Cas9核酸酶是一種向?qū)NA(guideRNA,gRNA)引導的核酸內(nèi)切酶,可催化雙鏈DNA的裂解。NLS-Cas9-EGFP在Cas9核酸酶的基礎上進行改造,它在N端包含一個核定位信號(NLS),在C端包含一個EGFP和一個6X(His)序列。當Cas9以NLS序列表達時,Cas9RNP復合物在進入細胞后立即定位到細胞核。不需要體內(nèi)轉(zhuǎn)錄或翻譯,提高了效率。此外,與其他系統(tǒng)相比,EGFP標簽可作為追蹤或分類轉(zhuǎn)染細胞的報告器,通過熒光細胞分選(FACS)富集所需基因組編輯的細胞群。它降低了在基因組編輯應用中與單細胞克隆和基因分型相關的人工和成本。產(chǎn)品特點如下:無DNA:沒有外部DNA添加;高切割效率:NLS確保Cas9蛋白高效進入細胞核;低脫靶效應:Cas9核酸酶的瞬時表達提高了切割的特異性;節(jié)省時間:無需轉(zhuǎn)錄和翻譯;減少勞動力:通過基于EGFP的FACS富集細胞群以進行所需的基因組編輯。C端His標簽增加了融合蛋白檢測方法的選擇??蓱糜冢和ㄟ^體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA。通過電穿孔或注射與特定gRNA結合時的體內(nèi)基因編輯。通過基于EGFP的FACS富集細胞群以進行所需的基因組編輯。儲存條件-25~-15℃保存,有效期1年。在某些疾病中,特定蛋白質(zhì)的泛素化水平可能發(fā)生變化,因此,泛素化蛋白質(zhì)可以作為疾病的生物標志物。Recombinant Biotinylated Human VEGF165 Protein,His-Avi Tag
SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronavirusesthatalsoincludeMERS?CoVandSARS-CoV-1.Coronavirusesarecommonlycomprisedoffourstructuralproteins:Spikeprotein(S),Envelopeprotein(E),Membraneprotein(M)andNucleocapsidprotein(N).TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheSproteinishomotrimeric,witheach~180-kDamonomerconsistingoftwosubunits,S1andS2.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).BeforebindingtotheACE-2receptor,structuralanalysisoftheS1trimershowsthatonlyoneofthethreeRBDdomainsisinthe"up"conformation.Thisisanunstableandtransientstatethatpassesbetweentrimericsubunitsbutisneverthelessanexposedstatetobetargetedforneutralizingantibodytherapy.PolyclonalantibodiestotheRBDoftheSARS-CoV-2proteinhavebeenshowntoinhibitinteractionwiththeACE-2receptor,confirmingRBDasanattractivetargetforvaccinationsorantiviraltherapy.Recombinant Human Ephrin-A4/EFNA4 Protein,hFc Tag全長跨膜蛋白是一類特殊的蛋白質(zhì),它們嵌入在細胞膜的磷脂雙分子層中,實現(xiàn)細胞內(nèi)外的跨越。
Endo H糖苷內(nèi)切酶H:結構、功能及其在糖生物學中的應用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H(Endo H)是一種專門切割N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,用于糖生物學和蛋白質(zhì)工程領域。本文將探討Endo H的結構特性、催化機制、以及其在研究和臨床應用中的潛力。引言N-連接糖基化是一種在真核細胞中普遍存在的蛋白質(zhì)修飾方式,涉及將糖鏈添加到蛋白質(zhì)的天冬酰胺殘基上。Endo H作為一種內(nèi)切酶,能夠特異性地識別并切割N-連接糖鏈中的β-N-乙酰葡糖胺苷鍵,從而在蛋白質(zhì)工程和生物制藥中發(fā)揮重要作用。Endo H的結構特性Endo H通常來源于流感嗜血桿菌(Hemophilus influenzae),其分子質(zhì)量約為50 kDa。該酶由兩個結構域組成:一個負責識別糖鏈的催化結構域和一個有助于酶穩(wěn)定性的非催化結構域。催化機制Endo H的催化機制涉及對N-連接糖鏈的特異性識別和切割。酶的活性位點含有多個氨基酸殘基,這些殘基與糖鏈的特定結構相互作用,導致酶對底物的高特異性。Endo H催化的糖苷鍵斷裂是一水解反應,需要水分子的參與。
