利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到編碼土豆羧肽酶抑制劑(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato,CPI)活性多肽基因,克隆于表達(dá)載體pGEX一4T一1的多克隆位點(diǎn)中,得到重組質(zhì)粒pGCPI,測序后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體茵EscherichiacoliBL21中。重組茵經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),超聲波破茵后,通過谷胱甘肽sepheroseFF親和層析柱一步純化得到融合蛋白,純度大于97%。融合蛋白經(jīng)凝血酶切割并分離除去谷胱甘肽一S一轉(zhuǎn)移酶后得到純度大于98%的重組CPI,ELISA鑒定產(chǎn)物具有免疫原性,體外檢測表明其促進(jìn)纖溶的生物功能與天然CPI無明顯差異。腸激酶作為研究工具,用于探索蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)-功能關(guān)系,以及在蛋白質(zhì)工程中進(jìn)行蛋白質(zhì)的定點(diǎn)突變。Recombinant Human TNF-alpha Protein,His tag
3C蛋白酶(3C Protease),也稱為3Cpro或3C樣蛋白酶(3CLpro),是一類在RNA病毒復(fù)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用的酶。它們負(fù)責(zé)切割病毒的多聚蛋白前體,從而釋放出成熟的病毒蛋白,這些蛋白對于病毒的復(fù)制和組裝至關(guān)重要。3C蛋白酶在多種病毒中都有發(fā)現(xiàn),包括冠狀病毒、小RNA病毒等。結(jié)構(gòu)與功能3C蛋白酶通常具有特定的酶切位點(diǎn),能夠識別并切割特定的氨基酸序列。例如,小RNA病毒科的3C蛋白酶識別位點(diǎn)為Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro,切割位點(diǎn)位于谷氨酰胺(Gln)和甘氨酸(Gly)之間,稱為Q-G位點(diǎn)4。抗病毒藥物開發(fā)3C蛋白酶因其在病毒生命周期中的關(guān)鍵作用,成為抗病毒藥物開發(fā)的重要靶點(diǎn)。通過抑制3C蛋白酶的活性,可以有效阻斷病毒的復(fù)制過程。例如,SARS-CoV-2(病毒)的3CLpro是抗冠狀病毒藥物的重要靶點(diǎn),西湖大學(xué)胡奇團(tuán)隊(duì)等合作揭示了SARS-CoV-2 3CLpro潛在耐藥機(jī)制,為解決潛在的耐藥問題提供了重要信息3。耐藥性研究隨著3CLpro抑制劑的使用,其耐藥問題也日益受到關(guān)注。研究表明,3CLpro的某些突變可能導(dǎo)致病毒對抑制劑產(chǎn)生耐藥性。Protease-Activated Receptor-4RANTES是CC趨化因子,可以通過CCR1,CCR3,CCR5和US28(巨細(xì)胞病毒受體)受體發(fā)出信號。
RecombinantBiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling),hFcTag性能參數(shù)分子別名(Synonyms)OX40Lreceptor;CD134;TNFRSF4;Ly-70表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling)isexpressedfromHEK293withhFctagattheC-Terminus.ItcontainsLeu29-Ala216.[Accession|P43489]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof46.8kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto72-75kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGE制劑(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).儲存條件Theproductshouldbestoredat-85~-65℃for1yearfromdateofreceipt.Recommendtoaliquottheproteinintosmallerquantitieswhenfirstusedandavoidrepeatedfreeze-thawcycles.
