外泌體是所有細(xì)胞產(chǎn)生的胞外小泡,攜帶核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和代謝物。它們是健康和疾病中細(xì)胞間近距離通訊的介質(zhì),影響細(xì)胞生物學(xué)的各個方面。外泌體的生物發(fā)生 細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)陷,將一些細(xì)胞外成分和細(xì)胞膜蛋白包裹在一起,形成早期內(nèi)涵體(ESEs),這些ESEs可以與其他細(xì)胞器發(fā)生物質(zhì)交換,或者不同ESEs之間融合形成晚期內(nèi)涵體(LSEs),進(jìn)一步形成細(xì)胞內(nèi)多膜體(MVBs),其中會包含許多腔內(nèi)囊泡(ILVs),這些ILVs將來就可能會被釋放成為外泌體。外泌體(exosome)研究-英瀚斯生物。海南靠譜的外泌體多少錢
外泌體的生成,微泡是由質(zhì)膜的出芽形成的,膜雙層通過磷脂的不對稱分布來維持脂質(zhì)的“多面性”。外層富含磷脂酰膽堿和鞘磷脂,而內(nèi)層主要由磷脂酰絲氨酸和磷脂酰乙醇胺形成。然而,胞質(zhì)Ca2+的內(nèi)流可以破壞這種不對稱性,導(dǎo)致磷脂跨膜雙層的重新分配,促進(jìn)膜起泡。依賴Ca2+的蛋白水解同時降解膜相關(guān)的細(xì)胞骨架,促進(jìn)出芽過程。在外泌體形成過程中,首先,MVE(多囊體)向內(nèi)芽形成小泡,內(nèi)含來自細(xì)胞質(zhì)的貨物(蛋白質(zhì)、mRNA和miRNAs)。然后,MVE要么與細(xì)胞膜融合釋放外泌體(內(nèi)囊泡),要么與溶酶體融合降解MVE含量。到達(dá)目的地后,外泌體通過內(nèi)吞途徑或與靶細(xì)胞膜融合,將其內(nèi)容物釋放到細(xì)胞質(zhì)中。細(xì)胞的膜的囊泡也可以直接從細(xì)胞膜上萌發(fā),攜帶活性蛋白、RNA和其他化合物。湖北專門做外泌體哪家好實(shí)驗(yàn)外包、外泌體檢測服務(wù)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包、分子實(shí)驗(yàn)外包。
外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年, Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌 的 exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不僅只是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對exosome的研究熱情激增,截止已經(jīng)通過286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。英瀚斯生物專業(yè)做外泌體檢測、電鏡、粒徑分析。
外泌體鑒定透射電鏡觀察能夠確認(rèn)外泌體的形態(tài)學(xué)特征,但無法體現(xiàn)樣本中所有外泌體顆粒的粒徑分布情況及整體濃度;流式細(xì)胞儀可測定的粒徑大小為150nm以上,并不適合檢測游離的外泌體顆粒。英瀚斯生物采用基于馬爾文Nanosight平臺的納米顆粒追蹤分析 (Nanoparticle Tracking Analysis, NTA) 技術(shù),快速、精細(xì)地分析外泌體粒徑分布濃度,為外泌體存在提供有力證據(jù)。目前外泌體的提取方法主要可歸納為以下六種:一是超速離心法;二是過濾離心;三是密度梯度離心法;四是免疫磁珠法;五是PS親和法;六是色譜法。外泌體提取試劑盒,南京英瀚斯。
外泌體中發(fā)現(xiàn)了一種特定的內(nèi)泌體蛋白質(zhì)亞群,表明外泌體發(fā)育過程中存在分選機(jī)制。轉(zhuǎn)運(yùn)所需的內(nèi)體分選復(fù)合物(ESCRT)被普遍 認(rèn)為是調(diào)控和引導(dǎo)特定分子進(jìn)入MVBs腔內(nèi)囊泡的途徑。ESCRT,其4個主要復(fù)合物(ESCRT0,I,II,和III)負(fù)責(zé)傳遞用于溶酶體降解和蛋白質(zhì)回收的泛素化蛋白。比較近的研究表明,特異性ESCRT家族蛋白的缺失可以改變外泌體的蛋白質(zhì)含量和細(xì)胞釋放外泌體的速率。更有趣的是,ESCRT系統(tǒng)的組件,如TSG101和Alix,被發(fā)現(xiàn)富集于外泌體,因此被用作外泌體鑒定的標(biāo)記物。外泌體存在于人類或動物的各種體液中。天津?qū)iT做外泌體實(shí)驗(yàn)
外泌體提取,超離法是比較常用的外泌體純化手段。海南靠譜的外泌體多少錢
外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實(shí)驗(yàn),難以***普及。外泌體是大多數(shù)細(xì)胞分泌的40 - 150nm的膜泡,存在于細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、血清、唾液、尿液、羊水和惡性腹水等生物液體中。外泌體檢測可找英瀚斯生物,測序、電鏡、粒徑分析都可做。海南靠譜的外泌體多少錢