重組人血清白蛋白(rHSA)在藥物載體應用中提高藥物穩(wěn)定性和靶向性的機制主要包括以下幾點:1.**延長半衰期**:通過與rHSA融合,可以延長藥物分子在體內的循環(huán)時間。例如,阿必魯肽(Tanzeum)是GLP-1與HSA的融合蛋白,其半衰期可延長至5天,每周給藥一次即可。2.**提高穩(wěn)定性**:rHSA作為載體,可以保護藥物分子不受體內酶解和其他降解因素的破壞,從而提高藥物的穩(wěn)定性。例如,F(xiàn)GF21與HSA融合后,其體外穩(wěn)定性提升,抗胰蛋白酶降解能力和高溫條件下的穩(wěn)定性增加。3.**改善藥代動力學**:rHSA融合蛋白能夠改善藥物的藥代動力學特性,如改變藥物的分布和代謝,減少腎臟的損失,從而提高藥物在體內的濃度和療效。4.**增強靶向性**:rHSA可以通過其天然的生物學特性,如與特定受體的結合,增強藥物對特定組織或細胞的靶向性。例如,rHSA可以通過其與FcRn受體的結合,實現(xiàn)對瘤組織的靶向性。5.**降低免疫原性**:rHSA作為一種內源性蛋白質,具有較低的免疫原性,可以減少藥物引起的免疫反應,提高藥物的安全性和耐受性。將含有重組質粒的表達載體轉化到宿主細胞中,通常是大腸桿菌或其他合適的細胞系。Recombinant Human BTLA(His-Avi Tag)
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒通過以下方式實現(xiàn)高靈敏性:1.**熒光探針技術**:試劑盒采用熒光標記的DNA探針,這種探針在沒有Benzonase核酸酶的樣品中穩(wěn)定存在且不產(chǎn)生熒光信號。當樣品中含有核酸酶殘留時,核酸酶會切割熒光標記的DNA探針,導致熒光信號的增強。這種變化可以用來定量分析Benzonase的殘留量,實現(xiàn)高靈敏度檢測。2.**熒光共振能量轉移(FRET)**:該技術利用了供體(Donor)和受體(Acceptor)熒光基團間的相互作用。在未切割狀態(tài)下,供體的熒光被受體淬滅,而一旦DNA探針被Benzonase切割,供體熒光基團與受體分離,熒光信號增強,從而實現(xiàn)高靈敏度的檢測。3.**優(yōu)化的底物探針**:試劑盒中的Benzonase底物是一種合成的DNA寡核苷酸探針,其一端具有VIC熒光基團,另一端具有BHQ1淬滅基團。這種設計使得在底物被切割后,VIC熒光不再被BHQ1淬滅,從而可以非常靈敏地檢測到Benzonase核酸酶活性。4.**高靈敏度的檢測范圍**:試劑盒能夠檢測到低達約0.002U(約0.003ng)的Benzonase或BeyoZonase,樣品中的Benzonase濃度約為0.0002U/μl或0.3pg/μl,這遠低于常規(guī)同類產(chǎn)品的檢測限。T3 DNA連接酶利用His標簽通過親和層析從細胞裂解物中純化目標蛋白,然后可能通過離子交換層析、等方法進一步提純。
重組Exendin-4在科研方面的作用主要體現(xiàn)在以下幾個方面:1.**糖尿病研究**:重組Exendin-4作為一種GLP-1受體激動劑,其在2型糖尿?。═2DM)方面具有的療效,能夠模擬GLP-1的作用,增加胰島素的分泌,抑制胰高的血糖素的分泌,從而降低糖水平。2.**藥物開發(fā)**:Exendin-4的結構和功能特性使其成為開發(fā)新型糖尿病藥物的重要候選物質。科研人員通過基因工程方法構建長效融合蛋白,以延長Exendin-4的半衰期,提高其效果和降低生產(chǎn)成本。3.**分子機制研究**:科研中對Exendin-4的作用機制進行了深入研究,包括其對胰島β細胞的作用、對神經(jīng)系統(tǒng)的保護作用,以及其在胰島移植受者中增加胰島素分泌量的效果。4.**生物合成研究**:通過生物工程技術,如基因序列優(yōu)化和密碼子改造,提高Exendin-4在宿主細胞中的表達效率,以及通過純化工藝提高其純度,為臨床應用提供基礎。5.**藥理作用及機制研究**:Exendin-4的藥理作用及其機制是科研關注的重點,包括其對胰島素分泌的影響、對胰島β細胞增殖和凋亡的調控,以及其在減緩胃排空和抑制食欲方面的作用。
