Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl)：高效除PCR污染的關(guān)鍵酶在分子生物學(xué)研究中，PCR技術(shù)的應(yīng)用極為廣，但PCR產(chǎn)物的交叉污染問(wèn)題一直是影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具，憑借其獨(dú)特的性能和廣的應(yīng)用，已成為解決這一問(wèn)題的理想選擇。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶（dU）堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解，釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效，但對(duì)RNA或長(zhǎng)度不超過(guò)6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無(wú)活性。防止PCR產(chǎn)物污染UDG的主要應(yīng)用之一是防止PCR產(chǎn)物的交叉污染。通過(guò)在PCR反應(yīng)中使用dUTP替代dTTP，生成含有dU的PCR產(chǎn)物，UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA，從而防止其在后續(xù)反應(yīng)中作為模板被擴(kuò)增。反應(yīng)條件兼容性UDG在pH8.0左右表現(xiàn)出活性，且不需要二價(jià)陽(yáng)離子，可在較寬的pH范圍內(nèi)工作。它對(duì)高離子強(qiáng)度（>200mM）敏感，因此在使用時(shí)需注意反應(yīng)體系的離子濃度?？梢岳矛F(xiàn)有的計(jì)算工具，如CRISPR design tools，預(yù)測(cè)gRNA的活性和特異性，以輔助實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 。Shepherdin (79-87)

5'-3'外切核酸酶活性是指DNA聚合酶能夠從DNA鏈的5'端向3'端切除核苷酸的能力。這種活性通常用于修復(fù)受損的DNA或去除錯(cuò)誤配對(duì)的核苷酸。具體來(lái)說(shuō)，5'-3'外切核酸酶活性可以在DNA合成過(guò)程中切除前方的核苷酸，幫助錯(cuò)誤或不需要的序列，從而確保DNA的正確復(fù)制和修復(fù)。在DNA聚合酶中，5'-3'外切核酸酶活性與聚合酶活性相輔相成。聚合酶在合成新鏈時(shí)，5'-3'外切酶活性可以在發(fā)現(xiàn)錯(cuò)誤時(shí)進(jìn)行修正，確保合成的DNA鏈的準(zhǔn)確性。例如，E.coliDNA聚合酶I具有這種外切酶活性，可以在合成過(guò)程中去除錯(cuò)誤的核苷酸，從而提高DNA的保真度。需要注意的是，BstDNAPolymerase,LargeFragment不具有5'-3'外切核酸酶活性，這使得它在某些應(yīng)用中更為穩(wěn)定，特別是在等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)中，如LAMP（環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增）和RCA（滾環(huán)擴(kuò)增）等。Recombinant Cynomolgus CD38 Protein,His TagEndo H 相對(duì)比較嬌貴，需要在特定的條件下保存才能保持其活性，一般需要在 - 20℃或更低溫度下保存。

BstDNA聚合酶在等溫?cái)U(kuò)增中的優(yōu)勢(shì)主要包括以下幾點(diǎn)：1.**高靈敏度和擴(kuò)增效率**：BstDNA聚合酶具有鏈置換能力，能夠在恒溫條件下快速、高效、特異性地?cái)U(kuò)增模板。翌圣生物的BstPlusDNAPolymerase靈敏度超高，低至5copies目的基因可測(cè)，且始終能比競(jìng)品更快達(dá)到閾值，擴(kuò)增速率更快。2.**高dUTP耐受性**：BstPlusDNAPolymerase具有較高的dUTP耐受性，在反應(yīng)體系中添加dUTP對(duì)BstPlusDNAPolymerase的靈敏度及擴(kuò)增效率無(wú)影響，這使得它在防污染系統(tǒng)中表現(xiàn)出色。3.**快速擴(kuò)增**：使用BstDNA聚合酶的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，如LAMP，可以在15-60分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)109-1010倍的擴(kuò)增，顯示出快速的擴(kuò)增能力。4.**熱穩(wěn)定性**：BstDNA聚合酶具有較強(qiáng)的熱穩(wěn)定性，能在60-65℃的恒溫條件下保持活性，這使得它非常適合于不需要溫度循環(huán)的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。5.**簡(jiǎn)化的反應(yīng)設(shè)置**：Bst3.0DNAPolymerase優(yōu)化了Loop-MediatedIsothermalDNAAmplification(LAMP)反應(yīng)，簡(jiǎn)化了反應(yīng)設(shè)置，可以實(shí)現(xiàn)單酶RT-LAMP反應(yīng)。6.**抗抑制劑能力強(qiáng)**：Bst3.0DNAPolymerase即使在高濃度的擴(kuò)增抑制劑中，包括dUTP，也能展現(xiàn)出強(qiáng)大的性能。

