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企業(yè)商機(jī)
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)基本參數(shù)
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標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)企業(yè)商機(jī)

大腸桿菌系統(tǒng)通常是小分子細(xì)胞質(zhì)蛋白或結(jié)構(gòu)域表達(dá)的宿主。用大腸桿菌生產(chǎn)蛋白質(zhì),由于只需要簡(jiǎn)單的培養(yǎng)基和條件,因此費(fèi)用低且方便。此外,除了無(wú)細(xì)胞表達(dá),它是速度的系統(tǒng),大腸桿菌倍增時(shí)間(約20min)比酵母(2h)、昆蟲細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞都快。一般來(lái)說(shuō),在大腸桿菌中表達(dá)重組蛋白包括:1.將一個(gè)編碼目標(biāo)蛋白的質(zhì)粒導(dǎo)入宿主菌;2.培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期;3.誘導(dǎo)蛋白表達(dá)。選擇合適的表達(dá)載體合適的宿主選定后,相應(yīng)的有許多工程化克隆位點(diǎn)和用于驅(qū)動(dòng)蛋白表達(dá)的非編碼序列的載體可用。啟動(dòng)子通常是可誘導(dǎo)的,以在細(xì)胞生長(zhǎng)到合適的密度前阻止目標(biāo)蛋白表達(dá)。大部分載體還提供目標(biāo)蛋白與一系列蛋白標(biāo)簽構(gòu)建融合蛋白的選擇。常用的大腸桿菌表達(dá)載體分為以下兩大類:E.coliRNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的載體在生物制藥工業(yè)中,腸激酶用于生產(chǎn)重組蛋白質(zhì)藥物,通過(guò)專一性切割去除不需要的序列,提高藥物純度和活性。Recombinant Rat GDF15 Protein,His Tag

Recombinant Rat GDF15 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

重組腸激酶(rEK)是一種高純度的重組牛腸激酶輕鏈片段,氨基酸序列與牛腸激酶輕鏈一致,有著和天然提取的腸激酶同樣特異的酶切位點(diǎn),切割位點(diǎn)Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合標(biāo)簽,同時(shí)重組腸激酶(rEK)具有比天然酶更高的切割活性。重組腸激酶為采用重組大腸桿菌分泌表達(dá)的高純度、高活性、高特異的牛腸激酶,不含其他蛋白酶,可以在較寬pH范圍(4.5-9.5)和較寬溫度范圍內(nèi)有效切割融合蛋白,并且在各種去垢劑和變性劑存在的條件下仍具有部分活性。本品不含標(biāo)簽,由于具有極高酶切活性,酶切反應(yīng)使用量少,不影響下游蛋白應(yīng)用,可不考慮除去。產(chǎn)品信息規(guī)格100U/200U/500U/1000U/5000U產(chǎn)品性質(zhì)來(lái)源(Source)大腸桿菌表達(dá)分子量(MolecularWeight)理論值25.85kDa外觀(Appearance)澄清、無(wú)色至淡黃色液體酶濃度(EnzymeConcentration)≥5U/uL活性定義(ActivityDefinition)一個(gè)活性單位定義為25°C,12-16h,Recombinant Human GPA33/A33 Protein,His-Avi Tagα-凝血酶(α-Thrombin)可以啟動(dòng)XIII因子和血小板,或者用作血管收縮劑。

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性能參數(shù)表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)CynomolgusCD27Ligand/CD70ProteinisexpressedfromHEK293withHistagattheN-terminal.ItcontainsGln39-Pro194.[Accession|G7PYU6-1]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof18.4kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto60-90kDabasedonTris-BisPAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperugbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbyTris-BisPAGE活性(Activity)ELISAData:ImmobilizedCynomolgusCD27Ligand,HisTagat2μg/ml(100μl/well)ontheplate.DoseresponsecurveforCynomolgus/RhesusmacaqueCD27,hFcTagwiththeEC50of70.8ng/mldeterminedbyELISA.制劑(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法(Reconstitution)Centrifugetubesbeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.

