蛋白A-微球菌核酸酶（pA-MNase）是一種特殊的融合蛋白，它結合了蛋白A和微球菌核酸酶（MNase，MicrococcalNuclease）的特性。以下是pA-MNase的一些關鍵特點和應用：1.**融合表達產(chǎn)物**：pA-MNase是蛋白A與微球菌核酸酶MNase的融合表達產(chǎn)物，因此它同時具有ProteinA的抗體結合活性和MNase的核酸內(nèi)切酶活性。2.**雙重功能**：由于其雙重功能，pA-MNase常用于蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究，特別是在ChIC（ChromatinImmunocleavage）和CUT&RUN（CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease）技術中。3.**ProteinA的特性**：ProteinA是一種發(fā)現(xiàn)于金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）的細胞壁表面蛋白，分子量為42kDa，能特異性地與哺乳動物免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）結合，通常結合部位為免疫球蛋白的Fc區(qū)。4.**微球菌核酸酶（MNase）的特性**：MNase是一種核酸內(nèi)切酶，能夠降解核酸，常用于降解蛋白質(zhì)制備中存在的核酸，減少細胞裂解液的粘度，以及用于染色質(zhì)結構分析和快速RNA測序。5.**反應條件**：MNase的反應條件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer，需要補充100μg/ml重組白蛋白，分子生物學級，并在37°C下孵化。隨后，泛素分子從E1轉(zhuǎn)移到泛素結合酶E2，再通過泛素連接酶E3的作用，將泛素分子連接到靶蛋白上。Recombinant Human IFN alpha/beta R1 Protein,His-Avi Tag

牛痘DNA拓撲異構酶I（VacciniaVirusDNATopoisomeraseI）是一種來源于牛痘病毒的I型真核拓撲異構酶，具有以下功能和應用：1.**功能**：-牛痘DNA拓撲異構酶I可以催化雙鏈DNA分子中單鏈DNA特定序列位置的磷酸二酯鍵的斷開和連接。-具有解超螺旋的酶(DNARelaxingEnzyme)活性，能夠通過快速的酶切和連接使雙鏈共價閉合環(huán)狀的正或負超螺旋DNA發(fā)生解超螺旋，形成含有較少的正或負超螺旋的雙鏈環(huán)狀DNA分子。-能夠使雙鏈DNA形成繩結(knotting)或解開繩結(unknotting)，聯(lián)結互補的單鏈環(huán)狀DNA成為雙鏈環(huán)狀DNA。2.**應用**：-作為一種DNA重組連接的新型工具酶，用于DNA載體和重組片段的連接、缺刻修復、接頭連接等。-適用于TOPO克隆載體的制備、NGS建庫中的接頭連接等。-在TOPO克隆技術中，DNA拓撲異構酶I同時具有限制酶和連接酶特性，其生物學功能是在復制期間切割并重新連接DNA。3.**使用方法**：-用于DNA快速酶切流程，包括配制體系反應液、輕柔混勻、37℃孵育15分鐘等步驟。4.**儲存條件**：-建議在-25～-15℃保存，有效期為3年。5.**注意事項**：-避免起泡或劇烈攪拌、渦旋等操作，以防止酶失活。牛痘DNA拓撲異構酶I因其獨特的功能，在分子生物學研究和基因工程中扮演著重要的角色。Recombinant Human NPC2 Protein,His Tag使用 Tn5 轉(zhuǎn)座酶可以保證 DNA的 片段化的質(zhì)量，同時獲得的蛋白純度高、核酸殘留低，能夠為后續(xù)的實驗。

提取的病毒核酸可以直接用于多種實驗，主要包括：1.**實時熒光定量PCR（qPCR）**：這是一種常用的技術，可以對病毒核酸進行定量檢測。它通過實時監(jiān)測PCR過程中的熒光信號來確定病毒核酸的數(shù)量。例如，病毒核酸檢測就是基于此技術，通過設計特異性引物和探針，對病毒的靶基因進行定性檢測。2.**逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）**：這項技術用于檢測RNA病毒，通過將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，然后進行PCR擴增，以檢測病毒的存在。RT-PCR技術靈敏而且用途廣，可以用于檢測細胞、組織中RNA病毒的含量。3.**等溫擴增法**：包括環(huán)介導的等溫擴增（LAMP）和切口延伸等溫擴增（NEAR），這些方法在恒溫條件下進行，無需復雜的設備，適用于快速、現(xiàn)場的病毒核酸檢測。4.**數(shù)字PCR（dPCR）**：這是一種高度靈敏的技術，可以對病毒核酸進行定量。它通過將樣本分配到成千上萬的微小反應室中，每個反應室單獨進行PCR擴增，從而實現(xiàn)對病毒核酸的精確計數(shù)。5.**核酸雜交技術**：如熒光原位雜交（FISH），可以用于檢測特定病毒核酸序列在細胞或組織中的存在和定位。