分子結構:牛纖維蛋白原由兩個相似的三聚體亞基組成,每個亞基包含Aα、Bβ和γ三個多肽鏈,通過二硫鍵和非共價鍵連接。生物學功能:牛纖維蛋白原在凝血級聯(lián)反應中被凝血酶裂解為纖維蛋白單體,進而聚合形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊,是止血和傷口修復的關鍵組分。醫(yī)學應用:牛纖維蛋白原在心血管疾病、創(chuàng)傷以及藥物開發(fā)中展現(xiàn)出潛在的應用價值。討論分子特性:牛纖維蛋白原的分子結構為理解其在凝血過程中的功能提供了基礎,同時為設計新型抗凝血藥物提供了可能。疾病研究:牛纖維蛋白原在血栓形成和溶解中的作用,為研究如深靜脈血栓、心肌梗死等疾病的分子機制提供了重要信息。生物醫(yī)學應用:牛纖維蛋白原的穩(wěn)定性和可用性使其成為研究血液凝固機制和開發(fā)新型生物材料的理想模型。酵母重組表達N-糖苷酶F(PNGase F)是一種通過酵母重組表達系統(tǒng)生產(chǎn)的酶。
α-凝血酶(α-Thrombin)是一種高度特異性的絲氨酸蛋白酶,由凝血酶原(Prothrombin,II因子)經(jīng)蛋白水解活化而來。它在凝血過程中起著非常重要的作用,不僅能夠促使纖維蛋白凝塊的產(chǎn)生,還負責提供反饋信號來尋找前輔因子:V因子和VIII因子。也可以用作血管收縮劑。在體內(nèi),活化的X因子(FactorXa)切割凝血酶原,釋放出活性肽并將凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一條輕鏈(Achain)(Mw~6,000)和一條重鏈(Bchain)(Mw~31,000)通過二硫鍵連接而成。某些情況下,α-凝血酶會發(fā)生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶。β-凝血酶由對α-凝血酶A鏈水解并切割含有B鏈糖基化位點的小片段(B1,B2)組合而成。除了用于凝血研究之外,α-凝血酶還常用來位點特異性切割融合蛋白。基因重組時將凝血酶識別位點插入在目的蛋白與利于后續(xù)純化和/或表達的多肽或者蛋白之間,通過凝血酶切割表達的重組子即可釋放目的蛋白。凝血酶本身可通過親和層析技術快速去除。本品是由勻質(zhì)化的人凝血酶原經(jīng)由Xa因子,Va因子和磷脂活化而得,經(jīng)SDS-PAGE檢測確保凝血酶原的完全活化,并以NIH凝血酶的標準品為參考,提供的酶活力不少于3091NIHU/mg。透明質(zhì)酸(Hyaluronic Acid,簡稱HA)是一種存在于人體和動物組織中的天然高分子多糖,稱為糖醛酸或玻尿酸。Recombinant Mouse IL-18RAP Protein,His Tag
高親和力和選擇性A2AR抑制劑的開發(fā):研究者正在開發(fā)新型的A2AR小分子拮抗劑,以提高藥物的療效和選擇性。Recombinant Biotinylated Human VEGF165 Protein,His-Avi Tag
RecombinantBiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling),hFcTag性能參數(shù)分子別名(Synonyms)OX40Lreceptor;CD134;TNFRSF4;Ly-70表達區(qū)間及表達系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling)isexpressedfromHEK293withhFctagattheC-Terminus.ItcontainsLeu29-Ala216.[Accession|P43489]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof46.8kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto72-75kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGE制劑(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).儲存條件Theproductshouldbestoredat-85~-65℃for1yearfromdateofreceipt.Recommendtoaliquottheproteinintosmallerquantitieswhenfirstusedandavoidrepeatedfreeze-thawcycles.Recombinant Biotinylated Human VEGF165 Protein,His-Avi Tag
在分子生物學實驗中,PCR技術是基因擴增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,提高擴增產(chǎn)物的準確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,...