EndoH糖苷內切酶H(EndoH)在實驗中通常用于分析以下類型的糖鏈:1.**高甘露糖型糖鏈**:EndoH能夠特異性地識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈,這些糖鏈通常存在于未成熟的糖蛋白中。2.**某些雜合型糖鏈**:EndoH也能對某些雜合型寡聚糖的殼二糖結構進行切割,去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖。3.**N-連接糖鏈**:EndoH主要用于去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖,這有助于研究糖鏈結構和糖基化模式。4.**抗體糖型分析**:在IgG中,F(xiàn)c區(qū)Asn297處的保守N-連接糖對其活性至關重要,EndoH可用于分析這些糖鏈。5.**糖蛋白的糖基化模式**:EndoH有助于分析糖蛋白的糖基化位點、糖基化程度以及糖鏈的具體結構。6.**糖鏈分析和結構表征**:在糖鏈分析的主要策略中,EndoH作為高效、準確、穩(wěn)定的去糖基化方法,有助于從糖蛋白上游離糖鏈,然后進行詳細的分析表征。EndoH的使用可以為研究者提供關于糖蛋白糖基化模式的重要信息,尤其是在抗體藥物研究和開發(fā)中,對于理解糖鏈如何影響藥物的活性、穩(wěn)定性和免疫原性具有重要意義。
EndoS糖苷內切酶S(Endo-S)的特異性主要體現(xiàn)在其對糖蛋白的糖鏈結構的識別和切割能力上。以下是Endo-S的一些關鍵特異性特點:1.**糖鏈識別**:Endo-S能夠特異性識別糖鏈結構中的某些特定序列或結構,尤其是N-連接糖鏈的殼二糖重要結構。2.**切割位點**:Endo-S在糖鏈的特定位點進行切割,通常是在N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之間的β-N-糖苷鍵。3.**不影響抗原性**:Endo-S的切割位點選擇性高,不會破壞糖蛋白的抗原決定簇,因此在某些應用中可以保持糖蛋白的免疫原性。4.**應用多樣性**:Endo-S可以用于多種糖蛋白的去糖基化,包括抗體和其他具有N-連接糖鏈的蛋白質。5.**研究和藥物開發(fā)**:在研究糖蛋白的結構和功能時,Endo-S提供了一種工具來研究糖鏈對蛋白質性質的影響。此外,在藥物開發(fā)中,Endo-S用于制備糖鏈定點ADC化合物,通過精確控制藥物與抗體的連接點,提高藥物的療效和減少副作用。6.**兼容性**:Endo-S對多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性,可以接受不同生物正交基團、熒光基團等衍生物作為底物,實現(xiàn)抗體糖基化修飾。7.**高效性**:Endo-S在催化糖鏈轉移或切割反應中表現(xiàn)出高效性,有助于實現(xiàn)高效獲得功能修飾的糖工程抗體。His-Avi Tag包含了特定肽段,分子量預測為50.20 kDa,但由于糖基化,其在Tris-Bis PAGE結果上遷移至55-60 kDa。Recombinant Human FGFR2 beta (IIIc) Protein,His Tag
來源于Francisella tularensis:FnCas12a是一種來源于Francisella tularensis菌株的核酸內切酶。Recombinant Human BTLA(His-Avi Tag)
EndoH糖苷內切酶H在實驗中的特異性和效率通常通過以下幾個方面來確定:1.**特異性識別**:EndoH能夠特異性地識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈,這些糖鏈通常存在于未成熟的糖蛋白中。2.**切割位點**:EndoH識別并切割殼二糖結構中的β-1,4-糖苷鍵連接的甘露糖型結構糖鏈,但不能切割復雜型糖鏈糖蛋白。3.**酶活性測試**:通過使用標準糖蛋白底物進行酶活性測試,可以確定EndoH的活性和效率。4.**純化效果**:EndoH的純度可大于95%,這有助于確保實驗中酶的高效性。5.**比較分析**:與其他去糖基化酶(如PNGaseF)進行比較分析,可以評估EndoH的特異性和效率。6.**應用效果**:EndoH用于基于DNA測序的熒光輔助糖電泳(DSA-FACE)分析核糖核酸酶B(ribonucleaseB,RNaseB)的糖基結構,可以比較不同酶的糖基切割功能。7.**酶切時間**:EndoH的酶切時間通常為1-3小時,這有助于評估酶的效率。8.**產(chǎn)品信息**:通過查看產(chǎn)品信息,包括產(chǎn)品編號、規(guī)格和目錄價,可以了解EndoH的商業(yè)可用性和應用范圍。通過這些方法,研究人員可以確保EndoH在糖鏈分析中的特異性和效率,從而獲得準確的糖鏈結構信息。Recombinant Human BTLA(His-Avi Tag)
在分子生物學實驗中,PCR技術是基因擴增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,提高擴增產(chǎn)物的準確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,...