Pfu DNA聚合酶是一種從嗜熱古細菌 Pyrococcus furiosus 中提取的高保真DNA聚合酶,因其準確性和熱穩(wěn)定性而被廣應用于分子生物學研究。Pfu DNA聚合酶具有5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,這種獨特的校正功能使其能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,從而提高擴增的保真性。與Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,其保真性是Taq酶的10倍以上。這種高保真性使其成為需要準確擴增的實驗(如基因克隆、突變研究和測序準備)的理想選擇。此外,Pfu DNA聚合酶具有出色的熱穩(wěn)定性,能夠在95°C的高溫下保持活性,適合PCR反應的高溫變性步驟。其擴增產(chǎn)物為平末端,適用于平末端克隆,但需注意,Pfu酶擴增的DNA片段不適合常規(guī)的T載體克隆。Pfu DNA聚合酶的應用領域廣,包括高保真PCR、基因克隆、點突變、全基因合成以及高質(zhì)量測序樣本的準備。它還常與其他酶(如Taq酶)聯(lián)合使用,以結合高保真性和快速擴增的優(yōu)點??傊?,Pfu DNA聚合酶憑借其高保真性、熱穩(wěn)定性和廣的應用場景,已成為分子生物學實驗中不可或缺的工具,為科學研究提供了強有力的支持。這種染料能夠在PCR過程中實時監(jiān)測DNA的擴增情況,通過熒光信號的強度變化反映目標基因的擴增程度。Recombinant Human IFN alpha/beta R1 Protein,His-Avi Tag
在分子生物學研究中,RNA的完整性分析是評估RNA質(zhì)量和功能的重要環(huán)節(jié)。10×RNALoadingBuffer作為一種高效、便捷的上樣緩沖液,在RNA電泳實驗中發(fā)揮著不可或缺的作用。本文將詳細介紹10×RNALoadingBuffer的產(chǎn)品特點和性能。一、產(chǎn)品特點高濃度設計10×RNALoadingBuffer是一種10倍濃縮的上樣緩沖液,使用時需稀釋至1×。這種高濃度設計減少了試劑的使用量,同時保證了樣品在電泳過程中的穩(wěn)定性和均勻性。示蹤染料的雙重指示該緩沖液含有溴酚藍(BromophenolBlue)和二甲苯青(XyleneCyanolFF)兩種示蹤染料。溴酚藍在1.2%甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳中與約500個堿基的RNA遷移速率相當,而二甲苯青則與約5000個堿基的RNA遷移速率相當。這種雙重示蹤設計能夠直觀地反映電泳的進程,幫助實驗人員準確判斷RNA的遷移情況。無RNase污染RNA分子對RNase極為敏感,因此在RNA實驗中,避免RNase污染是關鍵。10×RNALoadingBuffer經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制,確保無RNase雜質(zhì)污染,從而保證RNA樣品的完整性。適用性該緩沖液適用于多種類型的RNA樣品,包括總RNA、小RNA以及特定RNA的片段的電泳分析。它不僅可用于甲醛變性的瓊脂糖凝膠電泳,也適用于非變性電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳。Recombinant Human CD155/PVR Protein,mFc TagMultiplex Probe qPCR Mix 已預混了低濃度ROX參比染料,適用于需要低濃度ROX校正的熒光定量PCR儀 。
一、產(chǎn)品特點(一)高靈敏度該qPCR Mix采用了先進的熱啟動Taq酶技術,通過化學修飾將酶活性鎖定在低溫條件下,在PCR反應的高溫變性階段釋放活性。這一特性有效避免了非特異性擴增,顯著提高了反應的靈敏度,即使對于低豐度的靶基因,也能實現(xiàn)檢測。例如,在檢測稀有突變基因時,其高靈敏度能夠確保即使在野生型基因背景中含量極低的突變基因也能被準確識別,為病痛早期篩查等研究提供了有力支持。(二)高特異性其獨特的緩沖體系經(jīng)過優(yōu)化,能夠精確調(diào)控引物與模板的結合過程。在反應過程中,該體系可有效減少引物二聚體的形成,同時增強引物與目標模板的特異性結合能力。這使得在復雜的基因組背景下,目標基因得以高效擴增,從而顯著提高了qPCR反應的特異性。在多基因家族成員的區(qū)分檢測中,這種高特異性優(yōu)勢尤為明顯,能夠避免因引物錯配導致的非目標基因擴增,確保實驗結果的準確性。