牛痘DNA拓撲異構酶I（VacciniaVirusDNATopoisomeraseI）與細菌DNA拓撲異構酶的主要區(qū)別如下：1.**來源不同**：-牛痘DNA拓撲異構酶I來源于牛痘病毒，是一種真核生物病毒中的酶。-細菌DNA拓撲異構酶則來源于原核生物，如大腸桿菌的ω蛋白等。2.**功能特性**：-牛痘DNA拓撲異構酶I能夠解旋DNA的超螺旋結構，并且識別并切割雙鏈DNA末端[5’C(T)CCTT]，與DNA形成共價連接形成穩(wěn)定復合物，遇到DNA的5’-OH基團后，重新連接形成完整DNA鏈。-細菌DNA拓撲異構酶，如大腸桿菌的ω蛋白，主要功能是催化DNA鏈斷開和結合的偶聯(lián)反應，以改變DNA的拓撲結構。3.**活性條件**：-牛痘DNA拓撲異構酶I即使在Mg2+不存在的條件下也顯示活性。-細菌DNA拓撲異構酶可能需要Mg2+等金屬離子作為輔因子來發(fā)揮活性。4.**作用的DNA鏈**：-牛痘DNA拓撲異構酶I能使正負兩方的超螺旋分子均形成松散型。-原核生物由來的DNA拓撲異構酶I只作用負鏈的超螺旋分子。5.**共價鍵形成**：-牛痘DNA拓撲異構酶I與DNA形成共價連接，此酯鍵中所貯存的能量可能在切斷端的再結合上起著作用。-細菌DNA拓撲異構酶在原核生物中是游離型的5′-OH末端扣3′-磷酸末端與酶形成共價鍵。

Pfu DNA Polymerase的高保真性：Pfu DNA Polymerase因其3'-5'外切酶活性，在PCR中具有極高的保真性。

BsuDNAPolymerase（嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶）與其他DNA聚合酶相比，具有一些獨特的特性和優(yōu)勢：1.**鏈置換活性**：BsuDNAPolymerase保留了BacillussubtilisDNA聚合酶I的5'→3'聚合酶活性，但缺乏5'→3'核酸外切酶結構域，這使得它具有鏈置換DNA合成的能力。這種能力對于等溫擴增技術如重組酶聚合酶擴增（RPA）和環(huán)介導等溫擴增（LAMP）非常重要，因為它可以分離雙鏈DNA，允許新的DNA鏈的合成。2.**溫度穩(wěn)定性**：BsuDNAPolymerase在高溫下保持活性，這使得它適用于需要在較高溫度下進行的擴增反應，如RPA技術中的65°C反應條件。3.**無核酸外切酶活性**：BsuDNAPolymerase缺乏3'→5'和5'→3'核酸外切酶活性，這意味著它不會像某些其他聚合酶那樣在合成過程中具有校對功能。這可以減少非特異性擴增，提高擴增的特異性。4.**高靈敏度和特異性**：BsuDNAPolymerase在等溫擴增中展現(xiàn)出高靈敏度，能夠?qū)⑽⒘亢怂崮０鍞U增到可檢測水平，同時保持高特異性。5.**簡化的操作流程**：與其他需要復雜操作和多個步驟的DNA聚合酶相比，BsuDNAPolymerase在等溫擴增技術中的應用簡化了操作流程，因為它不需要熱循環(huán)儀，這使得它適合現(xiàn)場快速檢測和診斷。

FnCas12a系統(tǒng)的脫靶效應較低，這對于減少非目標效應和提高物質(zhì)的安全性至關重要。Recombinant Human IFN alpha/beta R1 Protein,His-Avi Tag

BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)是一種來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillussubtilis）的DNA聚合酶。這種酶保留了BsuDNAPolymeraseI的5'-3'聚合酶活性，但缺失了5'-3'核酸外切酶結構域，因此它具有鏈置換活性，可以用于重組酶聚合酶擴增（RPA）等恒溫擴增技術。以下是BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)的一些關鍵特性和應用：1.**活性定義**：在37°C條件下，30分鐘內(nèi)將10nmol的dNTP摻入酸不溶性物質(zhì)所需的酶量定義為1個活性單位（U）。2.**熱失活條件**：75°C，20分鐘。3.**酶保存液成分**：25mMTris-HCl,50mMNaCl,1mMDTT,0.1mMEDTA,50%Glycerol,pH7.4@25°C。4.**儲存條件**：-25~-15°C保存，有效期2年。5.**注意事項**：-由于缺乏3'-5'核酸外切酶活性，BsuDNAPolymerase(LargeFragment)不能切除3'未配對的突出末端，因而不適用于生成平齊末端。-25°C時BsuDNAPolymerase(LargeFragment)保留50%的活性，是同溫度下Klenow片段(3'-5'exo-)的兩倍。6.**應用**：-隨機引物法標記。-cDNA第二條鏈的合成。-單個dA的加尾。-鏈置換的DNA合成。Recombinant Human IFN alpha/beta R1 Protein,His-Avi Tag