10×DNA Loading Buffer:助力DNA電泳的關(guān)鍵試劑在分子生物學(xué)研究中,DNA凝膠電泳是一種常用的技術(shù),用于分離和分析DNA片段的大小和純度。而10×DNA Loading Buffer作為電泳實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵試劑,其性能和特點(diǎn)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性起著至關(guān)重要的作用。一、產(chǎn)品特點(diǎn)10×DNA Loading Buffer是一種10倍濃縮的上樣緩沖液,主要用于DNA凝膠電泳。其主要成分包括甘油、EDTA、溴酚藍(lán)和二甲苯青等。甘油的高密度特性使得DNA樣品能夠快速沉入凝膠加樣孔中,避免樣品漂浮。EDTA則可螯合反應(yīng)緩沖液中的Mg2?,終止反應(yīng),防止核酸外切酶活性導(dǎo)致的產(chǎn)物降解。此外,該緩沖液中添加了溴酚藍(lán)和二甲苯青兩種指示劑,分別用于指示電泳進(jìn)程。在1%瓊脂糖凝膠中,二甲苯青條帶約為4Kb,溴酚藍(lán)條帶約為400bp。這種雙指示劑系統(tǒng)為電泳提供了直觀的參考,幫助研究人員實(shí)時(shí)監(jiān)控電泳進(jìn)度。二、性能優(yōu)勢10×DNA Loading Buffer的性能優(yōu)勢在于其高穩(wěn)定性和適用性。它適用于多種類型的DNA樣品,包括雙鏈DNA、單鏈DNA、DNA引物以及小RNA等。此外,該緩沖液不僅適用于瓊脂糖凝膠電泳,還可用于非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。在使用Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye) 時(shí),建議根據(jù)模板類型和目標(biāo)片段長度調(diào)整反應(yīng)條件。Recombinant Mouse DLL3 Protein,His Tag
高靈敏度與特異性該試劑盒采用優(yōu)化的緩沖體系和新一代TaqDNA聚合酶,結(jié)合高效的逆轉(zhuǎn)錄酶,能夠在低濃度RNA樣本中實(shí)現(xiàn)高靈敏度的檢測。其特異性高,即使在復(fù)雜的樣本中,也能通過熔解曲線分析呈現(xiàn)單一峰,避免非特異性擴(kuò)增。防污染設(shè)計(jì)OneStepRT-qPCRSYBRGreenKit(UDGPlus)內(nèi)置dUTP/UDG防污染系統(tǒng),能夠有效降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。這一特性在病毒檢測和低豐度基因表達(dá)分析中尤為重要。操作簡便該試劑盒將逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng)整合在同一管中完成,避免了多次開蓋操作,減少了人為誤差和污染風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí),預(yù)混液的設(shè)計(jì)使得實(shí)驗(yàn)操作更加便捷,用戶只需加入引物和模板即可進(jìn)行反應(yīng)。示蹤染料輔助試劑盒中的反應(yīng)緩沖液含有惰性示蹤染料,通過顏色變化(如藍(lán)色與黃色混合后變?yōu)榫G色)直觀判斷樣本是否加入,提高了實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性和可靠性。兼容性該試劑盒適用于多種qPCR儀器,并提供不同濃度的ROX校正染料,以滿足不同儀器的需求。Growth Hormone Releasing Factor (GHRF)-6Tn5轉(zhuǎn)座酶高通量測序建庫、ATAC-seq 等多種先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù),能夠與這些技術(shù)很好地結(jié)合。
Pfu DNA聚合酶是一種從嗜熱古細(xì)菌 Pyrococcus furiosus 中提取的高保真DNA聚合酶,因其準(zhǔn)確性和熱穩(wěn)定性而被廣應(yīng)用于分子生物學(xué)研究。Pfu DNA聚合酶具有5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,這種獨(dú)特的校正功能使其能夠在DNA合成過程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,從而提高擴(kuò)增的保真性。與Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,其保真性是Taq酶的10倍以上。這種高保真性使其成為需要準(zhǔn)確擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)(如基因克隆、突變研究和測序準(zhǔn)備)的理想選擇。此外,Pfu DNA聚合酶具有出色的熱穩(wěn)定性,能夠在95°C的高溫下保持活性,適合PCR反應(yīng)的高溫變性步驟。其擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端,適用于平末端克隆,但需注意,Pfu酶擴(kuò)增的DNA片段不適合常規(guī)的T載體克隆。Pfu DNA聚合酶的應(yīng)用領(lǐng)域廣,包括高保真PCR、基因克隆、點(diǎn)突變、全基因合成以及高質(zhì)量測序樣本的準(zhǔn)備。它還常與其他酶(如Taq酶)聯(lián)合使用,以結(jié)合高保真性和快速擴(kuò)增的優(yōu)點(diǎn)??傊?,Pfu DNA聚合酶憑借其高保真性、熱穩(wěn)定性和廣的應(yīng)用場景,已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具,為科學(xué)研究提供了強(qiáng)有力的支持。
