Hot-Start Taq DNA Polymerase:助力高特異性PCR擴(kuò)增在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)是不可或缺的工具,而Taq DNA聚合酶作為PCR反應(yīng)的酶,其性能直接影響擴(kuò)增結(jié)果的準(zhǔn)確性和效率。近年來(lái),Hot-Start Taq DNA Polymerase憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)Hot-Start Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)過(guò)特殊處理的Taq DNA聚合酶,通過(guò)化學(xué)修飾或結(jié)合溫度敏感的抑制劑,能夠在低溫條件下抑制酶的活性,從而避免非特異性擴(kuò)增的發(fā)生。這種設(shè)計(jì)使得反應(yīng)體系在室溫下組裝時(shí),引物不會(huì)因非特異性結(jié)合而導(dǎo)致錯(cuò)誤擴(kuò)增,顯著提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。其主要特點(diǎn)包括:高特異性:通過(guò)抑制低溫下的酶活性,有效避免引物二聚體和非特異性結(jié)合,從而提高擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性。高靈敏度:即使在低拷貝數(shù)的模板中,也能高效擴(kuò)增目標(biāo)片段。操作簡(jiǎn)便:無(wú)需額外的高溫步驟,反應(yīng)體系可在室溫下直接組裝。兼容性強(qiáng):適用于多種復(fù)雜的模板,如富含AT的DNA和經(jīng)過(guò)亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA。
在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)已成為基因表達(dá)分析、病毒檢測(cè)和基因定量的重要工具。其中,One Step RT-qPCR SYBR Green Kit憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),成為眾多科研工作者的優(yōu)先試劑盒。簡(jiǎn)化操作流程,降低污染風(fēng)險(xiǎn)One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用一步法反應(yīng)體系,將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在同一反應(yīng)管中完成。這種設(shè)計(jì)不僅簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作步驟,減少了人為誤差,還有效降低了因反復(fù)開蓋導(dǎo)致的樣品污染風(fēng)險(xiǎn)。例如,傳統(tǒng)的兩步法需要分別進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng),操作復(fù)雜且污染風(fēng)險(xiǎn)較高,而一步法試劑盒則避免了這些問(wèn)題。高靈敏度與高特異性該試劑盒使用高效的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖體系,能夠顯著提高反應(yīng)的靈敏度和特異性。其檢測(cè)靈敏度可達(dá)極低濃度的RNA樣本,例如在某些實(shí)驗(yàn)中,即使RNA濃度低至0.1 pg,也能實(shí)現(xiàn)精細(xì)檢測(cè)。此外,試劑盒中添加了抑制非特異性擴(kuò)增的組分,確保熔解曲線呈現(xiàn)單峰,進(jìn)一步提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。Recombinant Human I-TAC/CXCL11Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye) 以其高效、便捷和直觀的特點(diǎn),成為了分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的工具。
Pfu DNA聚合酶是一種從嗜熱古細(xì)菌 Pyrococcus furiosus 中提取的高保真DNA聚合酶,因其準(zhǔn)確性和熱穩(wěn)定性而被廣應(yīng)用于分子生物學(xué)研究。Pfu DNA聚合酶具有5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,這種獨(dú)特的校正功能使其能夠在DNA合成過(guò)程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,從而提高擴(kuò)增的保真性。與Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,其保真性是Taq酶的10倍以上。這種高保真性使其成為需要準(zhǔn)確擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)(如基因克隆、突變研究和測(cè)序準(zhǔn)備)的理想選擇。此外,Pfu DNA聚合酶具有出色的熱穩(wěn)定性,能夠在95°C的高溫下保持活性,適合PCR反應(yīng)的高溫變性步驟。其擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端,適用于平末端克隆,但需注意,Pfu酶擴(kuò)增的DNA片段不適合常規(guī)的T載體克隆。Pfu DNA聚合酶的應(yīng)用領(lǐng)域廣,包括高保真PCR、基因克隆、點(diǎn)突變、全基因合成以及高質(zhì)量測(cè)序樣本的準(zhǔn)備。它還常與其他酶(如Taq酶)聯(lián)合使用,以結(jié)合高保真性和快速擴(kuò)增的優(yōu)點(diǎn)??傊?,Pfu DNA聚合酶憑借其高保真性、熱穩(wěn)定性和廣的應(yīng)用場(chǎng)景,已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具,為科學(xué)研究提供了強(qiáng)有力的支持。
Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl):高效除PCR污染的關(guān)鍵酶在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)的應(yīng)用極為廣,但PCR產(chǎn)物的交叉污染問(wèn)題一直是影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具,憑借其獨(dú)特的性能和廣的應(yīng)用,已成為解決這一問(wèn)題的理想選擇。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效,但對(duì)RNA或長(zhǎng)度不超過(guò)6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無(wú)活性。防止PCR產(chǎn)物污染UDG的主要應(yīng)用之一是防止PCR產(chǎn)物的交叉污染。通過(guò)在PCR反應(yīng)中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR產(chǎn)物,UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA,從而防止其在后續(xù)反應(yīng)中作為模板被擴(kuò)增。反應(yīng)條件兼容性UDG在pH8.0左右表現(xiàn)出活性,且不需要二價(jià)陽(yáng)離子,可在較寬的pH范圍內(nèi)工作。它對(duì)高離子強(qiáng)度(>200mM)敏感,因此在使用時(shí)需注意反應(yīng)體系的離子濃度。提供了一種高效、便捷的血液樣本直接擴(kuò)增解決方案,特別適合需要快速檢測(cè)的場(chǎng)景。
一、產(chǎn)品特點(diǎn)高純度與穩(wěn)定性dNTPSetSolution中的每種核苷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)濃度均為100mM,純度超過(guò)99%,經(jīng)HPLC驗(yàn)證,無(wú)DNase和RNase污染。這種高純度的dNTP溶液能夠有效減少實(shí)驗(yàn)中的非特異性擴(kuò)增,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。獨(dú)立包裝與靈活使用該套裝將四種dNTP分別獨(dú)立包裝,便于用戶根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求精確調(diào)整每種dNTP的濃度,從而優(yōu)化反應(yīng)條件。這種靈活性對(duì)于復(fù)雜的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)尤為重要,例如多重PCR和高保真PCR。適用性dNTPSetSolution適用于多種分子生物學(xué)應(yīng)用,包括但不限于PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、RT-PCR、cDNA合成和DNA標(biāo)記。其超純的成分和穩(wěn)定的性能使其能夠兼容各種DNA聚合酶,包括高保真酶和熱啟動(dòng)酶。二、性能優(yōu)勢(shì)高效擴(kuò)增在PCR反應(yīng)中,dNTP的純度和濃度直接影響擴(kuò)增效率。dNTPSetSolution能夠支持長(zhǎng)達(dá)20kb的DNA片段擴(kuò)增,表現(xiàn)出色的擴(kuò)增能力和穩(wěn)定性。此外,其高純度特性可以減少非特異性產(chǎn)物的生成,提高實(shí)驗(yàn)的特異性和靈敏度。無(wú)論是基礎(chǔ)研究還是應(yīng)用開發(fā),它都能滿足多樣化的實(shí)驗(yàn)需求,助力科學(xué)研究的順利開展。Recombinant Human I-TAC/CXCL11
Pfu DNA Polymerase與Taq酶的對(duì)比:與Taq酶相比,Pfu DNA Polymerase的錯(cuò)誤率更低,適合高精度實(shí)驗(yàn)。Competence-Stimulating Peptide-12261
在分子生物學(xué)研究中,RNA的完整性分析是評(píng)估RNA質(zhì)量和功能的重要環(huán)節(jié)。10×RNALoadingBuffer作為一種高效、便捷的上樣緩沖液,在RNA電泳實(shí)驗(yàn)中發(fā)揮著不可或缺的作用。本文將詳細(xì)介紹10×RNALoadingBuffer的產(chǎn)品特點(diǎn)和性能。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高濃度設(shè)計(jì)10×RNALoadingBuffer是一種10倍濃縮的上樣緩沖液,使用時(shí)需稀釋至1×。這種高濃度設(shè)計(jì)減少了試劑的使用量,同時(shí)保證了樣品在電泳過(guò)程中的穩(wěn)定性和均勻性。示蹤染料的雙重指示該緩沖液含有溴酚藍(lán)(BromophenolBlue)和二甲苯青(XyleneCyanolFF)兩種示蹤染料。溴酚藍(lán)在1.2%甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳中與約500個(gè)堿基的RNA遷移速率相當(dāng),而二甲苯青則與約5000個(gè)堿基的RNA遷移速率相當(dāng)。這種雙重示蹤設(shè)計(jì)能夠直觀地反映電泳的進(jìn)程,幫助實(shí)驗(yàn)人員準(zhǔn)確判斷RNA的遷移情況。無(wú)RNase污染RNA分子對(duì)RNase極為敏感,因此在RNA實(shí)驗(yàn)中,避免RNase污染是關(guān)鍵。10×RNALoadingBuffer經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保無(wú)RNase雜質(zhì)污染,從而保證RNA樣品的完整性。適用性該緩沖液適用于多種類型的RNA樣品,包括總RNA、小RNA以及特定RNA的片段的電泳分析。它不僅可用于甲醛變性的瓊脂糖凝膠電泳,也適用于非變性電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳。Competence-Stimulating Peptide-12261
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過(guò)添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測(cè)手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過(guò)程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,...