HE染色樣本組織固定與切片：首先將組織樣本進(jìn)行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟，將待包埋的組織樣本放入石蠟中，確保組織位置規(guī)整。補(bǔ)充少許液態(tài)的石蠟后，進(jìn)行降溫冷凍，使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達(dá)到組織固定的效果，然后使用石蠟切片機(jī)進(jìn)行切片，厚度在４-８um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟：將待測(cè)組織樣本切片放于二甲苯中，充分浸泡10min，浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min，目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解，這樣可以在進(jìn)行染液染色的時(shí)候，染液可以充分進(jìn)入組織種，同時(shí)，二甲苯還可以起到透明的作用，使切片更容易觀察。HE染色原理 試劑 染色步驟 注意事項(xiàng) 。遼寧質(zhì)量好的HE染色哪家好

HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行)，可改變組織等電點(diǎn)，促進(jìn)伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合，其本身不參與染色的反應(yīng)。當(dāng)蘇木素染色效能極高，很短時(shí)間就導(dǎo)致核漿共染時(shí)，可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過(guò)2%)，抑制蘇木素染色效能，方便控制染色時(shí)間，同時(shí)也能提高蘇木素染色的清晰度?，F(xiàn)在有商用的HE染色液賣(mài)，但是質(zhì)量參差不齊。如果課題組較大，完全可以自己配制，效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周，即可完全成熟，染色效果好，氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶，這也是提示更換蘇木素的標(biāo)志之一)。安徽性?xún)r(jià)比高的HE染色外包關(guān)于HE染色，常用的結(jié)果分析原理。

HE染色切片中出現(xiàn)類(lèi)似色素樣的點(diǎn)狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因：切片封片前放置在空氣中時(shí)間太長(zhǎng)，以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對(duì)策：移去組織切片上的蓋玻片和封固劑，重新處理。將切片水洗數(shù)分鐘，然后重新脫水、透明、封固。封片過(guò)程中要保持組織切片的輕度濕潤(rùn)，盡量不要讓其干燥。細(xì)胞核呈紅、棕色改變?cè)颍禾K木精染色液過(guò)度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍(lán)不足。對(duì)策：首先，每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力，發(fā)現(xiàn)氧化過(guò)度應(yīng)及時(shí)更換。其次，可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等，在蘇木精染色后，給切片以足夠的藍(lán)化時(shí)間。

HE染色顯微鏡下見(jiàn)切片內(nèi)有大量水珠分析以及應(yīng)對(duì)原因：切片經(jīng)梯度乙醇處理后沒(méi)有完全脫水，導(dǎo)致二甲苯透明中性樹(shù)膠封固后殘留大量水分。對(duì)策：移去蓋玻片，用二甲苯溶解封固劑如中性樹(shù)膠。將切片置入新鮮的無(wú)水乙醇中，待切片重新脫水完全后，用新二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。所有用于脫水和透明的液體，在使用一定時(shí)間以后，應(yīng)即時(shí)更換。光鏡下切片某些區(qū)域難以聚焦分析以及應(yīng)對(duì)原因：蓋玻片上可能有封固切片的封固劑。對(duì)策：移去蓋玻片，重新用干凈的蓋玻片封片科研常備實(shí)驗(yàn)操作之HE染色。

HE染色組織樣本水化：將浸泡過(guò)二甲苯的待測(cè)組織樣本先放入無(wú)水乙醇中浸泡5min，使脫蠟時(shí)用的二甲苯可以被洗脫出去，使水可以進(jìn)入組織中；再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡５min以達(dá)到充分水化的效果。組織切片蘇木素染色、分化與反藍(lán)：將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗，每次浸泡５min，總共清洗３次。之后用移液***吸取已經(jīng)預(yù)先配制好的蘇木素染色液，每個(gè)組織切片滴加100ul，充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進(jìn)行分化，使細(xì)胞核中結(jié)合過(guò)多的染液和細(xì)胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后，再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇木素染藍(lán)色，使用弱堿性的促藍(lán)液加入組織切片中，讓細(xì)胞核染藍(lán)色。反藍(lán)結(jié)束后先用清水進(jìn)行清洗，再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。南京英瀚斯，專(zhuān)業(yè)的技術(shù)提供專(zhuān)業(yè)的HE染色服務(wù)。四川比較好的HE染色外包

HE染色的基本原理和結(jié)果分析。遼寧質(zhì)量好的HE染色哪家好

HE染色結(jié)果判讀：細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色，粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細(xì)胞的種類(lèi)有關(guān)，也隨其生活周期及病理變化而改變。例如，細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí)，伊紅著色由淺變深。H-E染色評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：（1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均勻，無(wú)皺褶無(wú)刀痕；（2）染色核漿分明，紅藍(lán)適度，透明潔凈，封裱美觀。遼寧質(zhì)量好的HE染色哪家好