3C樣蛋白酶(3CLpro)或主要蛋白酶(Mpro),正式名稱為C30內(nèi)肽酶或3-胰凝乳蛋白酶樣蛋白酶,[2]是在冠狀病毒中發(fā)現(xiàn)的主要蛋白酶。它在11個(gè)保守位點(diǎn)切割冠狀病毒多蛋白。它是一種半胱氨酸蛋白酶,是蛋白酶PA家族的成員。它在其活性位點(diǎn)具有半胱氨酸-組氨酸催化二聯(lián)體并裂解Gln–(Ser/Ala/Gly)肽鍵。酶委員會(huì)將這個(gè)家族稱為SARS冠狀病毒主要蛋白酶(Mpro;EC3.4.22.69)。3CL蛋白酶對(duì)應(yīng)于冠狀病毒非結(jié)構(gòu)蛋白5(nsp5)。通用名中的“3C”指的是3C蛋白酶(3Cpro),是一種在小核糖核酸病毒中發(fā)現(xiàn)的同源蛋白酶。3C樣蛋白酶能夠催化裂解P1位谷氨酰胺和P1'位小氨基酸(絲氨酸、丙氨酸或甘氨酸)之間的肽鍵。例如,SARS冠狀病毒3CLpro可以自我切割以下肽:[3][4][5]TSAVLQ-SGFRK-NH2和SGVTFQ-GKFKK是對(duì)應(yīng)于SARS3C樣蛋白酶的兩個(gè)自切割位點(diǎn)的兩個(gè)肽該蛋白酶在冠狀病毒復(fù)制酶多蛋白(P0C6U8)的加工過(guò)程中很重要。它是冠狀病毒中的主要蛋白酶,對(duì)應(yīng)于非結(jié)構(gòu)蛋白5(nsp5)。[6]它在11個(gè)保守位點(diǎn)切割冠狀病毒多蛋白。3CL蛋白酶在其活性位點(diǎn)具有半胱氨酸-組氨酸催化二元組。[4]半胱氨酸的硫作為親核試劑,組氨酸的咪唑環(huán)作為一般堿基。α-凝血酶的多面性質(zhì)在其臨床使用中提出了挑戰(zhàn),特別是在平衡其止血效果與血栓形成風(fēng)險(xiǎn)之間。

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AngiotensinIConvertingEnzyme(ACE-2),alsocalledACEH(ACEhomologue),isadimeric,zinc-dependentmetalloproteaseoftheACEfamilythatalsoincludessomaticandgerminalACE.ACE-2mRNAisfoundathighlevelsinheart,testis,andkidneyandatlowerlevelsinawidevarietyoftissues.ACE-2istheSARS-CoVandSARS-CoV2Spikeproteinreceptorinvivo,functionscatalyticallyasacarboxypeptidasetocleaveseveralsubstratesincludingangiotensinsIandII,andactsasapartnerforB0AT1-familyaminoacidtransporters.Throughthesefunctions,ACE-2hasbeenshowntobeinvolvedinseveraldiseasesincludingSARS,COVID19,acutelunginjury,heartdisease,liverandlungfibrosis,inflammatorylungdisease,andcardiopulmonarydisease.FulllengthACE-2proteinincludesanextracellularregioncomposedofasingleN-terminalpeptidasedomainandC-terminalcollectrin-likedomain(CLD),atransmembranedomain,andashortcytoplasmictail.TheN-terminalpeptidaseregionisrequiredforbindingtoSARS-CoVandSARS-CoV2spikeproteins,whiletheCLDcontainsaregionthatpromotesdimerizationandassociationwithaminoacidtransporters.SDF-1同工型與細(xì)胞表面上的CXCR4和CXCR7受體相互作用,也可以結(jié)合Syndecan-4。Recombinant Human PDGF-AA Protein

在體內(nèi),活化的X因子(Factor Xa)切割凝血酶原,釋放出活性肽并將凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。Recombinant Rat GDF15 Protein,His Tag

Trop-2,alsoknownasepithelialglycoprotein-1antigen(EGP-1),isaproteinthatinhumansisencodedbytheTACSTD2gene.Mutationsofthisgeneresultingelatinousdrop-likecornealdystrophy,anautosomalrecessivedisordercharacterizedbyseverecornealamyloidosisleadingtoblindness.產(chǎn)品性質(zhì)別名EGP1;EGP-1;TROP2;GA733-1;gp50;T16;TACSTD2;TROP-2;M1S1;TACD2UniprotNo.P09758表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)RecombinantBiotinylatedHumanTROP-2/TACSTD2ProteinisexpressedfromHEK293cellswithHistagandAvitagattheC-terminal.ItcontainsHis27-Thr274.分子量TheproteinhasapredictedMWof30.5kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto46-55kDabasedonTris-BisPAGEresult.純度>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC活性ELISAData:ImmobilizedAnti-TROP-2Antibody,hFcTagat0.5μg/mL(100μL/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanTROP-2,HisTagwiththeEC50of24.1ng/mLdeterminedbyELISA.0EUper1μgoftheproteinbytheLALmethod.制劑Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally5%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.Recombinant Rat GDF15 Protein,His Tag

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