在分子生物學研究中,核酸染色是檢測DNA和RNA的關鍵步驟,而溴化乙錠(EthidiumBromide,EB)作為一種經(jīng)典的熒光染料,因其高效性和靈敏性被廣泛應用于核酸電泳、熒光分析等領域。產(chǎn)品特點高靈敏度與特異性EB是一種多環(huán)芳烴熒光小分子,能夠特異性地嵌入雙鏈DNA和RNA中。結合后,其熒光強度增強,雙鏈RNA和雙鏈DNA的熒光強度分別可增強21倍和25倍。這種特性使得EB能夠檢測到低至10ng的DNA條帶,非常適合用于微量核酸的檢測。多種應用EB不僅用于瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的核酸染色,還可以作為DNA聚合酶抑制劑,用于核酸的熒光分析實驗。此外,EB還可與吖啶橙聯(lián)合使用,用于區(qū)分活細胞、凋亡細胞和壞死細胞。便捷的使用方法10mg/ml的EB溶液是一種預制的儲存液,使用時只需稀釋至工作濃度(通常為0.5μg/ml),即可用于電泳前或電泳后的染色。例如,在瓊脂糖凝膠制備時,每100mL膠液中加入2-5μL的10mg/mlEB溶液即可。穩(wěn)定的儲存條件10mg/ml的EB溶液在室溫下避光保存即可,有效期可達1-2年。這種儲存條件使得EB溶液在實驗室中易于保存和管理。該聚合酶還被應用于病原體基因組的擴增測序,以及修復受損DNA模板中的尿嘧啶,從而提高擴增產(chǎn)物的特異性。
一、主要特點:免提取與高兼容性Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一種專為血液樣本設計的高效PCR預混液,能夠直接從全血或干血斑中擴增DNA,無需進行繁瑣的DNA提取和純化步驟。這種預混液含有高保真DNA聚合酶(如HemoTaq?或Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase),這些酶經(jīng)過優(yōu)化,能夠耐受血液中的各種抑制劑,包括抗凝劑(如EDTA、肝素、檸檬酸鈉)和濾紙中的化學物質(zhì)。此外,該預混液還具備的模板兼容性,能夠從多種抗凝劑保存的血液樣本中直接擴增DNA,適用于人類、小鼠等哺乳動物的全血樣本。二、性能:高保真性與長片段擴增Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)的優(yōu)勢之一是其高保真性。其DNA聚合酶的保真性高于普通Taq酶,接近Pfu DNA聚合酶,能夠確保擴增產(chǎn)物的準確性。這對于需要高精度的基因克隆和測序實驗尤為重要。此外,該預混液能夠擴增長達5kb甚至更長的DNA片段,適用于多種復雜的基因組分析。例如,它可以輕松擴增人類基因組中的長片段,如IL-6基因的4882bp片段。Pfu DNA Polymerase的熱穩(wěn)定性:Pfu DNA Polymerase在高溫下仍保持活性,適合高溫PCR反應。抗DXD單克隆抗體
該預混液適用于多種抗凝劑處理的血液樣本,但優(yōu)先推薦使用EDTA抗凝血,因為EDTA可以更好地抑制核酸降解。Recombinant Human IFN alpha/beta R1 Protein,His-Avi Tag
SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX) 是一種為實時熒光定量PCR(qPCR)設計的即用型預混液,適用于需要低濃度ROX校正染料的qPCR儀器。該產(chǎn)品結合了SYBR Green I熒光染料和優(yōu)化的反應體系,能夠實現(xiàn)有效、特異的基因定量檢測。產(chǎn)品特點有效熱啟動酶:采用化學修飾的Taq DNA聚合酶,結合抗體或化學修飾技術,有效抑制低溫下的非特異性擴增,提高反應的特異性和靈敏度。優(yōu)化的反應體系:包含優(yōu)化的qPCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I熒光染料和低濃度ROX,適用于多種qPCR儀器。低濃度ROX:適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。高靈敏度與寬線性范圍:能夠在寬廣的模板濃度范圍內(nèi)獲得良好的標準曲線,適合低豐度基因的檢測??傊?,SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX) 是一種有效、特異的qPCR試劑,適用于多種qPCR儀器,能夠明顯提高基因定量檢測的準確性和靈敏度。Recombinant Human IFN alpha/beta R1 Protein,His-Avi Tag
在分子生物學實驗中,PCR技術是基因擴增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,提高擴增產(chǎn)物的準確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,...