利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到編碼土豆羧肽酶抑制劑(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato,CPI)活性多肽基因,克隆于表達(dá)載體pGEX一4T一1的多克隆位點(diǎn)中,得到重組質(zhì)粒pGCPI,測(cè)序后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體茵EscherichiacoliBL21中。重組茵經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),超聲波破茵后,通過(guò)谷胱甘肽sepheroseFF親和層析柱一步純化得到融合蛋白,純度大于97%。融合蛋白經(jīng)凝血酶切割并分離除去谷胱甘肽一S一轉(zhuǎn)移酶后得到純度大于98%的重組CPI,ELISA鑒定產(chǎn)物具有免疫原性,體外檢測(cè)表明其促進(jìn)纖溶的生物功能與天然CPI無(wú)明顯差異。全長(zhǎng)膜蛋白由于其天然構(gòu)象,是跨膜蛋白藥物開(kāi)發(fā)中的好的抗原。在細(xì)胞中的表達(dá)水平通常較低。HIF-1 alpha (556-574)
透明質(zhì)酸酶活力單位(Unitdefinition)基于USP透明質(zhì)酸酶參照標(biāo)準(zhǔn),即每分鐘在37℃,pH5.7的2mL反應(yīng)液中引起OD6000.330個(gè)變化定義為一個(gè)活力單位。抑制劑(Inhibitor)Fe2+,F(xiàn)e3+,Zn2+,Cu2+,肝素,金精三羧酸,硫酸,硝酸,乙酰化透明質(zhì)酸,硫酸纖維素酯,膽汁等結(jié)構(gòu)式(Structure)運(yùn)輸和保存方法冰袋運(yùn)輸。-20℃保存,兩年有效。溶液配制溶于0.02MPBS(pH7.0),含77mMNaCl和0.01%BSA,濃度為1mg/mL?,F(xiàn)配現(xiàn)用。該產(chǎn)品儲(chǔ)存液不穩(wěn)定,使用時(shí)建議現(xiàn)配現(xiàn)用。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。Recombinant Mouse Nectin-4 Protein,His Tag通過(guò)使用PNGase F去除糖蛋白上的糖鏈,可以確定蛋白質(zhì)是否發(fā)生糖基化,以及糖基化位點(diǎn)。
ERBB3,又稱HH3(人表皮生長(zhǎng)因子受體3),是一種I型膜糖蛋白,是酪氨酸激酶受體ERBC家族的成員。ERBP家族成員作為表皮生長(zhǎng)因子(LU)家族的生長(zhǎng)因子的受體。在ERBP家庭成員中,因?yàn)樗幸粋€(gè)缺陷的激酶域。ERBB3在角化細(xì)胞、黑色素細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、成肌細(xì)胞和雪旺細(xì)胞中都有表達(dá)。單體ERbb3是一種低親和性的受體。ERBB3與ERBB2的異聚反應(yīng)形成高親和性受體復(fù)合物。與此相反,ERBB3同向聚合或異向聚合形成了一個(gè)低親和性的結(jié)合物。因?yàn)镋RBB3含有一個(gè)有缺陷的激酶域,ERBB2的激酶域負(fù)責(zé)通過(guò)異二重瓣受體啟動(dòng)酪氨酸磷酸化信號(hào)。研究發(fā)現(xiàn),ERBB3細(xì)胞質(zhì)區(qū)內(nèi)的三個(gè)離散氨基酸信號(hào)對(duì)ERBB2的轉(zhuǎn)導(dǎo)至關(guān)重要。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題。表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)重組的人HR3/ERBB3蛋白表達(dá)自于C-端的HK293細(xì)胞和AVI標(biāo)記。里面有血清20-Thr643。分子量大約71.6
PreScissionProtease是一種由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease)和GST組成的融合蛋白。該蛋白酶可在低溫下(4°C)特異識(shí)別短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸殘基之間進(jìn)行酶切。底物的識(shí)別和切割不僅依賴于融合蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)還依賴于融合蛋白的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。它可以特異性的將pGEX-6P系列等載體表達(dá)出的帶有酶底物識(shí)別多肽序列融合蛋白的GST標(biāo)簽進(jìn)行分離。本品由大腸桿菌中重組表達(dá),以無(wú)菌液體形式提供。