Hot-Start Taq DNA Polymerase:助力高特異性PCR擴增在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)是不可或缺的工具,而Taq DNA聚合酶作為PCR反應(yīng)的酶,其性能直接影響擴增結(jié)果的準(zhǔn)確性和效率。近年來,Hot-Start Taq DNA Polymerase憑借其獨特的優(yōu)勢Hot-Start Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)過特殊處理的Taq DNA聚合酶,通過化學(xué)修飾或結(jié)合溫度敏感的抑制劑,能夠在低溫條件下抑制酶的活性,從而避免非特異性擴增的發(fā)生。這種設(shè)計使得反應(yīng)體系在室溫下組裝時,引物不會因非特異性結(jié)合而導(dǎo)致錯誤擴增,顯著提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。其主要特點包括:高特異性:通過抑制低溫下的酶活性,有效避免引物二聚體和非特異性結(jié)合,從而提高擴增產(chǎn)物的特異性。高靈敏度:即使在低拷貝數(shù)的模板中,也能高效擴增目標(biāo)片段。操作簡便:無需額外的高溫步驟,反應(yīng)體系可在室溫下直接組裝。兼容性強:適用于多種復(fù)雜的模板,如富含AT的DNA和經(jīng)過亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA。
在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)已成為不可或缺的工具,廣泛應(yīng)用于基因擴增、突變檢測、基因表達分析等多個領(lǐng)域。而一款PCR Master Mix則是確保實驗成功的關(guān)鍵因素之一。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)憑借其性能和獨特的產(chǎn)品特點,為科研工作者提供了高效、可靠的實驗解決方案。一、酶性能Phusion Master Mix的成分是Phusion DNA聚合酶,這是一種具有高保真性的熱穩(wěn)定酶。它能夠以極高的準(zhǔn)確性復(fù)制DNA模板,錯誤率極低,為普通Taq酶的1/500,這使得它在擴增長片段DNA或?qū)π蛄袦?zhǔn)確性要求極高的實驗中表現(xiàn)出色。例如,在進行基因克隆或構(gòu)建基因文庫時,Phusion酶能夠確保擴增產(chǎn)物的序列與原始模板高度一致,從而提高了后續(xù)實驗的成功率。二、快速擴增能力盡管Phusion酶具有高保真性,但其擴增速度并未受到影響。它能夠在短時間內(nèi)完成長片段DNA的擴增,提高了實驗效率。對于長度在5kb以內(nèi)的DNA片段,Phusion Master Mix可以在幾分鐘內(nèi)完成擴增,這對于需要快速獲得實驗結(jié)果的研究人員來說是一個巨大的優(yōu)勢。例如,在進行高通量基因篩查或大規(guī)模樣本分析時,Phusion Master Mix能夠縮短實驗周期,提高工作效率。Recombinant Biotinylated Human Notch 3 Protein,His-Avi TagEndo H 的活性受 pH 值的強烈影響,通常在酸性條件下表現(xiàn)出好的活性,一般合適 pH 范圍在 5.0-6.0 左右。
在分子生物學(xué)實驗中,PCR技術(shù)是基因擴增的重要工具,而Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 則是實現(xiàn)高保真、高效擴增的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了Phusion DNA聚合酶的保真性與優(yōu)化的反應(yīng)體系,為科研人員提供了一個便捷、可靠的實驗平臺。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Phusion DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及必要的輔助成分。Phusion DNA聚合酶以其高保真性著稱,其錯誤率比普通Taq酶低50倍以上,比Pfu酶低6倍。這種高保真性使其成為基因克隆、測序模板制備、突變分析等高精度實驗的優(yōu)先工具。此外,Phusion酶的延伸速度可達15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍,明顯提高了實驗效率。預(yù)混液的無染料配方為實驗提供了更大的靈活性。實驗人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測方法,例如凝膠電泳分析、平末端克隆或測序,而無需擔(dān)心染料對結(jié)果的干擾。這種無染料設(shè)計特別適合需要進一步處理的PCR產(chǎn)物,例如用于構(gòu)建重組質(zhì)?;蜻M行下游功能分析。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計進一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進行反應(yīng),減少了手動配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。