高靈敏度與特異性該試劑采用熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合抗體封閉技術(shù),有效避免了低溫條件下的非特異性擴(kuò)增,提高了反應(yīng)的特異性和靈敏度。探針法qPCR通過熒光探針與目標(biāo)基因的特異性結(jié)合,避免了非特異性產(chǎn)物的干擾,檢測靈敏度和特異性高于傳統(tǒng)的SYBR Green方法。低濃度ROX校正染料試劑中含有低濃度ROX作為被動(dòng)參考染料,能夠有效校正孔間熒光信號(hào)的差異,減少因移液誤差或樣品蒸發(fā)等因素引起的熒光波動(dòng),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和重復(fù)性。UDG防污染系統(tǒng)內(nèi)置UDG(Uracil-DNA Glycosylase)防污染系統(tǒng),通過降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止了實(shí)驗(yàn)室中殘留的PCR產(chǎn)物對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)??焖贁U(kuò)增與多重檢測優(yōu)化的反應(yīng)體系支持快速擴(kuò)增程序,可在短時(shí)間內(nèi)完成高靈敏度檢測,同時(shí)適用于多重PCR檢測,可在單個(gè)反應(yīng)孔中同時(shí)檢測多個(gè)基因。適用性該試劑適用于多種樣本類型,包括cDNA、基因組DNA等,尤其適合低豐度基因的定量檢測,如低表達(dá)的mRNA、lncRNA、小RNA等。Pfu DNA Polymerase的高保真性:Pfu DNA Polymerase因其3'-5'外切酶活性,在PCR中具有極高的保真性。
SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus):高效、特異且防污染的qPCR解決方案SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus) 是一種為實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料、低濃度ROX校正染料以及UDG防污染系統(tǒng),能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異且防污染的基因定量檢測。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測靈敏度。低濃度ROX校正:含有低濃度ROX染料,適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。UDG防污染系統(tǒng):預(yù)混液中包含UDG酶和dUTP,可在PCR反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止交叉污染。操作簡便:2×預(yù)混液設(shè)計(jì),只需加入引物和模板即可進(jìn)行反應(yīng),減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)??焖俜磻?yīng):優(yōu)化的反應(yīng)體系支持快速qPCR程序,可在短時(shí)間內(nèi)完成檢測,提高實(shí)驗(yàn)效率。應(yīng)用場景基因表達(dá)分析:用于定量檢測特定基因的表達(dá)水平。病原體檢測:快速檢測病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析:通過qPCR實(shí)現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR:可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測多個(gè)目標(biāo)基因。Phusion DNA Polymerase的錯(cuò)誤率比Taq DNA聚合酶低50倍,比Pyrococcus furiosus DNA聚合酶低6倍。超快速T4 DNA連接酶
Uracil-DNA Glycosylase (UDG) 是一種在DNA修復(fù)過程中起作用的酶,其主要功能是識(shí)別并去除DNA中的尿嘧啶堿基。Recombinant Mouse DLL3 Protein,His Tag
SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus):高效防污染的實(shí)時(shí)定量PCR解決方案SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一種為實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的2×預(yù)混液,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料和尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技術(shù),能夠有效防止PCR產(chǎn)物污染,提高檢測的特異性和準(zhǔn)確性。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測靈敏度。防污染設(shè)計(jì):預(yù)混液中包含UDG酶和dUTP,可在PCR反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止交叉污染。通用性:含有ROX被動(dòng)參考染料,適用于所有qPCR儀器,無需根據(jù)儀器調(diào)整ROX濃度。可視化示蹤:部分產(chǎn)品含有藍(lán)色示蹤染料,加入模板后顏色變化可防止加樣錯(cuò)誤。應(yīng)用場景基因表達(dá)分析:用于定量檢測基因表達(dá)水平。病原體檢測:快速檢測病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。多重檢測:可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測多個(gè)目標(biāo)基因。SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 以其高效、特異和防污染的特點(diǎn),成為分子生物學(xué)研究和臨床檢測中的重要工具,尤其適用于需要高靈敏度和防污染的qPCR實(shí)驗(yàn)。Recombinant Mouse DLL3 Protein,His Tag
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,...