一步法操作，簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程該試劑盒將逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng)集成在同一管中，無(wú)需額外的開(kāi)蓋或移液操作，減少了實(shí)驗(yàn)步驟和操作時(shí)間，同時(shí)降低了污染風(fēng)險(xiǎn)。這種一體化設(shè)計(jì)特別適合高通量檢測(cè)，能夠顯著提高實(shí)驗(yàn)效率。高效的dUTP/UDG防污染系統(tǒng)OneStepRT-qPCRProbeKit(UDGPlus)引入了dUTP/UDG防污染體系，能夠有效降解含有尿嘧啶的污染物，防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性結(jié)果。熱敏感UDG在逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中迅速失活，不會(huì)影響后續(xù)的RT-qPCR效率。高靈敏度與特異性試劑盒采用高質(zhì)量的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動(dòng)TaqDNA聚合酶，結(jié)合優(yōu)化的緩沖體系，能夠?qū)崿F(xiàn)低至10拷貝的RNA模板檢測(cè)。此外，其多重檢測(cè)能力可同時(shí)擴(kuò)增多個(gè)靶標(biāo)，適用于復(fù)雜的樣本分析。適用性該試劑盒適用于多種樣本類型，包括動(dòng)物、植物和微生物的總RNA或mRNA，能夠滿足不同研究領(lǐng)域的多樣化需求。UBE2L3與其他E2酶的區(qū)別在于它具有特定的結(jié)構(gòu)特征，它包含一個(gè)高度保守的UBC結(jié)構(gòu)域，這是E2酶家族的標(biāo)志。

在分子生物學(xué)研究中，核酸染料是檢測(cè)DNA和RNA的重要工具。然而，傳統(tǒng)的溴化乙錠（EB）染料因其劇毒性和致病，逐漸被更安全的替代品所取代。GoldenView 吖啶橙核酸染料作為一種新型的核酸染料，憑借其性能和安全性，成為科研工作者的理想選擇。GoldenView 吖啶橙核酸染料的成分是吖啶橙，這是一種細(xì)胞滲透性熒光染料，能夠與核酸結(jié)合并發(fā)出熒光信號(hào)。其獨(dú)特的熒光特性使其在檢測(cè)雙鏈DNA（dsDNA）時(shí)呈現(xiàn)綠色熒光（530 nm），而在與單鏈DNA（ssDNA）或RNA結(jié)合時(shí)則發(fā)出紅色熒光（640 nm）。這種雙重?zé)晒馓匦圆粌H提高了檢測(cè)的靈敏度，還為研究人員提供了更豐富的信息。在瓊脂糖凝膠電泳中，GoldenView 吖啶橙核酸染料表現(xiàn)出與EB相當(dāng)?shù)撵`敏度，能夠清晰地檢測(cè)到大片段（>1 kb）的DNA。此外，該染料的使用方法與EB完全相同，無(wú)需改變現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)流程，即可輕松替換傳統(tǒng)染料。安全性是GoldenView 吖啶橙核酸染料的另一大優(yōu)勢(shì)。與EB不同，GoldenView 經(jīng)過(guò)多項(xiàng)致突變性試驗(yàn)驗(yàn)證，結(jié)果均為陰性，表明其對(duì)細(xì)胞和環(huán)境更為安全。這種低毒性特性使其在實(shí)驗(yàn)室中使用更為便捷，同時(shí)降低了對(duì)研究人員健康的潛在風(fēng)險(xiǎn)。在MAGE-A3基因序列的C末端添加His標(biāo)簽和Avi標(biāo)簽序列。His標(biāo)簽有助于通過(guò)金屬螯合親和層析進(jìn)行蛋白純化。Recombinant Cynomolgus CD69/CLEC2C Protein,His Tag

Pfu酶的擴(kuò)增速度較Taq酶稍慢。經(jīng)過(guò)基因改造的Pfu酶擴(kuò)增速度可達(dá)4 kb/min，是普通Pfu酶的8倍。Shepherdin (79-87)

T5核酸外切酶在基因編輯中確實(shí)有應(yīng)用，并且具有一些優(yōu)勢(shì)：1.**提高編輯效率**：根據(jù)一篇研究文章，T5核酸外切酶可以與CRISPR/Cas系統(tǒng)共表達(dá)或融合，以提高基因編輯的效率。這種共表達(dá)或融合可以增加indel（插入和缺失）頻率，盡管增加的幅度可能不大。2.**增強(qiáng)基因編輯效果**：在另一項(xiàng)研究中，通過(guò)使用螺旋-螺旋二聚體肽（coiled-coilpeptides）將T5核酸外切酶招募到Cas9或Cas12a蛋白上，可以提高基因編輯的效率，這種方法被稱為CCExo（CRISPR-Coiled-coil-Exonuclease）。這種招募方式優(yōu)于共表達(dá)和直接融合，其中強(qiáng)的親和力CC對(duì)顯示出高的突變頻率和刪除長(zhǎng)度。3.**應(yīng)用于多種細(xì)胞類型**：CCExo系統(tǒng)在多種細(xì)胞系和原代細(xì)胞中都能有效地提高基因失活效率，并且在慢性髓性白血?。–ML）患者的原代細(xì)胞以及異種移植動(dòng)物模型中展示了其應(yīng)用潛力，這表明CCExo方法可能成為CML和其他遺傳性疾病的潛在選擇。T5核酸外切酶與CRISPR核酸酶蛋白進(jìn)行融合，并引入了核定位信號(hào)（NLS）序列以構(gòu)建表達(dá)載體，用于基因編輯。綜上所述，T5核酸外切酶在基因編輯中的應(yīng)用可以增強(qiáng)編輯效率和效果，尤其是在與CRISPR/Cas系統(tǒng)結(jié)合使用時(shí)。Shepherdin (79-87)