組織或細(xì)胞在外泌體產(chǎn)生時(shí)的狀態(tài)。先前的研究表明，外泌體可能像細(xì)胞垃圾袋一樣，排出多余和/或無功能的細(xì)胞成分。此外，內(nèi)吞囊泡還參與細(xì)胞表面蛋白和信號(hào)分子的循環(huán)。**近的研究表明,外泌體在不同的生物過程扮演重要的角色, 如血管生成、抗原表達(dá)、細(xì)胞凋亡、凝固、細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài),炎癥和細(xì)胞間信號(hào)。這些角色歸因于能力轉(zhuǎn)移核糖核酸,蛋白質(zhì),酶和脂質(zhì),從而影響生理和病理過程的各種疾病,包括**、神經(jīng)退行性疾病、***和自身免疫性疾病。外泌體提取，超離法是比較常用的外泌體純化手段。
外泌體鑒定透射電鏡觀察能夠確認(rèn)外泌體的形態(tài)學(xué)特征，但無法體現(xiàn)樣本中所有外泌體顆粒的粒徑分布情況及整體濃度；流式細(xì)胞儀可測(cè)定的粒徑大小為150nm以上，并不適合檢測(cè)游離的外泌體顆粒。英瀚斯生物采用基于馬爾文Nanosight平臺(tái)的納米顆粒追蹤分析 (Nanoparticle Tracking Analysis, NTA) 技術(shù)，快速、精細(xì)地分析外泌體粒徑分布濃度，為外泌體存在提供有力證據(jù)。目前外泌體的提取方法主要可歸納為以下六種:一是超速離心法;二是過濾離心;三是密度梯度離心法；四是免疫磁珠法;五是PS親和法;六是色譜法。外泌體存在于人類或動(dòng)物的各種體液中。江蘇值得信賴的外泌體電鏡
外泌體組學(xué)_外泌體測(cè)序 南京英瀚斯生物。江蘇值得信賴的外泌體電鏡
外泌體鑒定，可以用和表面抗原對(duì)應(yīng)的抗體進(jìn)行免疫印跡（WB）、透射電子顯微鏡（TEM）、納米粒徑分析（如NanoSight LM10）等來驗(yàn)證。前面也說了，ISEV建議用表面蛋白來界定所提取的細(xì)胞外囊泡，所以用CD63來做WB或ELISA是必不可少的了。使用Wako的PS Capture? Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)（產(chǎn)品編號(hào)298-80601），既能鑒定外泌體的CD63信號(hào)，又能進(jìn)行定量、定性分析，一舉兩得！南京英瀚斯可以做外泌體鑒定。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成，使其可以穿透許多生物膜，江蘇值得信賴的外泌體電鏡
