Hot-Start Taq DNA Polymerase:助力高特異性PCR擴(kuò)增在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)是不可或缺的工具,而Taq DNA聚合酶作為PCR反應(yīng)的酶,其性能直接影響擴(kuò)增結(jié)果的準(zhǔn)確性和效率。近年來(lái),Hot-Start Taq DNA Polymerase憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)Hot-Start Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)過(guò)特殊處理的Taq DNA聚合酶,通過(guò)化學(xué)修飾或結(jié)合溫度敏感的抑制劑,能夠在低溫條件下抑制酶的活性,從而避免非特異性擴(kuò)增的發(fā)生。這種設(shè)計(jì)使得反應(yīng)體系在室溫下組裝時(shí),引物不會(huì)因非特異性結(jié)合而導(dǎo)致錯(cuò)誤擴(kuò)增,顯著提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。其主要特點(diǎn)包括:高特異性:通過(guò)抑制低溫下的酶活性,有效避免引物二聚體和非特異性結(jié)合,從而提高擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性。高靈敏度:即使在低拷貝數(shù)的模板中,也能高效擴(kuò)增目標(biāo)片段。操作簡(jiǎn)便:無(wú)需額外的高溫步驟,反應(yīng)體系可在室溫下直接組裝。兼容性強(qiáng):適用于多種復(fù)雜的模板,如富含AT的DNA和經(jīng)過(guò)亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA。
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 則是提升PCR特異性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)技術(shù)和熒光染料,為效率、準(zhǔn)確的基因擴(kuò)增提供了強(qiáng)大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Hot-Start Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs、增強(qiáng)劑以及熒光染料。其優(yōu)點(diǎn)在于熱啟動(dòng)技術(shù)的應(yīng)用。通過(guò)在常溫下抑制Taq酶活性,該預(yù)混液有效避免了非特異性擴(kuò)增和引物二聚體的形成,從而提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。這種特性尤其適用于復(fù)雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴(kuò)增,以及對(duì)特異性要求較高的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。熒光染料的加入是該預(yù)混液的另一大亮點(diǎn)。這種染料在PCR過(guò)程中能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)DNA的擴(kuò)增情況,通過(guò)熒光信號(hào)的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。這種“即用型”預(yù)混液不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,還減少了人為操作帶來(lái)的污染風(fēng)險(xiǎn),尤其適合高通量的基因檢測(cè)和定量分析。此外,該預(yù)混液的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。Recombinant Human Eotaxin-2/CCL24與一些其他 DNA 聚合酶不同,T4 DNA 聚合酶不具有 5’→3’外切酶活性,不會(huì)對(duì) DNA 鏈的 5’端進(jìn)行切割和修飾。
dUTP,100mMSolution:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的高效工具dUTP(2'-脫氧尿苷5'-三磷酸)是一種重要的核苷酸,應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中。其100mM溶液形式為研究人員提供了便捷、高效的實(shí)驗(yàn)材料,尤其在PCR、qPCR、RT-PCR等技術(shù)中表現(xiàn)出色。產(chǎn)品特點(diǎn)高純度與穩(wěn)定性dUTP溶液的純度≥99%(HPLC檢測(cè)),且不含DNase、RNase等雜質(zhì),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。其以鈉鹽形式存在,用超純水配制,pH值調(diào)節(jié)至7.0左右,具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性。即用型設(shè)計(jì)該產(chǎn)品為即用型溶液,濃度為100mM,無(wú)需額外稀釋或處理,可直接用于多種分子生物學(xué)反應(yīng)。防污染機(jī)制dUTP常用于替代dTTP,使擴(kuò)增產(chǎn)物中包含尿嘧啶。結(jié)合尿嘧啶-N-糖基酶(UNG)使用時(shí),可有效去除殘留的PCR產(chǎn)物污染,避免假陽(yáng)性結(jié)果。性能與應(yīng)用實(shí)驗(yàn)應(yīng)用dUTP適用于多種DNA合成反應(yīng),包括PCR、qPCR、RT-PCR、cDNA合成、引物延伸、DNA測(cè)序和標(biāo)記等。其在PCR中的應(yīng)用尤為突出,通過(guò)引入尿嘧啶,可降低交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件dUTP溶液的pH值和濃度經(jīng)過(guò)優(yōu)化,適合與多種酶(如TaqDNA聚合酶)配合使用,確保反應(yīng)體系的高效性和特異性。
SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus):高效、特異且防污染的qPCR解決方案SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus) 是一種為實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料、低濃度ROX校正染料以及UDG防污染系統(tǒng),能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異且防污染的基因定量檢測(cè)。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測(cè)靈敏度。低濃度ROX校正:含有低濃度ROX染料,適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。UDG防污染系統(tǒng):預(yù)混液中包含UDG酶和dUTP,可在PCR反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止交叉污染。操作簡(jiǎn)便:2×預(yù)混液設(shè)計(jì),只需加入引物和模板即可進(jìn)行反應(yīng),減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)。快速反應(yīng):優(yōu)化的反應(yīng)體系支持快速qPCR程序,可在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè),提高實(shí)驗(yàn)效率。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。病原體檢測(cè):快速檢測(cè)病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析:通過(guò)qPCR實(shí)現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR:可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)基因。Tn5 轉(zhuǎn)座酶能夠特異性識(shí)別轉(zhuǎn)座子兩端反向重復(fù)的 ME 序列,對(duì)目標(biāo) DNA 的識(shí)別具有高度特異性。
高密度設(shè)計(jì),確保樣品沉降6×DNALoadingBuffer是一種六倍濃縮的上樣緩沖液,其主要成分包括甘油或蔗糖等高密度物質(zhì)。這些成分能夠增加樣品的密度,使DNA樣品在加樣后能夠迅速沉入瓊脂糖凝膠的加樣孔底部,避免樣品漂浮,從而確保電泳過(guò)程的順利進(jìn)行。雙色指示劑,直觀監(jiān)控電泳進(jìn)程該緩沖液通常含有兩種示蹤染料——溴酚藍(lán)和二甲苯青。溴酚藍(lán)的遷移速度接近300bp的雙鏈DNA,而二甲苯青的遷移速度則接近4-5kb的雙鏈DNA。通過(guò)觀察這兩種染料的遷移情況,研究人員可以直觀地判斷電泳的進(jìn)程,從而避免電泳時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或不足。穩(wěn)定樣品,防止降解6×DNALoadingBuffer中還含有EDTA等成分,能夠螯合鎂離子,防止核酸酶對(duì)DNA的降解,從而保護(hù)DNA樣品的完整性。此外,其配方優(yōu)化后,能夠在電泳過(guò)程中維持DNA的穩(wěn)定狀態(tài),確保電泳結(jié)果的可靠性。兼容性強(qiáng),適用范圍廣6×DNALoadingBuffer適用于多種類型的核酸電泳,包括瓊脂糖凝膠電泳和非變性丙烯酰胺凝膠電泳。其優(yōu)化的配方使其在不同濃度的瓊脂糖凝膠中均能表現(xiàn)出良好的性能,且與常見(jiàn)的電泳緩沖液(如TAE和TBE)完全兼容。Hot-Start Taq DNA Polymerase 的優(yōu)勢(shì)在于其獨(dú)特的熱啟動(dòng)機(jī)制。該酶結(jié)合了一種溫度敏感的抑制劑。Recombinant Human GIP Protein,hFc Tag
Uracil-DNA Glycosylase (UDG) 是一種在DNA修復(fù)過(guò)程中起作用的酶,其主要功能是識(shí)別并去除DNA中的尿嘧啶堿基。Recombinant Human Sigle3/CD33(hFc Tag)
Phusion DNA Polymerase 是一種高性能的熱穩(wěn)定DNA聚合酶,以其保真度、快速擴(kuò)增能力和強(qiáng)大的反應(yīng)穩(wěn)定性而聞名,被廣應(yīng)用于分子生物學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。Phusion DNA Polymerase 的重要優(yōu)點(diǎn)在于其高保真性。其錯(cuò)誤率比Taq DNA聚合酶低50倍以上,比Pfu DNA聚合酶低6倍。這種高保真性使其成為克隆、測(cè)序模板制備、突變分析以及長(zhǎng)片段或高GC含量模板擴(kuò)增等應(yīng)用的理想選擇。此外,Phusion酶的獨(dú)特結(jié)構(gòu)融合了類似Pyrococcus來(lái)源的酶和增強(qiáng)持續(xù)合成能力的結(jié)構(gòu)域,使其在擴(kuò)增速度和穩(wěn)定性方面表現(xiàn)出色。Phusion DNA Polymerase 的另一個(gè)特點(diǎn)是其快速擴(kuò)增能力。其延伸速度可達(dá)15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍。這種高速擴(kuò)增能力不僅提高了實(shí)驗(yàn)效率,還減少了因長(zhǎng)時(shí)間反應(yīng)導(dǎo)致的非特異性擴(kuò)增。Phusion DNA Polymerase 還具有強(qiáng)大的反應(yīng)穩(wěn)定性和多功能性。它能夠高效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)20 kb的DNA片段,并且對(duì)復(fù)雜的高GC含量模板表現(xiàn)出色。此外,Phusion酶還提供熱啟動(dòng)版本,進(jìn)一步減少了非特異性擴(kuò)增,適合高通量PCR和自動(dòng)化應(yīng)用。Phusion DNA Polymerase 的應(yīng)用范圍廣,包括常規(guī)PCR、長(zhǎng)片段擴(kuò)增、高通量PCR、克隆和測(cè)序模板制備等。其配套的優(yōu)化緩沖液和GC增強(qiáng)劑使其能夠適應(yīng)各種復(fù)雜的模板和反應(yīng)條件。Recombinant Human Sigle3/CD33(hFc Tag)
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過(guò)添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測(cè)手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過(guò)程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,...