Cas9核酸酶是一種向?qū)NA(guideRNA,gRNA)引導(dǎo)的核酸內(nèi)切酶,可催化雙鏈DNA的裂解。NLS-Cas9-EGFP在Cas9核酸酶的基礎(chǔ)上進(jìn)行改造,它在N端包含一個(gè)核定位信號(NLS),在C端包含一個(gè)EGFP和一個(gè)6X(His)序列。當(dāng)Cas9以NLS序列表達(dá)時(shí),Cas9RNP復(fù)合物在進(jìn)入細(xì)胞后立即定位到細(xì)胞核。不需要體內(nèi)轉(zhuǎn)錄或翻譯,提高了效率。此外,與其他系統(tǒng)相比,EGFP標(biāo)簽可作為追蹤或分類轉(zhuǎn)染細(xì)胞的報(bào)告器,通過熒光細(xì)胞分選(FACS)富集所需基因組編輯的細(xì)胞群。它降低了在基因組編輯應(yīng)用中與單細(xì)胞克隆和基因分型相關(guān)的人工和成本。產(chǎn)品特點(diǎn)如下:無DNA:沒有外部DNA添加;高切割效率:NLS確保Cas9蛋白高效進(jìn)入細(xì)胞核;低脫靶效應(yīng):Cas9核酸酶的瞬時(shí)表達(dá)提高了切割的特異性;節(jié)省時(shí)間:無需轉(zhuǎn)錄和翻譯;減少勞動(dòng)力:通過基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。C端His標(biāo)簽增加了融合蛋白檢測方法的選擇。可應(yīng)用于:通過體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA。通過電穿孔或注射與特定gRNA結(jié)合時(shí)的體內(nèi)基因編輯。通過基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。儲(chǔ)存條件-25~-15℃保存,有效期1年??缒さ鞍椎目缒^(qū)域的相互作用是連接膜外環(huán)境與細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的重要渠道。Substance P (1-7)
SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronaviruses.TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).SeveralemergingSARS-CoV-2genomeshavebeenidentifiedincludingtheOmicron,orB.1.1.529,variant.FirstidentifiedinNovember2021inSouthAfrica,theOmicronvariantquicklybecamethepredominantSARS-CoV-2variantandisconsideredavariantofconcern(VOC).TheOmicronvariantcontains15mutationsinRBDdomainthatpotentiallyaffectviralfitnessandtransmissibility.ThemajorityofthemutationsareinvolvedinACE-2bindingandOmicronbindsACE-2withgreateraffinity,potentiallyexplainingitsincreasedtransmissibility.Severalofthesemutationsarealsoidentifiedinfacilitatingimmuneescapeandreducingneutralizationactivitytoseveralmonoclonalantibodies.Melittin跨膜蛋白在宿主細(xì)胞中的表達(dá)水平通常有點(diǎn)低,研發(fā)困難,對蛋白表達(dá)生產(chǎn)平臺(tái)技術(shù)要求極高。
牛凝血酶(Bovine Thrombin),作為一種高特異性的絲氨酸蛋白水解酶,具有重要的生物學(xué)功能的科研應(yīng)用。本文綜述了牛凝血酶的分子特性、生物學(xué)作用及其在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用。引言凝血酶是血液凝固過程中的關(guān)鍵酶,負(fù)責(zé)將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,從而促進(jìn)血栓形成。牛凝血酶因其高比活度(>2000 IU/mg)和高純度,在生物醫(yī)學(xué)研究中用作工具酶。材料與方法產(chǎn)品來源與純化:牛凝血酶從牛血漿中提取,并通過一系列生物技術(shù)手段進(jìn)行純化。活性測定:利用特定的底物或熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)底物測定凝血酶活性。應(yīng)用研究:通過體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)模型,研究牛凝血酶在血液學(xué)、分子生物學(xué)和藥物開發(fā)中的應(yīng)用。結(jié)果分子特性:牛凝血酶由兩條肽鏈組成,分子量約為37 KD,具有高度的專一性和高效的催化能力。生物學(xué)作用:牛凝血酶能夠催化纖維蛋白原水解釋放A肽和B肽,形成纖維蛋白單體,參與血液凝固和傷口愈合??蒲袘?yīng)用:牛凝血酶在重組蛋白的特異性斷裂、基因工程產(chǎn)品開發(fā)、以及作為診斷學(xué)中的凝血化驗(yàn)工具等方面展現(xiàn)出重要價(jià)值。
