Hot-Start Taq DNA Polymerase:助力高特異性PCR擴(kuò)增在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)是不可或缺的工具,而Taq DNA聚合酶作為PCR反應(yīng)的酶,其性能直接影響擴(kuò)增結(jié)果的準(zhǔn)確性和效率。近年來(lái),Hot-Start Taq DNA Polymerase憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)Hot-Start Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)過(guò)特殊處理的Taq DNA聚合酶,通過(guò)化學(xué)修飾或結(jié)合溫度敏感的抑制劑,能夠在低溫條件下抑制酶的活性,從而避免非特異性擴(kuò)增的發(fā)生。這種設(shè)計(jì)使得反應(yīng)體系在室溫下組裝時(shí),引物不會(huì)因非特異性結(jié)合而導(dǎo)致錯(cuò)誤擴(kuò)增,顯著提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。其主要特點(diǎn)包括:高特異性:通過(guò)抑制低溫下的酶活性,有效避免引物二聚體和非特異性結(jié)合,從而提高擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性。高靈敏度:即使在低拷貝數(shù)的模板中,也能高效擴(kuò)增目標(biāo)片段。操作簡(jiǎn)便:無(wú)需額外的高溫步驟,反應(yīng)體系可在室溫下直接組裝。兼容性強(qiáng):適用于多種復(fù)雜的模板,如富含AT的DNA和經(jīng)過(guò)亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA。
AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型2×預(yù)混液,專為快速、有效的PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)。該預(yù)混液包含Hieff Canace® AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase、dNTPs、優(yōu)化的緩沖體系以及電泳指示染料,能夠明顯提高PCR反應(yīng)的速度和特異性。產(chǎn)品特點(diǎn)該預(yù)混液的重要優(yōu)勢(shì)在于其快速擴(kuò)增能力,擴(kuò)增速度可達(dá)15秒/kb,甚至在1 kb以內(nèi)的片段中,極限速度可達(dá)5秒/kb。此外,預(yù)混液中的高保真DNA聚合酶具有3'-5'外切酶活性,能夠有效降低錯(cuò)誤率,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。其優(yōu)化的緩沖體系和延伸因子使其能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)13 kb的片段,適用于復(fù)雜模板的擴(kuò)增。預(yù)混液中還添加了電泳指示染料,PCR產(chǎn)物可直接進(jìn)行電泳,無(wú)需額外添加上樣緩沖液。此外,該產(chǎn)品含有特異保護(hù)劑,即使經(jīng)過(guò)反復(fù)凍融,仍能保持穩(wěn)定的活性。應(yīng)用場(chǎng)景AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 廣應(yīng)用于常規(guī)PCR、基因克隆、復(fù)雜模板擴(kuò)增以及高通量建庫(kù)等場(chǎng)景。其快速擴(kuò)增能力和高特異性使其特別適合大規(guī)模基因檢測(cè)、菌落PCR以及微量DNA的檢測(cè)??傊?,AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 憑借其快速擴(kuò)增、高特異性和便捷性,為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了高效的解決方案,尤其適合需要快速結(jié)果和高通量操作的場(chǎng)景。Recombinant Human TRAIL R4/TNFRSF10D Protein,His-Avi Tag牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的反應(yīng)溫度為37°C。在這個(gè)溫度下,酶的活性高,能夠有效地進(jìn)行DNA的切割和連接。
在分子生物學(xué)研究中,核酸染色是檢測(cè)DNA和RNA的關(guān)鍵步驟,而溴化乙錠(EthidiumBromide,EB)作為一種經(jīng)典的熒光染料,因其高效性和靈敏性被廣泛應(yīng)用于核酸電泳、熒光分析等領(lǐng)域。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性EB是一種多環(huán)芳烴熒光小分子,能夠特異性地嵌入雙鏈DNA和RNA中。結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度增強(qiáng),雙鏈RNA和雙鏈DNA的熒光強(qiáng)度分別可增強(qiáng)21倍和25倍。這種特性使得EB能夠檢測(cè)到低至10ng的DNA條帶,非常適合用于微量核酸的檢測(cè)。多種應(yīng)用EB不僅用于瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的核酸染色,還可以作為DNA聚合酶抑制劑,用于核酸的熒光分析實(shí)驗(yàn)。此外,EB還可與吖啶橙聯(lián)合使用,用于區(qū)分活細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。便捷的使用方法10mg/ml的EB溶液是一種預(yù)制的儲(chǔ)存液,使用時(shí)只需稀釋至工作濃度(通常為0.5μg/ml),即可用于電泳前或電泳后的染色。例如,在瓊脂糖凝膠制備時(shí),每100mL膠液中加入2-5μL的10mg/mlEB溶液即可。穩(wěn)定的儲(chǔ)存條件10mg/ml的EB溶液在室溫下避光保存即可,有效期可達(dá)1-2年。這種儲(chǔ)存條件使得EB溶液在實(shí)驗(yàn)室中易于保存和管理。