dATP(脫氧腺苷三磷酸)是DNA合成的基本單元之一,廣應(yīng)用于分子生物學(xué)實驗中,尤其是在PCR、DNA測序、克隆和體外DNA合成等技術(shù)中。dATP Solution (100 mM) 是一種高濃度的dATP溶液,為實驗提供了高質(zhì)量的原料保障。產(chǎn)品特點dATP是DNA聚合酶合成DNA鏈時的關(guān)鍵底物之一。dATP Solution (100 mM) 提供了高純度的dATP,確保在DNA合成過程中能夠高效、準(zhǔn)確地?fù)饺胂汆堰屎塑账?。這種高濃度的溶液設(shè)計使其能夠兼容多種實驗體系,無論是常規(guī)PCR、高通量測序還是復(fù)雜的基因編輯實驗,都能滿足需求。此外,dATP Solution (100 mM) 經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保其純度和穩(wěn)定性。其高濃度設(shè)計減少了實驗中試劑的添加量,降低了污染風(fēng)險,同時也便于實驗人員根據(jù)具體需求進行稀釋和使用。應(yīng)用場景dATP在分子生物學(xué)實驗中扮演著重要角色。在PCR反應(yīng)中,dATP作為DNA合成的四種dNTP(脫氧核苷三磷酸)之一,為DNA鏈的延伸提供了必要的腺嘌呤核苷酸。其純度和濃度直接影響PCR反應(yīng)的效率和準(zhǔn)確性。在DNA測序中,dATP是合成測序模板的關(guān)鍵底物,其質(zhì)量直接決定了測序結(jié)果的可靠性。此外,dATP還廣泛應(yīng)用于DNA克隆、體外轉(zhuǎn)錄、基因編輯等技術(shù)中。FnCas12a的雙鏈或單鏈DNA靶標(biāo)都能激發(fā)其反式剪切活性,即在形成三元復(fù)合物后,針對非特異序列ssDNA的剪切。
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 是一種來源于嗜冷海洋細(xì)菌的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。該酶能夠特異性地催化水解含有尿嘧啶的DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,并在DNA中產(chǎn)生無堿基位點(AP位點),從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點與傳統(tǒng)UDG酶相比,熱敏UDG酶在室溫下即可高效發(fā)揮作用,且對溫度極為敏感,可在50℃下10分鐘內(nèi)完全失活。這種特性使其在PCR和RT-PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場景。此外,該酶對單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對RNA或不含尿嘧啶的DNA無作用。其高純度和低殘留特性使其在高投入量下也不會對檢測體系產(chǎn)生抑制。應(yīng)用場景去除PCR產(chǎn)物污染:通過降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反應(yīng)中,熱敏UDG酶可在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在使用過程中,建議將酶液存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后立即放回-20℃保存。此外,熱敏UDG酶在RT-qPCR反應(yīng)中表現(xiàn)出良好的兼容性,即使在高投入量下也不會對反應(yīng)產(chǎn)生抑制。蛋白在表達過程中形成包涵體,需要通過復(fù)性步驟恢復(fù)其活性。這通常涉及物質(zhì)的存在下進行蛋白質(zhì)的重折疊。Recombinant Human SMPD1 Protein,His Tag
將含有重組質(zhì)粒的表達載體轉(zhuǎn)化到宿主細(xì)胞中,通常是大腸桿菌或其他合適的細(xì)胞系。Recombinant Human TARC/CCL17 Protein
一、強大的耐受性和兼容性Plant Direct PCR Master Mix (2×)(Without Dye) 使用了經(jīng)過定向進化改造的DNA聚合酶,這種酶對植物樣本中的多糖、多酚等PCR抑制物具有極強的耐受性。即使在樣本經(jīng)過簡單裂解后,也能高效地進行DNA擴增,適用于多種植物物種,包括擬南芥、小麥、水稻和玉米等。此外,該預(yù)混液的擴增性能好,能夠擴增長達5 kb的DNA片段,適用于各種植物樣本的直接擴增。二、快速便捷的操作流程該預(yù)混液為2倍濃度的反應(yīng)體系,包含DNA聚合酶、dNTPs、Mg2?和優(yōu)化的緩沖體系,只需加入模板和引物即可進行反應(yīng)。其獨特的裂解緩沖液能夠在短時間內(nèi)裂解植物組織,釋放出可用于PCR的基因組DNA。這種“直接擴增”的方式不僅節(jié)省了時間,還減少了因DNA提取過程中的損失和污染。三、穩(wěn)定性和重復(fù)性Plant Direct PCR Master Mix (2×)(Without Dye) 經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,即使在反復(fù)凍融50次后,活性仍保持穩(wěn)定。其優(yōu)化的配方和穩(wěn)定的酶體系確保了實驗結(jié)果的高度重復(fù)性,適合高通量篩選和大規(guī)模樣本分析。Recombinant Human TARC/CCL17 Protein
在分子生物學(xué)實驗中,PCR技術(shù)是基因擴增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,提高擴增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,...