產(chǎn)品描述纖維蛋白原(Fibrinogen,F(xiàn)g),即凝血因子I,分子量約340kDa,由α、β、γ三對不同多肽鏈組成,多肽鏈間以二硫鍵相連。α鏈分子量63.5kDa,β鏈分子量56kDa,γ鏈分子量47kDa,纖維蛋白原約含4%碳水化合物。纖維蛋白原參與凝血的原理:在凝血酶作用下,α鏈與β鏈分別釋放出A肽與B肽,生成纖維蛋白單體。在此過程中,由于釋放了酸性多肽,負(fù)電性降低,單體易于聚合成纖維蛋白多聚體,但此時(shí)單體之間借氫鍵與疏水鍵相連,尚可溶于稀酸和尿素溶液中。進(jìn)一步在Ca2+與活化的ⅩⅢ因子作用下,單體之間以共價(jià)鍵相連,則變成穩(wěn)定的不溶性纖維蛋白凝塊,完成凝血過程。來源于不同物種(如來源于牛、貓、狗、豚鼠、人、綿羊、小鼠和大鼠等)的纖維蛋白原具有相似的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。因此,一般來源于一種哺乳動(dòng)物的纖維蛋白原可與其他來源的凝血酶交叉反應(yīng),相反地來自一種哺乳動(dòng)物蛋白的凝血酶液也可注入多種動(dòng)物,發(fā)生凝血反應(yīng)。eotaxin-2還具有抑制髓樣細(xì)胞增殖的能力,髓樣細(xì)胞增殖是Eotaxin不共有的生物學(xué)功能。
Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大腸桿菌表達(dá)重組腸激酶(不帶標(biāo)簽)注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品所講述的緩沖體系需要自行配置。2.不建議37℃條件下酶切,可能會(huì)有非特異性酶切出現(xiàn)。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切會(huì)受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,為獲得理想的酶切結(jié)果,請先將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中,然后再進(jìn)行酶切實(shí)驗(yàn);若不方便透析,可將樣品稀釋到咪唑含量在100mM以下,NaCl濃度在50mM以下,甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切,酶的用量與蛋白比例不變;若干擾因素很多,且不便去除,需要適當(dāng)增加酶量或延長酶切時(shí)間,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸鹽對Enterokinase有很強(qiáng)的抑制作用,痕量的磷酸鹽都會(huì)嚴(yán)重影響Enterokinase的活性,因此在酶切體系內(nèi)不能存在磷酸鹽。5.本品是具有高酶活力重組腸激酶,切割蛋白使用量少,可不考慮除去。后續(xù)如需去除重組腸激酶,可用陰離子交換樹脂(如DEAE-FF)對其進(jìn)行洗脫。推薦洗脫條件如下:平衡緩沖液:25mMTris-HClpH8.0洗脫緩沖液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可適當(dāng)增加酶量,或適當(dāng)延長酶切時(shí)間。通過泛素-蛋白體途徑(UPP)中的酶與底物蛋白共價(jià)連接,并在26S蛋白體降解ATP依賴的細(xì)胞蛋白中發(fā)揮主要作用。Recombinant Human Interferon omega-1 Protein,His Tag
UbcH3還有兩個(gè)泛素結(jié)合位點(diǎn)UBS1(來自aa 205-215)和UBS2(來自aa 216-225),以及一個(gè)c端酸性尾部結(jié)構(gòu)域。Recombinant Human TNF-alpha Protein,His tag
AngiotensinIConvertingEnzyme(ACE-2),alsocalledACEH(ACEhomologue),isadimeric,zinc-dependentmetalloproteaseoftheACEfamilythatalsoincludessomaticandgerminalACE.ACE-2mRNAisfoundathighlevelsinheart,testis,andkidneyandatlowerlevelsinawidevarietyoftissues.ACE-2istheSARS-CoVandSARS-CoV2Spikeproteinreceptorinvivo,functionscatalyticallyasacarboxypeptidasetocleaveseveralsubstratesincludingangiotensinsIandII,andactsasapartnerforB0AT1-familyaminoacidtransporters.Throughthesefunctions,ACE-2hasbeenshowntobeinvolvedinseveraldiseasesincludingSARS,COVID19,acutelunginjury,heartdisease,liverandlungfibrosis,inflammatorylungdisease,andcardiopulmonarydisease.FulllengthACE-2proteinincludesanextracellularregioncomposedofasingleN-terminalpeptidasedomainandC-terminalcollectrin-likedomain(CLD),atransmembranedomain,andashortcytoplasmictail.TheN-terminalpeptidaseregionisrequiredforbindingtoSARS-CoVandSARS-CoV2spikeproteins,whiletheCLDcontainsaregionthatpromotesdimerizationandassociationwithaminoacidtransporters.Recombinant Human TNF-alpha Protein,His tag
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,...