高靈敏度與特異性該產(chǎn)品采用優(yōu)化的SYBRGreenI染料配方,能夠與雙鏈DNA特異性結(jié)合,即使在低拷貝數(shù)的目標(biāo)序列中也能實(shí)現(xiàn)高靈敏度檢測(cè)。其優(yōu)化的反應(yīng)體系確保了高效的擴(kuò)增效率,同時(shí)減少了非特異性產(chǎn)物的生成。低ROX參考染料產(chǎn)品中預(yù)混了低濃度的ROX參考染料,適用于多種qPCR儀器平臺(tái),無(wú)需額外添加或調(diào)整ROX濃度,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程,同時(shí)保證了熒光信號(hào)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。UDG防污染系統(tǒng)為了防止qPCR實(shí)驗(yàn)中的氣溶膠污染,該產(chǎn)品引入了dUTP/UDG防污染體系。UDG酶能夠降解含有dUTP的殘留DNA,從而有效避免假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn),確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性??焖俜磻?yīng)與模板兼容性SYBRGreenqPCRMix(2×,LowROX,UDGPlus)采用了高性能的熱啟動(dòng)TaqDNA聚合酶,能夠在短時(shí)間內(nèi)完成反應(yīng),同時(shí)兼容高GC或高AT含量的DNA模板,展現(xiàn)出優(yōu)異的擴(kuò)增性能。便捷的2×預(yù)混液設(shè)計(jì)該產(chǎn)品為2×濃度的預(yù)混液,包含qPCR所需的所有關(guān)鍵組分,如TaqDNA聚合酶、dNTPs、緩沖液等,需加入引物和模板即可進(jìn)行反應(yīng),簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I具有特異性識(shí)別能力,能夠識(shí)別雙鏈DNA中的5'-(C/T)CCTT-3'序列。
在分子生物學(xué)研究中,RNA的完整性和純度是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要因素。5×RNALoadingBuffer作為一種專為RNA非變性凝膠電泳設(shè)計(jì)的上樣緩沖液,憑借其獨(dú)特配方和性能,為RNA分析提供了可靠的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)高效沉降與指示功能5×RNALoadingBuffer的主要成分包括甘油、EDTA、溴酚藍(lán)和二甲苯青。甘油的高密度特性能夠使RNA樣品在凝膠電泳中順利沉入加樣孔,而溴酚藍(lán)和二甲苯青則作為指示劑,幫助實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)電泳進(jìn)程。無(wú)RNase污染該緩沖液經(jīng)過(guò)DEPC(焦碳酸二乙酯)處理,確保無(wú)RNase污染,從而有效保護(hù)RNA樣品免受降解,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。優(yōu)化的配方5×RNALoadingBuffer含有5mMEDTA,能夠螯合二價(jià)金屬離子,進(jìn)一步防止RNA在電泳過(guò)程中被降解。操作簡(jiǎn)便使用時(shí)只需將RNA樣品與1/4體積的5×RNALoadingBuffer混合,即可直接上樣電泳。這種簡(jiǎn)便的操作流程提高了實(shí)驗(yàn)效率。適用性該緩沖液適用于多種類(lèi)型的RNA樣品,包括小分子RNA和長(zhǎng)鏈RNA,且在非變性條件下能夠保持RNA的天然結(jié)構(gòu)。穩(wěn)定的保存條件5×RNALoadingBuffer在-20℃條件下可保存兩年,室溫運(yùn)輸也不會(huì)影響其性能,這為實(shí)驗(yàn)室的長(zhǎng)期使用提供了便利。Phusion DNA Polymerase 應(yīng)在后面加入反應(yīng)體系中,以避免其3'-5'外切酶活性降解引物。Recombinant Human IL-3 Protein
Pfu DNA Polymerase具有3′-5′外切酶活性,能夠在DNA擴(kuò)增過(guò)程中糾正堿基錯(cuò)配,是Taq DNA Polymerase的6-8倍。Recombinant Cynomolgus IL-13 Protein,His Tag
Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl):高效除PCR污染的關(guān)鍵酶在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)的應(yīng)用極為廣,但PCR產(chǎn)物的交叉污染問(wèn)題一直是影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具,憑借其獨(dú)特的性能和廣的應(yīng)用,已成為解決這一問(wèn)題的理想選擇。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效,但對(duì)RNA或長(zhǎng)度不超過(guò)6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無(wú)活性。防止PCR產(chǎn)物污染UDG的主要應(yīng)用之一是防止PCR產(chǎn)物的交叉污染。通過(guò)在PCR反應(yīng)中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR產(chǎn)物,UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA,從而防止其在后續(xù)反應(yīng)中作為模板被擴(kuò)增。反應(yīng)條件兼容性UDG在pH8.0左右表現(xiàn)出活性,且不需要二價(jià)陽(yáng)離子,可在較寬的pH范圍內(nèi)工作。它對(duì)高離子強(qiáng)度(>200mM)敏感,因此在使用時(shí)需注意反應(yīng)體系的離子濃度。Recombinant Cynomolgus IL-13 Protein,His Tag
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過(guò)添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測(cè)手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過(guò)程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,...