產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(ChineseSynonym)重組Prescission蛋白酶英文別名(EnglishSynonym)3Cprotease,Picornain3C,PSP來(lái)源(Source)大腸桿菌表達(dá)分子量(MolecularWeight)約46kDa物理外觀(PhysicalAppearance)無(wú)菌無(wú)色液體儲(chǔ)存緩沖液(StorageBuffer)25mMTris-HCl(pH8.0),150mMNaCl,1mMEDTA,5mMDTT,50%(V/V)GlycerinPNGase F是一種酰胺水解酶,能夠特異性地裂解糖蛋白中由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復(fù)雜型的寡糖。
Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大腸桿菌表達(dá)重組腸激酶(不帶標(biāo)簽)注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品所講述的緩沖體系需要自行配置。2.不建議37℃條件下酶切,可能會(huì)有非特異性酶切出現(xiàn)。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切會(huì)受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,為獲得理想的酶切結(jié)果,請(qǐng)先將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中,然后再進(jìn)行酶切實(shí)驗(yàn);若不方便透析,可將樣品稀釋到咪唑含量在100mM以下,NaCl濃度在50mM以下,甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切,酶的用量與蛋白比例不變;若干擾因素很多,且不便去除,需要適當(dāng)增加酶量或延長(zhǎng)酶切時(shí)間,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸鹽對(duì)Enterokinase有很強(qiáng)的抑制作用,痕量的磷酸鹽都會(huì)嚴(yán)重影響Enterokinase的活性,因此在酶切體系內(nèi)不能存在磷酸鹽。5.本品是具有高酶活力重組腸激酶,切割蛋白使用量少,可不考慮除去。后續(xù)如需去除重組腸激酶,可用陰離子交換樹(shù)脂(如DEAE-FF)對(duì)其進(jìn)行洗脫。推薦洗脫條件如下:平衡緩沖液:25mMTris-HClpH8.0洗脫緩沖液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可適當(dāng)增加酶量,或適當(dāng)延長(zhǎng)酶切時(shí)間。α-凝血酶的多面性質(zhì)在其臨床使用中提出了挑戰(zhàn),特別是在平衡其止血效果與血栓形成風(fēng)險(xiǎn)之間。HER2/neu (654-662) GP2
泛素蛋白(Ubiquitin,簡(jiǎn)稱Ub)是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的小分子蛋白,具有高度保守性。HIF-1 alpha (556-574)
BovineThrombin,HighSpecificActivity,>2000IU/mg牛凝血酶(高活力,>2000IU/mg)本品有效切割質(zhì)量比1:2000,通常在未做過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)的情況下建議在1:1000質(zhì)量比進(jìn)行體系的優(yōu)化,即1mg的目的蛋白加入2U的酶(2000U/mg),使用時(shí)可用生理鹽水將酶配成100U/mL,有效消化緩沖液:20mMTris-HCl,含150mMNaCl,pH8.0。在20℃-37℃切割0.3-16h。注意:①具體反應(yīng)溫度可根據(jù)融合蛋白的性質(zhì)而定,如需要低溫保存的蛋白,可在4℃切割24h。②因?yàn)槟笗?huì)吸附在玻璃上,建議用塑料管分裝凍存(-20℃)凝血酶溶液。注意事項(xiàng)1.此凍干產(chǎn)品穩(wěn)定性好,2~8℃條件下保存3年,酶活力未有變化。室溫條件下保存1年,酶活力未有變化。2.本產(chǎn)品作科研用途。3.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。HIF-1 alpha (556-574)
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過(guò)添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測(cè)手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過(guò)程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,...