Trop-2,alsoknownasepithelialglycoprotein-1antigen(EGP-1),isaproteinthatinhumansisencodedbytheTACSTD2gene.Mutationsofthisgeneresultingelatinousdrop-likecornealdystrophy,anautosomalrecessivedisordercharacterizedbyseverecornealamyloidosisleadingtoblindness.產(chǎn)品性質(zhì)別名EGP1;EGP-1;TROP2;GA733-1;gp50;T16;TACSTD2;TROP-2;M1S1;TACD2UniprotNo.P09758表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)RecombinantBiotinylatedHumanTROP-2/TACSTD2ProteinisexpressedfromHEK293cellswithHistagandAvitagattheC-terminal.ItcontainsHis27-Thr274.分子量TheproteinhasapredictedMWof30.5kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto46-55kDabasedonTris-BisPAGEresult.純度>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC活性ELISAData:ImmobilizedAnti-TROP-2Antibody,hFcTagat0.5μg/mL(100μL/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanTROP-2,HisTagwiththeEC50of24.1ng/mLdeterminedbyELISA.0EUper1μgoftheproteinbytheLALmethod.制劑Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally5%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.泛素蛋白(Ubiquitin,簡稱Ub)是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的小分子蛋白,具有高度保守性。
IdeSProtease全稱免疫球蛋白G降解酶(ImmunoglubulinG-degradingenzymeofStreptococcuspyogenes,IdeS),是由人類致病菌釀膿鏈球菌(Streptococcuspyogenes)產(chǎn)生并分泌至胞外的一種半胱氨酸水解酶。該蛋白酶具有極高的底物特異性,能識(shí)別IgG,在抗體下鉸鏈區(qū)的特定位點(diǎn)進(jìn)行酶切,使IgG水解為完整的F(ab’)2片段和Fc片段。IdeS可識(shí)別人源和其他多種動(dòng)物來源的IgG,比如人、兔、猴、綿羊以及人動(dòng)物嵌合IgG等。IdeS具有獨(dú)特的底物選擇性,可以作為工具酶應(yīng)用于抗體類藥物或抗體融合蛋白藥物的結(jié)構(gòu)表征分析。本產(chǎn)品利用大腸桿菌重組表達(dá),純度高,具有良好的酶切活性,是用于表征抗體、Fc融合蛋白和抗體-藥物復(fù)合物的有價(jià)值的工具。產(chǎn)品信息規(guī)格2000U/5000U產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(Chinesesynonym)免疫球蛋白G降解酶英文別名(Englishsynonym)IdeSProtease來源(Source)大腸桿菌表達(dá)標(biāo)簽(label)N-terminalHisTag純度(Purity)經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,純度>95%分子量(Molecularweight)35.3kDa緩沖液組分(Buffer)50mM磷酸鈉,150mMNaCl(pH6.6),50%glycerolα-凝血酶在肝臟中作為非活性前體-凝血酶原合成,在凝血級聯(lián)反應(yīng)中被啟用,這種活性酶由285個(gè)氨基酸組成。Recombinant Human GHSR Protein-VLP
腸激酶作為研究工具,用于探索蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)-功能關(guān)系,以及在蛋白質(zhì)工程中進(jìn)行蛋白質(zhì)的定點(diǎn)突變。Substance P (1-7)
標(biāo)題:牛凝血酶(Bovine Thrombin)的高比活應(yīng)用及其在生物醫(yī)學(xué)研究中的重要性摘要牛凝血酶(Bovine Thrombin),一種高比活度的絲氨酸蛋白水解酶,具有>2000 IU/mg的特異性活性,廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床,本文綜述了牛凝血酶的分子特性、在血液凝固中的作用機(jī)制以及其在科研和工業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用。引言牛凝血酶是從牛血漿中提取的酶,分子量為37KD,由兩條肽鏈(31KD和6KD)通過二硫鍵組成。作為凝血過程中的關(guān)鍵酶,牛凝血酶催化纖維蛋白原(fibrinogen)水解,形成纖維蛋白單體,進(jìn)而促進(jìn)血凝塊的形成。由于其高度的序列專一性和水解效率,牛凝血酶不僅在生理止血中發(fā)揮作用,也作為分子生物學(xué)研究中的工具酶。材料與方法產(chǎn)品性質(zhì)分析:分析牛凝血酶的CAS號、分子量、比活度、外觀和純度等物理化學(xué)性質(zhì)。運(yùn)輸和保存方法:評估牛凝血酶的運(yùn)輸條件和長期儲(chǔ)存穩(wěn)定性。使用方法:探討牛凝血酶在不同實(shí)驗(yàn)條件下的溶解、復(fù)溶和消化條件。Substance P (1-7)
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,...